| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 缩略语表 | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第10-35页 |
| 1.1 禾谷镰刀菌细胞壁蛋白相关基础研究 | 第10-14页 |
| 1.1.1 赤霉菌与赤霉病 | 第10-12页 |
| 1.1.2 真菌细胞壁结构 | 第12-14页 |
| 1.1.3 本实验的目的及意义 | 第14页 |
| 1.2 原核表达综述 | 第14-23页 |
| 1.2.1 影响大肠杆菌表达系统表达量的因素 | 第14-15页 |
| 1.2.2 影响大肠杆菌表达体系中表达产物活性的因素 | 第15-16页 |
| 1.2.3 BASI及VP1基因的概述 | 第16-18页 |
| 1.2.4 M1、M2、NA及HA基因的概述 | 第18-22页 |
| 1.2.5 本研究的目的和意义 | 第22-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23页 |
| 2.1 实验材料 | 第23-25页 |
| 2.1.1 菌株及质粒 | 第23页 |
| 2.1.2 主要仪器设备 | 第23页 |
| 2.1.3 酶和试剂 | 第23-24页 |
| 2.1.4 培养基及缓冲液配方 | 第24-25页 |
| 2.2 实验方法 | 第25-35页 |
| 2.2.1 禾谷镰刀菌菌丝的制备 | 第25-26页 |
| 2.2.2 禾谷镰刀菌细胞壁蛋白的提取 | 第26页 |
| 2.2.3 禾谷镰刀菌细胞壁蛋白的银染条件的摸索 | 第26-28页 |
| 2.2.4 质粒DNA提取 | 第28-29页 |
| 2.2.5 PCR扩增目的基因 | 第29-30页 |
| 2.2.6 DNA片段回收 | 第30页 |
| 2.2.7 DNA片段的酶切和连接 | 第30-31页 |
| 2.2.8 感受态细胞制备及转化 | 第31-32页 |
| 2.2.9 融合蛋白诱导表达及纯化 | 第32页 |
| 2.2.10 GST融合蛋白的电洗脱 | 第32-33页 |
| 2.2.11 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第33页 |
| 2.2.12 Western blot | 第33-35页 |
| 3 结果与分析 | 第35-55页 |
| 3.1 禾谷镰刀菌细胞壁蛋白基础研究 | 第35-41页 |
| 3.1.1 不同的培养条件对禾谷镰刀菌细胞壁蛋白的影响 | 第35-39页 |
| 3.1.2 不同的提取方法对禾谷镰刀菌细胞壁蛋白的影响 | 第39-40页 |
| 3.1.3 SDS-PAGE电泳后细胞壁蛋白银染条件的优化 | 第40-41页 |
| 3.2 Vp1等6个基因的原核表达与纯化 | 第41-55页 |
| 3.2.1 Vp1、M1、M2、NA、HA基因的克隆 | 第41-45页 |
| 3.2.2 BASI、Vp1、M1、M2、NA、HA基因的表达纯化 | 第45-55页 |
| 讨论 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-64页 |
| 致谢 | 第64页 |
