| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 缩略语表 | 第11-12页 |
| 1 文献综述 | 第12-31页 |
| 1.1 植物细胞壁研究进展 | 第12-18页 |
| 1.1.1 植物细胞壁的成分 | 第12-15页 |
| 1.1.2 植物细胞壁的结构 | 第15-16页 |
| 1.1.3 植物细胞壁的形成 | 第16-17页 |
| 1.1.4 植物细胞壁的功能 | 第17-18页 |
| 1.2 植物膨胀素研究进展 | 第18-30页 |
| 1.2.1 植物膨胀素的结构 | 第19页 |
| 1.2.2 植物膨胀素的分类 | 第19-21页 |
| 1.2.3 膨胀素活性特征及生物化学特性 | 第21-22页 |
| 1.2.4 植物膨胀素的功能 | 第22-27页 |
| 1.2.5 植物膨胀素基因的表达 | 第27-29页 |
| 1.2.6 膨胀素作用机理 | 第29-30页 |
| 1.3 木研究的目的与意义 | 第30-31页 |
| 2 陆地棉类膨胀素基因的克隆及表达分析 | 第31-53页 |
| 2.1 材料试剂 | 第31-32页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第31页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第31-32页 |
| 2.2 实验方法 | 第32-41页 |
| 2.2.1 总RNA提取、纯化和第一链cDNA合成 | 第32页 |
| 2.2.2 陆地棉类膨胀素基因的克隆 | 第32-37页 |
| 2.2.3 陆地棉类膨胀素基因的序列分析 | 第37页 |
| 2.2.4 陆地棉类膨胀素基因表达分析 | 第37-41页 |
| 2.3 结果 | 第41-50页 |
| 2.3.1 陆地棉类膨胀基因的克隆 | 第41页 |
| 2.3.2 陆地棉类膨胀素基因的序列分析 | 第41-49页 |
| 2.3.3 陆地棉类膨胀素基因的表达分析 | 第49-50页 |
| 2.4 讨论 | 第50-53页 |
| 2.4.1 利用RACE技术克隆类膨胀素基因的可行性 | 第50-51页 |
| 2.4.2 陆地棉类膨胀素基因是一个多基因亚家族 | 第51页 |
| 2.4.3 本研究克隆的基因属于膨胀素基因家族类膨胀素亚族 | 第51-52页 |
| 2.4.4 陆地棉类膨胀素基因的表达 | 第52-53页 |
| 3 根癌农杆菌介导类膨胀素基因转化陆地棉研究 | 第53-78页 |
| 3.1 材料试剂 | 第54-55页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第54页 |
| 3.1.2 菌株与载体 | 第54页 |
| 3.1.3 实验试剂 | 第54-55页 |
| 3.2 试验方法 | 第55-67页 |
| 3.2.1 陆地棉类膨胀素基因RNA干涉表达载体构建 | 第55-58页 |
| 3.2.2 陆地棉类膨胀素基因超量表达载体构建 | 第58-60页 |
| 3.2.3 电转化法转化农杆菌EHA105 | 第60-61页 |
| 3.2.4 类膨胀素基因转化YZ1下胚轴及转基因检测 | 第61-64页 |
| 3.2.5 类膨胀素转化C201胚性愈伤及转基因检测 | 第64-65页 |
| 3.2.6 转基因T0植株细胞学分析 | 第65-66页 |
| 3.2.7 转基因原生质体再生细胞壁分析 | 第66-67页 |
| 3.3 结果 | 第67-76页 |
| 3.3.1 转基因载体PCR检测 | 第67页 |
| 3.3.2 转基因植株(单细胞系)PCR检测 | 第67-68页 |
| 3.3.3 转基因植株(单细胞系)表达分析 | 第68-70页 |
| 3.3.4 转基因阳性单株Southern blot分析 | 第70-71页 |
| 3.3.5 转基因植株组织切片分析 | 第71-74页 |
| 3.3.6 转基因单细胞系再生细胞壁分析 | 第74-76页 |
| 3.4 讨论 | 第76-78页 |
| 3.4.1 类膨胀素基因影响转基因植株(单细胞)及单细胞系细胞壁的再生 | 第76-78页 |
| 参考文献 | 第78-84页 |
| 附录 | 第84-98页 |
| 附录1 改良的异硫氰酸胍法提取总RNA、去基因组DNA和纯化 | 第84-85页 |
| 附录2 第一链cDNA合成程序 | 第85页 |
| 附录3 RACE-Ready cDNA制备程序 | 第85-86页 |
| 附录4 琼脂糖凝胶DNA回收程序 | 第86-87页 |
| 附录5 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第87-88页 |
| 附录6 PCR产物回收 | 第88-89页 |
| 附录7 质粒提取步骤 | 第89-90页 |
| 附录8 农杆菌EHA105感受态制备 | 第90-91页 |
| 附录9 棉花组织培养所用培养基和培养条件 | 第91页 |
| 附录10 棉花基因组DNA提取程序(大量法) | 第91-93页 |
| 附录11 Southern blot程序 | 第93-95页 |
| 附录12 组织石蜡切片制作过程 | 第95-97页 |
| 附录13 陆地棉愈伤分离原生质体及再生细胞壁培养 | 第97-98页 |
| 致谢 | 第98页 |
