| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 第1章 文献综述 | 第9-20页 |
| 1.1 短小蛇根草 | 第9-11页 |
| 1.2 植物次生代谢产物 | 第11-13页 |
| 1.3 喜树碱 | 第13-17页 |
| 1.4 植物中的信号转导途径 | 第17页 |
| 1.5 bHLH转录因子研究进展 | 第17-19页 |
| 1.6 本课题研究的背景及意义 | 第19-20页 |
| 第2章 材料与方法 | 第20-41页 |
| 2.1 研究材料 | 第20页 |
| 2.2 实验方法 | 第20-41页 |
| 2.2.1 培养基及常用试剂的配制 | 第20-21页 |
| 2.2.2 仪器设备 | 第21-24页 |
| 2.2.3 OpMYC2L1和OpMYC2L2基因的克隆 | 第24页 |
| 2.2.4 OpMYC2L1和OpMYC2L2的亚细胞定位 | 第24-28页 |
| 2.2.5 植物表达载体的构建 | 第28-29页 |
| 2.2.6 农杆菌C58C1介导的植物表达载体遗传转化 | 第29-30页 |
| 2.2.7 短小蛇根草转基因毛状根的阳性鉴定 | 第30-32页 |
| 2.2.8 短小蛇根草转基因毛状根阳性克隆的qRT-PCR分析 | 第32页 |
| 2.2.9 短小蛇根草转基因毛状根的有效成分检测 | 第32-34页 |
| 2.2.10 生化功能检测 | 第34-41页 |
| 第3章 结果与讨论 | 第41-66页 |
| 3.1 短小蛇根草基因筛选结果 | 第41-49页 |
| 3.1.1 短小蛇根草bHLH家族基因的获得及结构特征分析 | 第41-46页 |
| 3.1.2 OpbHLHs进化树分析 | 第46-47页 |
| 3.1.3 OpbHLHs的序列比对和保守结构域的识别 | 第47-48页 |
| 3.1.4 MYCs的序列比对 | 第48页 |
| 3.1.5 OpMYC2L1和OpMYC2L2蛋白的空间结构预测 | 第48-49页 |
| 3.2 基因特征的初步研究 | 第49-56页 |
| 3.2.1 短小蛇根草中OpMYCs组织表达谱分析 | 第49-50页 |
| 3.2.2 短小蛇根草中OpMYCs诱导表达谱分析 | 第50-53页 |
| 3.2.3 亚细胞定位 | 第53-56页 |
| 3.3 转基因验证分析 | 第56-59页 |
| 3.3.1 过表达载体pCAMBIA2300~+-OpMYCs的构建 | 第56-57页 |
| 3.3.2 抑制表达载体pCAMBIA2300~+-OpMYCs-SRDX的构建 | 第57页 |
| 3.3.3 pCAMBIA2300+空载体转基因短小蛇根草毛状根的鉴定 | 第57-58页 |
| 3.3.4 pCAMBIA2300~+-OpMYCs转基因毛状根的鉴定 | 第58-59页 |
| 3.3.5 pCAMBIA2300+-OpMYCs-SRDX转基因草毛状根的鉴定 | 第59页 |
| 3.4 喜树碱与裂环马钱子苷含量分析 | 第59-64页 |
| 3.4.1 基因表达qRT-PCR | 第59-60页 |
| 3.4.2 喜树碱及裂环马钱子苷含量分析 | 第60-62页 |
| 3.4.3 喜树碱合成途径中相关基因的表达分析 | 第62-64页 |
| 3.5 生化功能分析 | 第64-66页 |
| 3.5.1 OpMYCs和关键酶启动子的酵母单杂实验 | 第64页 |
| 3.5.2 OpMYCs和JAZs酵母双杂 | 第64-65页 |
| 3.5.3 双分子荧光互补实验 | 第65-66页 |
| 第4章 总结与展望 | 第66-68页 |
| 4.1 讨论与总结 | 第66-67页 |
| 4.1.1 OpbHLHs基因家族 | 第66-67页 |
| 4.1.2 OpMYCs基因特点与功能 | 第67页 |
| 4.2 展望 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-72页 |
| 致谢 | 第72-74页 |
| 附件 | 第74页 |
