| 中文摘要 | 第5-6页 |
| 英文摘要 | 第6-7页 |
| 前言 | 第8-9页 |
| 第一章 冠状病毒的细胞感染特异性的比较 | 第9-27页 |
| 引言 | 第9-10页 |
| 材料 | 第10-11页 |
| 一、病毒和细胞 | 第10页 |
| 二、试剂与耗材 | 第10-11页 |
| 三、仪器与设备 | 第11页 |
| 方法 | 第11-15页 |
| 一、细胞培养与传代 | 第11-12页 |
| 二、病毒感染细胞 | 第12页 |
| 三、病毒扩增及样品收集 | 第12页 |
| 四、CPE观察 | 第12-13页 |
| 五、噬斑形成试验 | 第13页 |
| 六、RT-PCR | 第13-15页 |
| 七、琼脂糖凝胶电泳 | 第15页 |
| 结果 | 第15-24页 |
| 一、α属冠状病毒在犬源A72细胞上的增殖特性 | 第15-17页 |
| 二、α属冠状病毒在猫源FCWF细胞上的增殖特性 | 第17-19页 |
| 三、α属冠状病毒在猪源ST细胞上的增殖特性 | 第19-20页 |
| 四、α属冠状病毒对鼠源L2细胞的感染性及与β属鼠肝炎病毒的比较 | 第20-24页 |
| 讨论 | 第24-25页 |
| 参考文献 | 第25-27页 |
| 第二章 嵌合α属冠状病毒S蛋白重组鼠肝炎病毒构建 | 第27-64页 |
| 引言 | 第27-28页 |
| 材料 | 第28-30页 |
| 一、载体、病毒和细菌 | 第28页 |
| 二、试剂及耗材 | 第28-29页 |
| 三、仪器与设备 | 第29-30页 |
| 方法 | 第30-37页 |
| 一、RNA抽提、反转录及PCR | 第30-31页 |
| 二、感受态制备 | 第31页 |
| 三、质粒转化 | 第31页 |
| 四、质粒抽提 | 第31-32页 |
| 五、质粒酶切 | 第32页 |
| 六、去磷酸化 | 第32-33页 |
| 七、琼脂糖凝胶电泳 | 第33页 |
| 八、胶回收 | 第33页 |
| 九、DNA片段的连接 | 第33-34页 |
| 十、阳性克隆筛选 | 第34页 |
| 十一、T-A克隆载体制备 | 第34-35页 |
| 十二、基因及蛋白序列分析 | 第35页 |
| 十三、重组病毒制备 | 第35-37页 |
| 结果 | 第37-61页 |
| 一、CCoV FCoV和TGEV S蛋白及其受体的序列比较分析 | 第37-39页 |
| 二、重组载体的构建策略 | 第39-49页 |
| 三、重组载体的构建过程 | 第49-55页 |
| 四、重组病毒的制备与筛选 | 第55-61页 |
| 讨论 | 第61-63页 |
| 参考文献 | 第63-64页 |
| 文献综述：冠状病毒跨种属传播的机制 | 第64-81页 |
| 摘要 | 第64页 |
| 一、冠状病毒概述 | 第64-67页 |
| 二、冠状病毒的基因重组与跨种属感染 | 第67-68页 |
| 三、冠状病毒跨宿主机制的研究 | 第68-72页 |
| 1. S蛋白的功能及其变异 | 第68-69页 |
| 2. CoV受体的专一性与相对可变性 | 第69-70页 |
| 3. S蛋白与受体的识别 | 第70-71页 |
| 4. 共感染对跨种属传播的作用 | 第71-72页 |
| 四、跨宿主感染的RNA定向重组技术 | 第72-73页 |
| 五、小结 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-81页 |
| 论文总结 | 第81-82页 |
| 致谢 | 第82-83页 |