| 摘要 | 第3-4页 |
| ABSTRACT | 第4-5页 |
| 第一章 文献综述 | 第8-17页 |
| 1.1 枯草芽孢杆菌核黄素的合成与转化 | 第8-10页 |
| 1.2 枯草芽孢杆菌磷酸核糖焦磷酸的合成 | 第10-11页 |
| 1.3 枯草芽孢杆菌嘌呤核苷酸合成 | 第11-14页 |
| 1.3.1 嘌呤核苷酸生物合成途径 | 第11-12页 |
| 1.3.2 嘌呤操纵子的结构 | 第12页 |
| 1.3.3 嘌呤操纵子的转录调控机制 | 第12-13页 |
| 1.3.4 嘌呤操纵子的去调控 | 第13-14页 |
| 1.4 mRNA 稳定子 | 第14-16页 |
| 1.5 本文的研究目的与意义 | 第16-17页 |
| 第二章 材料与方法 | 第17-30页 |
| 2.1 实验材料 | 第17-23页 |
| 2.1.1 菌株和质粒 | 第17-18页 |
| 2.1.2 PCR 引物 | 第18-20页 |
| 2.1.3 主要药品 | 第20-21页 |
| 2.1.4 主要试剂 | 第21页 |
| 2.1.5 培养基 | 第21-22页 |
| 2.1.6 主要仪器 | 第22-23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-30页 |
| 2.2.1 B. subtilis 染色体 DNA 的提取 | 第23页 |
| 2.2.2 质粒的提取-CTAB 法 | 第23-24页 |
| 2.2.3 普通 PCR 扩增 | 第24页 |
| 2.2.4 重叠 PCR 拼接 | 第24-25页 |
| 2.2.5 无标记基因修饰[ | 第25-26页 |
| 2.2.6 琼脂糖凝胶电泳 | 第26-27页 |
| 2.2.7 DNA 酶切验证 | 第27页 |
| 2.2.8 B. subtilis 感受态细胞制备及转化 | 第27页 |
| 2.2.9 菌种的保藏 | 第27页 |
| 2.2.10 细菌总 RNA 的提取 | 第27-28页 |
| 2.2.11 cDNA 的合成 | 第28页 |
| 2.2.12 荧光定量 PCR | 第28-29页 |
| 2.2.13 摇瓶发酵培养 | 第29页 |
| 2.2.14 菌体生长曲线测定 | 第29页 |
| 2.2.15 核黄素定量分析 | 第29-30页 |
| 第三章 结果与分析 | 第30-54页 |
| 3.1 guaC 基因的敲除 | 第30-34页 |
| 3.1.1 同源重组片段 SZCRX 片段的扩增与拼接 | 第30-32页 |
| 3.1.2 SZCRX 片段的转化与转化子的筛选验证 | 第32-34页 |
| 3.2 purA 基因的敲除 | 第34-38页 |
| 3.2.1 同源重组片段 SZCRX 片段的扩增与拼接 | 第34-36页 |
| 3.2.2 SZCRX 片段的转化与转化子的筛选验证 | 第36-38页 |
| 3.3 嘌呤操纵子的组成型表达及其效应 | 第38-47页 |
| 3.3.1 purR-yabJ基因簇的敲除 | 第38-41页 |
| 3.3.2 嘌呤操纵子组成型表达及其转录水平分析 | 第41-46页 |
| 3.3.3 修饰后的嘌呤操纵子的转录分析 | 第46-47页 |
| 3.4 guaA 和 guaB 基因的序列比对 | 第47-48页 |
| 3.5 ribC 基因启动子的点突变及转录分析 | 第48-51页 |
| 3.5.1 同源重组片段SER片段的扩增与拼接 | 第49-50页 |
| 3.5.2 SER 片段转化与转化子筛选验证 | 第50页 |
| 3.5.3 ribC 基因启动子突变型的转录分析 | 第50-51页 |
| 3.6 重组菌株的生长与核黄素合成 | 第51-54页 |
| 第四章 结论与展望 | 第54-55页 |
| 4.1 主要结论 | 第54页 |
| 4.2 展望 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-60页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第60-61页 |
| 致谢 | 第61页 |
