| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 第一篇 文献综述 | 第11-27页 |
| 1 金黄色葡萄球菌研究现状 | 第11-15页 |
| 1.1 金黄色葡萄球菌的生物学性状 | 第11-12页 |
| 1.2 金黄色葡萄球菌的流行病学 | 第12-13页 |
| 1.3 金黄色葡萄球菌的致病性 | 第13-14页 |
| 1.4 金黄色葡萄球菌的鉴定和分型 | 第14-15页 |
| 1.5 近年来金黄色葡萄球菌引起的食物中毒事件 | 第15页 |
| 2 金黄色葡萄球菌肠毒素研究现状 | 第15-20页 |
| 2.1 肠毒素分型 | 第16页 |
| 2.2 肠毒素的理化性质 | 第16-17页 |
| 2.3 肠毒素的致病性 | 第17页 |
| 2.4 肠毒素的检测方法 | 第17-20页 |
| 2.4.1 动物实验法 | 第18页 |
| 2.4.2 免疫血清学方法 | 第18-19页 |
| 2.4.3 核酸扩增法 | 第19页 |
| 2.4.4 仪器检测法 | 第19-20页 |
| 3 PCR原理及应用 | 第20-21页 |
| 4 DHPLC原理及应用 | 第21-24页 |
| 4.1 DHPLC原理 | 第21-22页 |
| 4.2 DHPLC基本操作方法 | 第22页 |
| 4.3 DHPLC主要技术特点 | 第22-24页 |
| 5 本试验研究的目的及意义 | 第24-25页 |
| 6 本试验研究的难点及需要解决的问题 | 第25-27页 |
| 第二篇 试验研究 | 第27-56页 |
| 前言 | 第27页 |
| 1 材料 | 第27-31页 |
| 1.1 菌株 | 第27-28页 |
| 1.2 主要仪器设备 | 第28-29页 |
| 1.3 试剂和药品 | 第29-30页 |
| 1.3.1 试剂 | 第29页 |
| 1.3.2 溶液、培养基的配制 | 第29-30页 |
| 1.4 引物 | 第30-31页 |
| 2 方法 | 第31-38页 |
| 2.1 金黄色葡萄球菌DNA的提取 | 第31-33页 |
| 2.1.1 菌液的培养 | 第31页 |
| 2.1.2 DNA提取方法 | 第31-32页 |
| 2.1.3 DNA浓度和纯度的测定 | 第32页 |
| 2.1.4 DNA完整性检测 | 第32-33页 |
| 2.2 5种肠毒素PCR-DHPLC检测及分型方法的建立 | 第33-34页 |
| 2.2.1 5对引物PCR退火温度的优化 | 第33页 |
| 2.2.2 DNA模板用量的优化 | 第33页 |
| 2.2.3 PCR-DHPLC方法的特异性试验 | 第33页 |
| 2.2.4 PCR-DHPLC方法的重复性试验 | 第33页 |
| 2.2.5 PCR-DHPLC方法的灵敏度试验 | 第33-34页 |
| 2.2.6 PCR-DHPLC方法的实际应用 | 第34页 |
| 2.3 5种肠毒素MPCR-DHPLC检测及分型方法的建立 | 第34-38页 |
| 2.3.1 5种肠毒素MPCR反应体系的确立 | 第34-37页 |
| 2.3.2 MPCR-DHPLC方法的特异性试验 | 第37页 |
| 2.3.3 MPCR-DHPLC方法的重复性试验 | 第37页 |
| 2.3.4 MPCR-DHPLC方法的灵敏度试验 | 第37页 |
| 2.3.5 MPCR-DHPLC方法的实际应用 | 第37-38页 |
| 2.4 金黄色葡萄球菌肠毒素mini-VIDAS的检测 | 第38页 |
| 3 结果与分析 | 第38-56页 |
| 3.1 DNA的提取 | 第38-39页 |
| 3.1.1 DNA浓度和纯度测定结果 | 第38页 |
| 3.1.2 DNA完整性检测 | 第38-39页 |
| 3.2 5种肠毒素PCR-DHPLC检测及分型方法的建立 | 第39-50页 |
| 3.2.1 5对引物PCR退火温度的优化结果 | 第39-40页 |
| 3.2.2 DNA模板用量的优化结果 | 第40-42页 |
| 3.2.3 PCR-DHPLC方法的特异性试验结果 | 第42-45页 |
| 3.2.4 PCR-DHPLC方法的重复性试验结果 | 第45页 |
| 3.2.5 PCR-DHPLC方法的灵敏度试验结果 | 第45-48页 |
| 3.2.6 PCR-DHPLC检测及分型方法的实际应用结果 | 第48-50页 |
| 3.3 5种肠毒素MPCR-DHPLC检测及分型方法的建立 | 第50-55页 |
| 3.3.1 MPCR反应体系的确立结果 | 第50-52页 |
| 3.3.2 MPCR-DHPLC方法的特异性试验结果 | 第52-53页 |
| 3.3.3 MPCR-DHPLC方法的重复性试验结果 | 第53页 |
| 3.3.4 MPCR-DHPLC方法的灵敏度试验结果 | 第53-54页 |
| 3.3.5 MPCR-DHPLC检测及分型方法的实际应用结果 | 第54-55页 |
| 3.4 金黄色葡萄球菌肠毒素mini-VIDAS的检测结果 | 第55-56页 |
| 第三篇 讨论 | 第56-59页 |
| 1 DNA的提取 | 第56页 |
| 2 引物设计和MPCR优化 | 第56-57页 |
| 3 肠毒素MPCR-DHPLC的检测及分型 | 第57-58页 |
| 4 肠毒素的检测与分布 | 第58-59页 |
| 第四篇 展望 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-68页 |
| 附录 | 第68-71页 |
| 致谢 | 第71页 |
