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猪繁殖与呼吸综合征病毒感染对Ⅰ型干扰素表达影响的分析

摘要第6-7页
Abstract第7页
英文缩略表第12-13页
第一章 引言第13-24页
    1.1 猪繁殖与呼吸综合征病概述第13页
    1.2 PRRSV的病原学第13-18页
        1.2.1 PRRSV基因结构第13-14页
        1.2.2 PRRSV的sg mRNA的合成与转录第14-15页
        1.2.3 PRRSV的非结构蛋白第15-16页
        1.2.4 PRRSV的结构蛋白第16-17页
        1.2.5 病毒宿主,侵入,受体第17-18页
    1.3 PRRSV与先天性免疫第18-22页
        1.3.1 RIG-I受体信号通路第19-20页
        1.3.2 PRRSV的先天免疫逃避第20-22页
    1.4 PRRSV与IL-10第22-23页
    1.5 细胞免疫应答和体液免疫应答第23页
    1.6 本研究目的和意义第23-24页
第二章 PRRSV非结构蛋白抑制I-IFN表达第24-37页
    2.1 材料第24-25页
        2.1.1 病毒和细胞第24页
        2.1.2 质粒和抗体第24页
        2.1.3 试剂第24-25页
    2.2 实验方法第25-28页
        2.2.1 病毒感染第25页
        2.2.2 总RNA的提取第25页
        2.2.3 反转录第25页
        2.2.4 相对荧光定量PCR第25-26页
        2.2.5 PCR扩增第26-27页
        2.2.6 质粒的构建第27-28页
        2.2.7 荧光素酶检测第28页
        2.2.8 蛋白的细胞定位第28页
    2.3 实验结果第28-36页
        2.3.1 强毒株与弱毒株感染对I-IFN表达的影响第28-29页
        2.3.2 PRRSV非结构蛋白真核表达质粒的构建结果第29-31页
        2.3.3 IFN-β 检测系统的构建结果第31-33页
        2.3.4 PRRSV非结构蛋白对IFN-β 转录的影响第33页
        2.3.5 PRRSV NSP12细胞定位第33页
        2.3.6 PRRSV NSP12对IFN-β 具有抑制作用第33-35页
        2.3.7 PRRSV NSP12不抑制RIG通路活化第35-36页
    2.4 讨论第36-37页
第三章 PRRSV感染抑制P65与CBP结合第37-46页
    3.1 材料第37-38页
        3.1.1 病毒和细胞第37-38页
        3.1.2 抗体第38页
        3.1.3 试剂第38页
    3.2 实验方法第38-40页
        3.2.1 病毒感染第38页
        3.2.2 抑制剂处理第38页
        3.2.3 总RNA的提取第38-39页
        3.2.4 反转录第39页
        3.2.5 相对荧光定量PCR第39页
        3.2.6 Western blot第39-40页
        3.2.7 免疫共沉淀(CoIP)第40页
        3.2.8 CPE法测定TCID50第40页
    3.3 实验结果第40-44页
        3.3.1 PRRSV感染后上调IL-10的表达第40-41页
        3.3.2 PRRSV感染引起CREB的磷酸化第41页
        3.3.3 磷酸化的CREB抑制CBP与NF-κB的结合第41-42页
        3.3.4 CREB上游激活通路第42-43页
        3.3.5 抑制剂抑制CREB与CBP结合第43页
        3.3.6 抑制剂对PRRSV复制的影响第43-44页
    3.4 讨论第44-46页
第四章 全文结论第46-47页
参考文献第47-54页
致谢第54-55页
作者简历第55页

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