摘要 | 第7-10页 |
ABSTRACT | 第10-12页 |
符号说明及缩略词 | 第13-14页 |
第一章 研究背景及意义 | 第14-32页 |
1.1 植物胞壁多糖的组成及降解酶组分 | 第14-19页 |
1.1.1 纤维素及纤维素降解酶 | 第15-16页 |
1.1.2 半纤维素组分及半纤维素降解酶系 | 第16-18页 |
1.1.3 果胶组分及果胶降解酶系 | 第18-19页 |
1.2 木质纤维素降解真菌 | 第19-22页 |
1.2.1 里氏木霉 | 第19-20页 |
1.2.2 嗜热毁丝菌 | 第20-21页 |
1.2.3 黑曲霉 | 第21页 |
1.2.4 粗糙脉孢菌 | 第21页 |
1.2.5 草酸青霉 | 第21-22页 |
1.3 丝状真菌木质纤维素降解酶基因表达的调控机制 | 第22-26页 |
1.3.1 木质纤维素降解酶表达的激活因子 | 第22-25页 |
1.3.2 木质纤维素降解酶表达的抑制因子 | 第25-26页 |
1.4 木质纤维素降解酶生产菌株的改造 | 第26-32页 |
1.4.1 里氏木霉的菌株改造 | 第26-29页 |
1.4.2 嗜热毁丝菌的菌株改造 | 第29-30页 |
1.4.3 草酸青霉的菌株改造 | 第30-32页 |
第二章 转录因子ClrB激活木质纤维素降解酶表达机理研究 | 第32-68页 |
2.1 材料和方法 | 第33-42页 |
2.1.1 菌株 | 第33-34页 |
2.1.2 培养基和培养条件 | 第34-36页 |
2.1.3 常用试剂盒和仪器 | 第36页 |
2.1.4 各基因敲除盒和各基因过表达盒的构建 | 第36-37页 |
2.1.5 草酸青霉原生质体的制备及转化 | 第37-38页 |
2.1.6 转化子的分纯 | 第38页 |
2.1.7 基因组DNA的小量提取 | 第38-39页 |
2.1.8 菌株表型平板观察 | 第39页 |
2.1.9 胞外木质纤维素降解酶活力测定 | 第39-40页 |
2.1.10 菌株RNA的提取 | 第40-41页 |
2.1.11 Infusion方法构建克隆质粒 | 第41页 |
2.1.12 酵母转化 | 第41-42页 |
2.2 结果与讨论 | 第42-67页 |
2.2.1 转录激活因子ClrB在草酸青霉中的功能鉴定 | 第42-53页 |
2.2.2 转录激活因子ClrB功能结构域的鉴定 | 第53-59页 |
2.2.3 clrB和bgl2的遗传相互作用研究 | 第59-67页 |
2.3 本章小结 | 第67-68页 |
第三章 转录因子XlnR的活性改造对木质纤维素降解酶表达的影响 | 第68-100页 |
3.1 材料和方法 | 第68-73页 |
3.1.1 菌株 | 第68-69页 |
3.1.2 各基因敲除盒及各表达盒的构建 | 第69-71页 |
3.1.3 草酸青霉原生质体的制备及转化 | 第71页 |
3.1.4 菌株表型平板观察 | 第71页 |
3.1.5 菌株RNA的提取 | 第71页 |
3.1.6 胞外木质纤维素降解酶活力测定 | 第71-72页 |
3.1.7 木质纤维素降解酶活性酶谱分析 | 第72-73页 |
3.2 结果与讨论 | 第73-98页 |
3.2.1 转录激活因子XlnR在草酸青霉中的功能鉴定 | 第73-76页 |
3.2.2 XlnR~(A871V)对木质纤维素降解酶系表达的影响 | 第76-86页 |
3.2.3 木质纤维素降解酶高产菌株的构建 | 第86-98页 |
3.3 本章小结 | 第98-100页 |
第四章 嵌合转录因子CX~C激活木质纤维素降解酶表达研究 | 第100-116页 |
4.1 材料和方法 | 第100-101页 |
4.1.1 菌株 | 第100-101页 |
4.1.2 各基因表达盒构建 | 第101页 |
4.1.3 菌株表型平板观察 | 第101页 |
4.1.4 胞外木质纤维素降解酶活力测定 | 第101页 |
4.1.5 菌株RNA的提取 | 第101页 |
4.2 结果与讨论 | 第101-114页 |
4.2.1 嵌合转录因子OE-CX~C-S和OE-CX~C-L的设计 | 第101-102页 |
4.2.2 纤维素诱导条件下嵌合蛋白功能研究 | 第102-104页 |
4.2.3 木聚糖诱导条件下嵌合蛋白功能研究 | 第104-108页 |
4.2.4 碳源饥饿条件下嵌合蛋白功能研究 | 第108-110页 |
4.2.5 碳降解物阻遏条件下嵌合蛋白功能研究 | 第110-112页 |
4.2.6 复合碳源条件下嵌合蛋白功能研究 | 第112-114页 |
4.3 本章小结 | 第114-116页 |
第五章 XlnR同源蛋白AraR及PDE_07172生物学功能初探 | 第116-128页 |
5.1 材料和方法 | 第116-117页 |
5.1.1 菌株 | 第116页 |
5.1.2 菌株的构建 | 第116-117页 |
5.1.3 菌株表型平板观察 | 第117页 |
5.1.4 胞外木质纤维素降解酶活力测定 | 第117页 |
5.1.5 菌株RNA的提取 | 第117页 |
5.1.6 分子系统进化树的构建 | 第117页 |
5.2 结果与讨论 | 第117-126页 |
5.2.1 转录因子AraR和PDE_07172的系统进化分析 | 第117-119页 |
5.2.2 转录因子AraR对碳代谢的调控作用 | 第119-123页 |
5.2.3 转录因子XlnR和AraR共同调控戊糖代谢和阿拉伯呋喃糖苷酶的表达 | 第123-125页 |
5.2.4 转录因子PDE_07172生物学功能初探 | 第125-126页 |
5.3 本章小结 | 第126-128页 |
全文总结及展望 | 第128-130页 |
参考文献 | 第130-148页 |
攻读学位期间已发表论文 | 第148-150页 |
致谢 | 第150-152页 |
附录 | 第152-160页 |
学位论文评阅及答辩情况表 | 第160页 |