| 符号说明 | 第4-8页 |
| 中文摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9页 |
| 1 前言 | 第10-16页 |
| 1.1 禾谷镰刀菌 | 第10-13页 |
| 1.1.1 禾谷镰刀菌生物学特征 | 第10页 |
| 1.1.2 禾谷镰刀菌的生活史 | 第10-11页 |
| 1.1.3 禾谷镰刀菌的寄主和症状 | 第11-12页 |
| 1.1.4 禾谷镰刀菌与毒素 | 第12-13页 |
| 1.1.5 防治措施 | 第13页 |
| 1.2 水通道蛋白 | 第13-15页 |
| 1.2.1 水通道蛋白的发现 | 第13-14页 |
| 1.2.2 水通道蛋白的结构 | 第14页 |
| 1.2.3 水通道蛋白研究进展 | 第14-15页 |
| 1.3 研究目的和意义 | 第15-16页 |
| 2 材料和方法 | 第16-42页 |
| 2.1 实验材料 | 第16-27页 |
| 2.1.1 主要软件和数据库 | 第16页 |
| 2.1.1.1 主要软件工具 | 第16页 |
| 2.1.1.2 主要数据库 | 第16页 |
| 2.1.2 菌株和载体 | 第16页 |
| 2.1.3 工具酶和主要试剂 | 第16-17页 |
| 2.1.4 主要培养基配方 | 第17-20页 |
| 2.1.5 主要溶液和缓冲液配方 | 第20-24页 |
| 2.1.6 PCR引物 | 第24-27页 |
| 2.2 实验方法 | 第27-42页 |
| 2.2.1 禾谷镰刀菌AQP基因家族的预测和生物信息学分析 | 第27页 |
| 2.2.2 菌种的活化与保存 | 第27-28页 |
| 2.2.3 DNA的提取 | 第28页 |
| 2.2.4 质粒DNA的提取 | 第28-29页 |
| 2.2.5 PCR过程 | 第29页 |
| 2.2.6 PCR产物纯化和琼脂糖凝胶DNA回收 | 第29页 |
| 2.2.7 禾谷镰刀菌基因敲除片段的构建过程 | 第29-30页 |
| 2.2.8 原生质体制备和转化 | 第30-31页 |
| 2.2.9 PCR验证敲除转化子 | 第31页 |
| 2.2.10 Southernblot验证敲除转化子 | 第31页 |
| 2.2.11 RNA提取 | 第31-32页 |
| 2.2.12 cDNA链合成 | 第32页 |
| 2.2.13 禾谷镰刀菌FgAQP1基因回复 | 第32-34页 |
| 2.2.13.1 基因互补载体的构建 | 第32-34页 |
| 2.2.13.2 FgAQP1-C回复菌株的获得 | 第34页 |
| 2.2.14 禾谷镰刀菌FgAQP基因敲除突变体表型分析 | 第34-42页 |
| 2.2.14.1 菌丝发育的观察 | 第34-35页 |
| 2.2.14.1.1 菌落形态观察 | 第34页 |
| 2.2.14.1.2 菌丝分支观察 | 第34-35页 |
| 2.2.14.1.3 气生菌丝高度测定 | 第35页 |
| 2.2.14.2 无性生殖阶段的测定与观察 | 第35-36页 |
| 2.2.14.2.1 分生孢子产量的测定 | 第35页 |
| 2.2.14.2.2 分生孢子中细胞核的观察 | 第35页 |
| 2.2.14.2.3 分生孢子形态观察 | 第35-36页 |
| 2.2.14.2.4 分生孢子萌发情况观察 | 第36页 |
| 2.2.14.3 有性生殖表型观察 | 第36页 |
| 2.2.14.4 致病性测定 | 第36-37页 |
| 2.2.14.5 DON毒素产量测定 | 第37-39页 |
| 2.2.14.6 接种麦粒中产毒基因表达量测定 | 第39页 |
| 2.2.14.7 诱导产毒结构的观察 | 第39页 |
| 2.2.14.8 色素合成情况的观察与分析 | 第39-40页 |
| 2.2.14.9 胁迫试验 | 第40页 |
| 2.2.14.10 自噬现象观察 | 第40页 |
| 2.2.14.11 FgAQP1-GFP亚细胞定位 | 第40-42页 |
| 3 结果与分析 | 第42-55页 |
| 3.1 禾谷镰刀菌FgAQP结构和进化树分析 | 第42-44页 |
| 3.2 禾谷镰刀菌FgAQP敲除突变体的获得 | 第44-45页 |
| 3.3 禾谷镰刀菌FgAQP1突变体的功能回复验证 | 第45-46页 |
| 3.4 FgAQP1调控菌丝的发育 | 第46-47页 |
| 3.5 FgAQP1调控分生孢子的产生和萌发 | 第47-49页 |
| 3.6 FgAQP1调控子囊壳的产生 | 第49页 |
| 3.7 FgAQP1不影响致病性但负调控DON的产生 | 第49-51页 |
| 3.8 FgAQP1影响色素的生物合成 | 第51-52页 |
| 3.9 FgAQP1调控胁迫反应 | 第52-53页 |
| 3.10 FgAQP1影响分生孢子中的自噬 | 第53-54页 |
| 3.11 FgAQP1-GFP的亚细胞定位 | 第54-55页 |
| 4 讨论 | 第55-58页 |
| 5 总结与展望 | 第58-61页 |
| 5.1 全文总结 | 第58-59页 |
| 5.2 后续实验展望 | 第59-61页 |
| 参考文献 | 第61-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 攻读学位期间论文发表及获奖情况 | 第69页 |
