| 中文摘要 | 第4-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 目录 | 第11-17页 |
| 第一篇 绪论 | 第17-53页 |
| 1.1 犬瘟热概述 | 第17-37页 |
| 1.1.1 犬瘟热病毒 | 第17-19页 |
| 1.1.2 病毒分离培养 | 第19-20页 |
| 1.1.3 病毒蛋白 | 第20-25页 |
| 1.1.4 致病机理和临床特征 | 第25-27页 |
| 1.1.5 流行病学 | 第27-30页 |
| 1.1.6 犬瘟热疫苗研究现状 | 第30-35页 |
| 1.1.7 犬瘟热病毒感染性克隆研究现状 | 第35-37页 |
| 1.2 犬瘟热病毒受体研究进展 | 第37-45页 |
| 1.2.1 信号淋巴细胞激活分子 | 第37-43页 |
| 1.2.2 Nectin-4 | 第43-44页 |
| 1.2.3 其他受体 | 第44-45页 |
| 1.2.4 总结 | 第45页 |
| 1.3 白细胞介素 18 研究进展 | 第45-53页 |
| 1.3.1 IL-18 的发现 | 第46页 |
| 1.3.2 IL-18 分子结构 | 第46页 |
| 1.3.3 IL-18 基因及基因调节 | 第46-47页 |
| 1.3.4 IL-18 产生和递呈 | 第47-48页 |
| 1.3.5 IL-18 的生物学功能 | 第48-50页 |
| 1.3.6 IL-18 对宿主免疫保护作用 | 第50-52页 |
| 1.3.7 展望 | 第52-53页 |
| 第二篇 研究内容 | 第53-107页 |
| 第一章 表达犬瘟热病毒 SLAM 受体的敏感细胞系构建及病毒分离与鉴定 | 第53-71页 |
| 1.1 材料方法 | 第55-60页 |
| 1.1.1 病料、质粒和细胞 | 第55页 |
| 1.1.2 主要试剂与仪器 | 第55页 |
| 1.1.3 引物的设计与合成 | 第55-56页 |
| 1.1.4 真核表达载体构建 | 第56-57页 |
| 1.1.5 表达 SLAM 蛋白 Vero 细胞系的构建 | 第57-58页 |
| 1.1.6 RT-PCR 方法鉴定 SLAM/Vero 细胞系 | 第58页 |
| 1.1.7 间接免疫荧光方法鉴定 | 第58页 |
| 1.1.8 流式细胞检测 SLAM/Vero 细胞系 | 第58-59页 |
| 1.1.9 猴源和犬源 CDV 的分离与鉴定 | 第59-60页 |
| 1.1.10 病毒在 SLAM／Vero 细胞生长特性研究 | 第60页 |
| 1.2 结果 | 第60-67页 |
| 1.2.1 真核表达载体的构建 | 第60-61页 |
| 1.2.2 SLAM/Vero 细胞系的构建与鉴定 | 第61-63页 |
| 1.2.3 利用 Vero/DogSLAM 细胞系分离犬瘟热病毒 | 第63-65页 |
| 1.2.4 犬源 CDV 和猴源 CDV 对不同动物 SLAM 受体利用比较分析 | 第65-67页 |
| 1.3 讨论 | 第67-69页 |
| 1.4 小结 | 第69-71页 |
| 第二章 现行不同疫苗株犬瘟热病毒免疫效果评价及其 H 蛋白基因特性分析研究 | 第71-91页 |
| 2.1 材料与方法 | 第73-77页 |
| 2.1.1 疫苗毒株、细胞和动物细胞、质粒与单克隆抗体 | 第73页 |
| 2.1.2 主要试剂与仪器 | 第73-74页 |
| 2.1.3 不同疫苗株 CDV 在犬和狐狸体内免疫效果评价 | 第74页 |
| 2.1.4 引物的设计与合成 | 第74-75页 |
| 2.1.5 RT-PCR 克隆 4 株疫苗株 CDV 的 H 基因 | 第75页 |
| 2.1.6 CDV H 基因序列分析 | 第75-76页 |
| 2.1.7 真核表达载体构建 | 第76-77页 |
| 2.1.8 细胞转染 | 第77页 |
| 2.1.9 间接免疫荧光检测 | 第77页 |
| 2.1.10 犬瘟热病毒 H 蛋白三维构象建立 | 第77页 |
| 2.2 结果 | 第77-85页 |
| 2.2.1 不同疫苗株 CDV 在犬和狐狸体内免疫效果评估 | 第77-78页 |
| 2.2.2 PCR 扩增结果 | 第78页 |
| 2.2.3 不同毒株 H 基因核苷酸及其对应的氨基酸同源性比较 | 第78-79页 |
| 2.2.4 H 基因系统发生进化树分析 | 第79-80页 |
| 2.2.5 H 基因氨基酸序列分析结果 | 第80-82页 |
| 2.2.6 犬瘟热病毒 H 蛋白糖基化位点分析 | 第82-83页 |
| 2.2.7 野生株和疫苗株犬瘟热病毒 H 蛋白同源模型构建及比较 | 第83-85页 |
| 2.3 讨论 | 第85-90页 |
| 2.4 小结 | 第90-91页 |
| 第三章 表达白细胞介素 18 的重组犬瘟热病毒感染性克隆构建与初步应用 | 第91-107页 |
| 3.1 材料方法 | 第92-99页 |
| 3.1.1 病毒株，质粒和细胞 | 第92-93页 |
| 3.1.2 主要试剂与仪器 | 第93页 |
| 3.1.3 引物的设计与合成 | 第93-94页 |
| 3.1.4 感染性克隆载体的构建 | 第94-95页 |
| 3.1.5 病毒的拯救 | 第95-96页 |
| 3.1.6 RT-PCR 及测序鉴定 | 第96-97页 |
| 3.1.7 Western blotting 鉴定 | 第97页 |
| 3.1.8 重组病毒的培养与滴定 | 第97页 |
| 3.1.9 重组病毒生长动力学研究 | 第97-98页 |
| 3.1.10 IL-18 的生物活性评估 | 第98-99页 |
| 3.2 结果 | 第99-105页 |
| 3.2.1 表达犬 IL-18 基因的重组真核表达载体构建 | 第99页 |
| 3.2.2 不同载体体系表达的 IL-18 活性评定 | 第99-100页 |
| 3.2.3 粘附人 IL-2 信号肽的犬或鼠 IL-18 的重组犬瘟热病毒载体构建 | 第100-101页 |
| 3.2.4 重组病毒的拯救及其鉴定 | 第101-102页 |
| 3.2.5 Western blotting 鉴定重组病毒 | 第102-103页 |
| 3.2.6 重组病毒生长动力学研究 | 第103-104页 |
| 3.2.7 重组病毒分泌 IL-18 的生物活性能力检测 | 第104-105页 |
| 3.3 讨论 | 第105-106页 |
| 3.4 小结 | 第106-107页 |
| 结论 | 第107-109页 |
| 参考文献 | 第109-133页 |
| 导师简介 | 第133-134页 |
| 作者简介 | 第134-135页 |
| 攻读博士期间所得的科研成果 | 第135-136页 |
| 致谢 | 第136-137页 |
