中文摘要 | 第3-4页 |
英文摘要 | 第4-5页 |
1 绪论 | 第9-18页 |
1.1 问题的提出和研究意义 | 第9-10页 |
1.1.1 问题的提出 | 第9-10页 |
1.1.2 研究意义 | 第10页 |
1.2 国内外研究进展简介 | 第10-16页 |
1.2.1 拓扑结构基底对细胞影响的研究概况 | 第10-12页 |
1.2.2 肝细胞钙离子通道研究概况 | 第12-14页 |
1.2.3 TRPV钙离子通道研究概况 | 第14-16页 |
1.3 研究目的和研究内容 | 第16页 |
1.3.1 研究目的 | 第16页 |
1.3.2 研究内容 | 第16页 |
1.4 技术路线 | 第16-17页 |
1.5 创新点 | 第17-18页 |
2 PDMS微柱阵列结构的加工及其与HepG2 细胞的复合 | 第18-23页 |
2.1 实验仪器、试剂和材料 | 第18页 |
2.1.1 实验仪器 | 第18页 |
2.1.2 试剂和材料 | 第18页 |
2.2 实验方法和步骤 | 第18-20页 |
2.2.1 PDMS微柱阵列型拓扑结构基底的设计和制备 | 第18-20页 |
2.2.2 HepG2 人肝肿瘤细胞株的培养 | 第20页 |
2.2.3 HepG2 细胞与PDMS微柱阵列结构及平面基底的复合培养 | 第20页 |
2.2.4 扫描电子显微镜制样及观察 | 第20页 |
2.3 实验结果 | 第20-22页 |
2.3.1 HepG2 细胞与PDMS拓扑结构和平面基底的复合 | 第20-22页 |
2.4 讨论和分析 | 第22页 |
2.5 本章小结 | 第22-23页 |
3 PDMS平面基底和微柱阵列型拓扑结构基底上HepG2 细胞TRPV通道蛋白相关mRNA的表达 | 第23-31页 |
3.1 实验仪器和试剂材料 | 第23-24页 |
3.1.1 实验仪器 | 第23页 |
3.1.2 试剂和材料 | 第23-24页 |
3.2 实验方法和步骤 | 第24-27页 |
3.2.1 样本中HepG2 细胞总RNA提取 | 第24页 |
3.2.2 总RNA反转录成cDNA | 第24-25页 |
3.2.3 实时荧光定量PCR反应 | 第25-26页 |
3.2.4 2%琼脂糖凝胶电泳检测 | 第26-27页 |
3.2.5 统计学处理 | 第27页 |
3.3 实验结果 | 第27-29页 |
3.3.1 HepG2 细胞中TRPV通道蛋白相关mRNA表达的确认 | 第27-28页 |
3.3.2 拓扑结构基底对HepG2 细胞TRPV1 和TRPV4mRNA表达的影响 | 第28-29页 |
3.4 讨论与分析 | 第29页 |
3.5 本章小结 | 第29-31页 |
4 PDMS平面基底和微柱阵列型拓扑结构基底上HepG2 细胞TRPV1、TRPV4 通道蛋白的表达 | 第31-39页 |
4.1 实验仪器和材料试剂 | 第31-33页 |
4.1.1 实验仪器 | 第31页 |
4.1.2 试剂和材料 | 第31-33页 |
4.2 实验方法和步骤 | 第33-34页 |
4.2.1 样本中HepG2 细胞总蛋白提取 | 第33页 |
4.2.2 免疫印迹实验 | 第33-34页 |
4.2.3 免疫荧光染色实验 | 第34页 |
4.2.4 统计学处理 | 第34页 |
4.3 实验结果 | 第34-37页 |
4.3.1 拓扑结构基底和平面基底上HepG2 细胞TRPV1 和TRPV4 蛋白表达的确认 | 第34-35页 |
4.3.2 拓扑结构基底对HepG2 细胞TRPV1 和TRPV4 蛋白表达的影响 | 第35-37页 |
4.4 讨论与分析 | 第37页 |
4.5 本章小结 | 第37-39页 |
5 PDMS平面基底和微柱阵列型拓扑结构基底上HepG2 细胞TRPV1、TRPV4 通道的功能响应性 | 第39-46页 |
5.1 实验仪器和材料试剂 | 第39-40页 |
5.1.1 实验器材 | 第39页 |
5.1.2 试剂和材料 | 第39-40页 |
5.2 实验方法和步骤 | 第40页 |
5.2.1 TRPV1 和TRPV4 功能响应的评价 | 第40页 |
5.2.2 统计学处理 | 第40页 |
5.3 实验结果 | 第40-43页 |
5.3.1 拓扑结构基底对HepG2 细胞TRPV1、TRPV4 通道功能响应性的影响 | 第40-43页 |
5.4 讨论与分析 | 第43-44页 |
5.5 本章小结 | 第44-46页 |
6 主要结论及后续工作展望 | 第46-48页 |
6.1 主要结论 | 第46-47页 |
6.2 后续工作展望 | 第47-48页 |
致谢 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-56页 |
附录 | 第56页 |
A. 作者在攻读硕士期间科研成果 | 第56页 |
B. 作者在攻读硕士学位期间参加的科研项目情况 | 第56页 |