| 中文摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-12页 |
| 1 前言 | 第13-22页 |
| 1.1 黄瓜连作障碍 | 第13-18页 |
| 1.1.1 黄瓜连作障碍产生的原因 | 第13-15页 |
| 1.1.1.1 生物因子 | 第14页 |
| 1.1.1.2 土壤养分不均衡 | 第14页 |
| 1.1.1.3 土壤盐渍化 | 第14-15页 |
| 1.1.1.4 化感作用 | 第15页 |
| 1.1.2 黄瓜连作障碍解决的方法 | 第15-18页 |
| 1.1.2.1 无土栽培 | 第16页 |
| 1.1.2.2 选育良种与嫁接技术 | 第16页 |
| 1.1.2.3 土壤消毒灭菌 | 第16-17页 |
| 1.1.2.4 合理轮作、间套 | 第17页 |
| 1.1.2.5 合理施肥 | 第17-18页 |
| 1.1.2.6 施加土壤菌肥 | 第18页 |
| 1.2 植物化感作用的来源 | 第18-19页 |
| 1.3 土壤连作障碍中酚酸研究现状 | 第19页 |
| 1.4 酚酸降解菌的研究进展 | 第19-20页 |
| 1.5 本实验的研究内容、目的及意义 | 第20-22页 |
| 1.5.1 实验内容 | 第20页 |
| 1.5.2 实验目的 | 第20页 |
| 1.5.3 实验意义 | 第20-22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-33页 |
| 2.1 实验材料与试剂 | 第22-23页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第22页 |
| 2.1.2 土壤样品 | 第22页 |
| 2.1.3 培养基 | 第22-23页 |
| 2.1.3.1 LB培养基 | 第22页 |
| 2.1.3.2 初筛选择性培养基 | 第22页 |
| 2.1.3.3 复筛选择性培养基 | 第22页 |
| 2.1.3.4 混合酚酸选择性培养基 | 第22页 |
| 2.1.3.5 葡萄糖培养基 | 第22-23页 |
| 2.1.3.6 Hoagland营养液 | 第23页 |
| 2.1.4 实验试剂 | 第23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-33页 |
| 2.2.1 高效降解菌的筛选 | 第23页 |
| 2.2.1.1 降解菌的初筛、分离、纯化 | 第23页 |
| 2.2.1.2 降解菌的复筛 | 第23页 |
| 2.2.2 细菌的DNA提取和分子鉴定 | 第23-25页 |
| 2.2.2.1 细菌DNA提取 | 第23-24页 |
| 2.2.2.2 菌株16SrDNA的PCR扩增 | 第24-25页 |
| 2.2.2.3 16SrDNA序列测定及分析 | 第25页 |
| 2.2.3 选择性培养基的确定 | 第25页 |
| 2.2.4 高效液相色谱检测发酵液中代谢产物种类及含量 | 第25-26页 |
| 2.2.4.1 样品处理 | 第25页 |
| 2.2.4.2 高效液相色谱检测 | 第25-26页 |
| 2.2.5 P13生长条件的优化 | 第26页 |
| 2.2.5.1 单因素试验 | 第26页 |
| 2.2.5.2 Box-Behnken中心组合设计 | 第26页 |
| 2.2.6 菌体抗氧化酶的提取 | 第26-27页 |
| 2.2.6.1 P13菌体培养 | 第26-27页 |
| 2.2.6.2 降解菌抗氧化酶的提取 | 第27页 |
| 2.2.7 黄瓜的培育 | 第27页 |
| 2.2.8 丙二醛(MDA)含量测定 | 第27-28页 |
| 2.2.9 O_2·~-含量测定 | 第28页 |
| 2.2.10 H_2O_2含量测定 | 第28页 |
| 2.2.11 黄瓜叶片抗氧化酶的提取 | 第28页 |
| 2.2.12 抗氧化酶活性测定 | 第28页 |
| 2.2.13 蛋白质含量的测定 | 第28页 |
| 2.2.14 AsA和GSH含量的测定 | 第28-29页 |
| 2.2.15 RNA的提取 | 第29页 |
| 2.2.16 黄瓜抗氧化酶基因转录水平荧光定量PCR的测定 | 第29-30页 |
| 2.2.17 土壤酶活性的测定 | 第30-32页 |
| 2.2.17.1 碱性磷酸酶含量测定 | 第30-31页 |
| 2.2.17.2 蔗糖酶含量测定 | 第31页 |
| 2.2.17.3 脲酶含量测定 | 第31-32页 |
| 2.2.17.4 过氧化氢酶含量测定 | 第32页 |
| 2.2.18 根际土壤中酚酸含量的测定 | 第32页 |
| 2.2.19 实验数据分析 | 第32-33页 |
| 3 结果分析 | 第33-48页 |
| 3.1 菌株筛选 | 第33页 |
| 3.1.1 初筛 | 第33页 |
| 3.1.2 复筛 | 第33页 |
| 3.2 细菌DNA的提取及16SrDNA扩增 | 第33-34页 |
| 3.2.1 细菌DNA提取 | 第33-34页 |
| 3.2.2 16SrDNA扩增 | 第34页 |
| 3.3 系统发育树的构建 | 第34-35页 |
| 3.4 HPLC检测P13代谢产物 | 第35-36页 |
| 3.5 单因素条件优化 | 第36-38页 |
| 3.6 响应面分析试验 | 第38-42页 |
| 3.7 P13菌体抗氧化酶活性测定 | 第42页 |
| 3.8 P13对黄瓜生长的影响 | 第42-48页 |
| 3.8.1 四种处理下黄瓜植株生长情况 | 第42-43页 |
| 3.8.2 四种处理下黄瓜叶片中MDA、O_2·~-及H_2O_2的含量变化 | 第43-44页 |
| 3.8.3 四种处理下黄瓜叶片抗氧化酶活性变化 | 第44-45页 |
| 3.8.4 四种处理下黄瓜叶片中AsA、GSH含量变化 | 第45页 |
| 3.8.5 荧光定量PCR测定四种处理下抗氧化酶基因的转录水平 | 第45-46页 |
| 3.8.6 四种处理下黄瓜根际土土壤酶活性变化 | 第46-47页 |
| 3.8.7 四种处理下黄瓜根际土中阿魏酸、对羟基苯甲酸的含量变化 | 第47-48页 |
| 4 讨论 | 第48-52页 |
| 4.1 不动杆菌P13缓解黄瓜连作的研究 | 第48-51页 |
| 4.1.1 不动杆菌P13降解FA和PHBA的代谢产物 | 第48页 |
| 4.1.2 不动杆菌P13对黄瓜生长情况的影响 | 第48页 |
| 4.1.3 不动杆菌P13对MDA、O_2·~-和H_2O_2含量的影响 | 第48-49页 |
| 4.1.4 不动杆菌P13对抗氧化酶的影响 | 第49-50页 |
| 4.1.5 不动杆菌P13对AsA和GSH的影响 | 第50页 |
| 4.1.6 不动杆菌P13对黄瓜根际土壤酶的影响 | 第50-51页 |
| 4.2 菌肥的应用前景 | 第51-52页 |
| 5 结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-59页 |
| 致谢 | 第59页 |
