| 符号说明 | 第4-8页 |
| 中文摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第12-32页 |
| 1.1 植物高温逆境生物学 | 第12-25页 |
| 1.1.1 植物适应高温的生理基础 | 第12-13页 |
| 1.1.2 激素对高温胁迫的调控网络 | 第13-15页 |
| 1.1.2.1 生长素对高温的调控 | 第13-14页 |
| 1.1.2.2 脱落酸对高温的调控 | 第14页 |
| 1.1.2.3 水杨酸对高温的调节 | 第14-15页 |
| 1.1.2.4 褪黑素对高温的调节 | 第15页 |
| 1.1.3 植物响应高温胁迫的分子机制 | 第15-21页 |
| 1.1.3.1 温度受体 | 第15-16页 |
| 1.1.3.2 热激转录因子HSF和热激蛋白HSP响应通路 | 第16-20页 |
| 1.1.3.3 高温胁迫过程中ROS的代谢与平衡 | 第20-21页 |
| 1.1.4 植物响应高温胁迫的表观遗传调控 | 第21-25页 |
| 1.1.4.1 DNA甲基化 | 第21页 |
| 1.1.4.2 组蛋白修饰 | 第21-22页 |
| 1.1.4.3 染色质重塑和组蛋白分子伴侣 | 第22-23页 |
| 1.1.4.4 小分子RNA | 第23-25页 |
| 1.1.4.5 植物对高温胁迫的隔代记忆 | 第25页 |
| 1.2 长链非编码RNA | 第25-31页 |
| 1.2.1 长链非编码RNA的概述 | 第25-27页 |
| 1.2.2 LncRNA在植物中的研究现状 | 第27-31页 |
| 1.2.2.1 ENOD40、ASCO和IPS1发挥诱饵作用 | 第27-28页 |
| 1.2.2.2 COOLAIR和COLDAIR协调染色体重塑 | 第28-29页 |
| 1.2.2.3 反义转录本调控mRNA的稳定性和翻译 | 第29页 |
| 1.2.2.4 LncRNA影响DNA的甲基化 | 第29-30页 |
| 1.2.2.5 LncRNAAPOLO导致染色质结构改变 | 第30-31页 |
| 1.3 本研究的目的及其意义 | 第31-32页 |
| 2 材料与方法 | 第32-46页 |
| 2.1 实验材料 | 第32-34页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第32页 |
| 2.1.2 菌株与质粒 | 第32页 |
| 2.1.3 酶与各种生化试剂 | 第32-33页 |
| 2.1.4 引物 | 第33-34页 |
| 2.2 实验方法 | 第34-45页 |
| 2.2.1 植物基因组的提取与纯化 | 第34-35页 |
| 2.2.1.1 植物基因组的提取 | 第34页 |
| 2.2.1.2 植物基因组的纯化 | 第34-35页 |
| 2.2.2 载体构建 | 第35-37页 |
| 2.2.2.1 PCR扩增 | 第35页 |
| 2.2.2.2 DNA片段的回收(试剂盒法) | 第35-36页 |
| 2.2.2.3 平末端片段加尾 | 第36页 |
| 2.2.2.4 目的片段与克隆载体的连接 | 第36页 |
| 2.2.2.5 酶切和回收 | 第36-37页 |
| 2.2.2.6 酶切目的片段与表达载体的连接反应 | 第37页 |
| 2.2.3 大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第37-38页 |
| 2.2.3.1 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第37-38页 |
| 2.2.3.2 大肠杆菌的转化 | 第38页 |
| 2.2.4 大肠杆菌中质粒的提取 | 第38-40页 |
| 2.2.4.1 大量法提质粒 | 第38-39页 |
| 2.2.4.2 小量碱法提质粒 | 第39-40页 |
| 2.2.5 农杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第40-41页 |
| 2.2.5.1 根癌农杆菌GV3101感受态细胞的制备 | 第40页 |
| 2.2.5.2 冻融法转化农杆菌细胞 | 第40-41页 |
| 2.2.6 拟南芥转化及转基因植株的鉴定 | 第41页 |
| 2.2.6.1 拟南芥转化 | 第41页 |
| 2.2.6.2 转基因植株鉴定 | 第41页 |
| 2.2.7 RNA提取、纯化与反转录 | 第41-43页 |
| 2.2.7.1 TRIzol法提取RNA | 第41-42页 |
| 2.2.7.2 RNA中基因组DNA的去除 | 第42页 |
| 2.2.7.3 反转录 | 第42-43页 |
| 2.2.8 实时定量PCR | 第43-44页 |
| 2.2.9 转基因拟南芥的GUS组织化学染色分析 | 第44页 |
| 2.2.10 农杆菌介导的烟草瞬时转化 | 第44-45页 |
| 2.2.11 链特异转录组测序流程 | 第45页 |
| 2.3 网络资源 | 第45-46页 |
| 3 结果与分析 | 第46-54页 |
| 3.1 拟南芥中高温胁迫相关lncRNA的筛选 | 第46-47页 |
| 3.2 HAL6正调拟南芥高温胁迫耐受性 | 第47-50页 |
| 3.2.1 HAL6的分子特征分析 | 第47页 |
| 3.2.2 拟南芥HAL6超表达株系表型分析 | 第47-48页 |
| 3.2.2.1 HAL6超表达转基因株系的获得 | 第48页 |
| 3.2.2.2 HAL6超表达株系的高温胁迫表型分析 | 第48页 |
| 3.2.3 拟南芥HAL6RNAi株系表型分析 | 第48-50页 |
| 3.3 HAL6的表达模式分析 | 第50-52页 |
| 3.3.1 组织部位表达模式分析 | 第50页 |
| 3.3.2 诱导表达模式分析 | 第50页 |
| 3.3.3 亚细胞定位分析 | 第50-52页 |
| 3.4 HAL6调控高温胁迫抗性的分子机制 | 第52-54页 |
| 3.4.1 HAL6不通过顺式作用调控耐热性 | 第52页 |
| 3.4.2 HAL6 调控耐热性与 sPEP 无关 | 第52页 |
| 3.4.3 HAL6位于HSFA2和HSP101的下游 | 第52-54页 |
| 4 讨论 | 第54-56页 |
| 4.1 LncRNA在调控植物的高温胁迫响应过程中发挥重要作用 | 第54-55页 |
| 4.2 HSF和HSP下游新的高温胁迫信号通路的鉴定 | 第55-56页 |
| 5 结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-69页 |
| 致谢 | 第69页 |
