摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4页 |
第1章 前言 | 第9-30页 |
1.1 问题的提出 | 第9页 |
1.2 选题背景及意义 | 第9-10页 |
1.3 文献综述 | 第10-28页 |
1.3.1 糖转运蛋白与生命活动 | 第10-19页 |
1.3.2 MFS超家族 | 第19-28页 |
1.4 论文研究目的与方法 | 第28-30页 |
第2章 实验材料与方法 | 第30-52页 |
2.1 实验材料 | 第30-33页 |
2.1.1 实验所用菌株 | 第30页 |
2.1.2 微生物培养所用试剂 | 第30-31页 |
2.1.3 载体选择与试剂盒 | 第31-32页 |
2.1.4 缓冲液和凝胶电泳 | 第32-33页 |
2.2 实验仪器 | 第33-34页 |
2.3 实验方法 | 第34-52页 |
2.3.1 重组质粒的构建 | 第34-37页 |
2.3.2 蛋白表达与纯化 | 第37-40页 |
2.3.3 蛋白结晶与条件优化 | 第40-41页 |
2.3.4 解决晶体相位 | 第41-43页 |
2.3.5 数据收集、处理及结构解析 | 第43页 |
2.3.6 蛋白脂质体的制备 | 第43-45页 |
2.3.7 Counterflow测定生物膜环境中蛋白功能 | 第45-47页 |
2.3.8 ITC测定溶液环境中蛋白功能 | 第47-49页 |
2.3.9 全细胞转运实验 | 第49-50页 |
2.3.10 基于蛋白质一级序列的计算机同源建模 | 第50-52页 |
第3章 原子分辨率的XylE蛋白结构 | 第52-64页 |
3.1 高纯度蛋白的获得 | 第52-53页 |
3.2 蛋白晶体生长及底物结合的多种结构解析 | 第53-59页 |
3.3 蛋白结构分析 | 第59-63页 |
3.4 讨论与小结 | 第63-64页 |
第4章 转运机理的研究 | 第64-90页 |
4.1 XylE蛋白对底物的选择与识别 | 第64-72页 |
4.1.1 对天然糖类的选择特异性及转运功能验证 | 第64-68页 |
4.1.2 底物识别的氨基酸残基网络 | 第68-72页 |
4.2 XylE的模型扩展 | 第72-82页 |
4.2.1 序列分析的启示 | 第72-75页 |
4.2.2 SP家族的保守模块功能 | 第75-77页 |
4.2.3 GLUT1-4 同源模型的建立和应用 | 第77-82页 |
4.3 参考GLUT1-4 的特征逆向改造XylE | 第82-85页 |
4.4 影响XylE质子共转运机理的关键位点 | 第85-90页 |
第5章 总结及讨论 | 第90-98页 |
5.1 论文的主要工作总结 | 第90-92页 |
5.2 近年直接相关的新研究成果简述 | 第92-96页 |
5.3 仍未解决的问题,前景与展望 | 第96-97页 |
5.4 一些其他的个人研究体会 | 第97-98页 |
参考文献 | 第98-106页 |
致谢 | 第106-108页 |
个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第108页 |