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产生物活性物质及溶菌酶的海洋微生物筛选和鉴定

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
第一章 引言第12-20页
    1.1 研究背景第12-13页
    1.2 海洋微生物的简介第13页
    1.3 海洋放线菌的研究概况第13-16页
        1.3.1 海洋放线菌的多样性第13-14页
        1.3.2 海洋放线菌的应用第14-16页
    1.4 溶菌酶的研究概况第16-18页
        1.4.1 溶菌酶的简介第16-17页
        1.4.2 溶菌酶的应用第17-18页
    1.5 研究内容第18-19页
    1.6 本研究的设计思路第19-20页
第二章 产生物活性物质海洋放线菌的筛选和鉴定第20-39页
    2.1 引言第20页
    2.2 材料第20-23页
        2.2.1 实验样品第20页
        2.2.2 供试菌株第20-21页
        2.2.3 培养基第21页
        2.2.4 试剂与药品第21-22页
        2.2.5 实验仪器与设备第22页
        2.2.6 辅助器材第22-23页
    2.3 方法第23-29页
        2.3.1 样品的预处理第23页
        2.3.2 菌株的分离与富集培养第23页
        2.3.3 海洋放线菌的初筛第23-24页
        2.3.4 海洋放线菌的复筛第24页
        2.3.5 海洋放线菌的保藏第24页
        2.3.6 海洋放线菌的染色及形态观察第24-25页
        2.3.7 海洋放线菌的16S rDNA鉴定第25-29页
            2.3.7.1 海洋放线菌基因组DNA的提取第25-26页
            2.3.7.2 海洋放线菌基因组DNA的纯化回收第26-27页
            2.3.7.3 大肠杆菌DH5α细胞感受态的制备与转化第27页
            2.3.7.4 菌落PCR第27-28页
            2.3.7.5 质粒提取第28-29页
        2.3.8 海洋放线菌系统发育树的构建第29页
    2.4 结果与分析第29-38页
        2.4.1 菌株的分离与富集培养第29页
        2.4.2 海洋放线菌的初筛结果第29-30页
        2.4.3 海洋放线菌的复筛第30-31页
        2.4.4 海洋放线菌HS-B31和HS-B34的形态特征第31-32页
        2.4.5 海洋放线菌的16S rDNA鉴定结果第32-35页
            2.4.5.1 菌株HS-B31和HS-B34基因组DNA的提取第32页
            2.4.5.2 菌株HS-B31和HS-B34基因组DNA的纯化回收第32-33页
            2.4.5.3 大肠杆菌DH5α细胞感受态的制备与转化第33-34页
            2.4.5.4 菌落PCR分析第34页
            2.4.5.5 质粒提取条带分析第34-35页
        2.4.6 海洋放线菌系统发育树的构建第35-38页
    2.5 小结第38-39页
第三章 菌株HS-B31和HS-B34产抗菌活性物质的研究第39-49页
    3.1 引言第39页
    3.2 材料第39-41页
        3.2.1 供试菌株第39页
        3.2.2 培养基第39-40页
        3.2.3 试剂与药品第40页
        3.2.4 实验仪器与设备第40-41页
        3.2.5 辅助器材第41页
    3.3 方法第41-43页
        3.3.1 菌株HS-B31和HS-B34发酵上清液抗菌谱的测定第41页
        3.3.2 菌株HS-B31和HS-B34发酵液中活性物质的粗提第41-42页
        3.3.3 粗提物B31和B34抑菌活性的测定第42页
        3.3.4 粗提物B31和B34中活性物质的薄层层析分析第42页
        3.3.5 粗提物中活性物质的分离及活性测定第42-43页
    3.4 结果与分析第43-47页
        3.4.1 菌株HS-B31和HS-B34发酵上清液抗菌谱的测定结果第43-44页
        3.4.2 粗提物B31和B34抑菌活性的测定结果第44-45页
        3.4.3 粗提物B31和B34中活性物质的薄层层析分析第45-46页
        3.4.4 粗提物中活性物质的分离及活性测定结果第46-47页
    3.5 小结第47-49页
第四章 产溶菌酶海洋微生物的筛选鉴定第49-68页
    4.1 引言第49页
    4.2 材料第49-51页
        4.2.1 实验样品第49页
        4.2.2 供试菌株第49页
        4.2.3 培养基第49-50页
        4.2.4 试剂与药品第50-51页
        4.2.5 实验仪器与设备第51页
        4.2.6 辅助器材第51页
    4.3 方法第51-55页
        4.3.1 样品的预处理第51-52页
        4.3.2 菌株的分离与富集培养第52页
        4.3.3 产溶菌酶海洋微生物的初筛第52页
        4.3.4 产溶菌酶海洋微生物的复筛第52-53页
        4.3.5 菌种的保藏第53页
        4.3.6 菌株溶菌酶产量的测定第53页
        4.3.7 菌株HS-C261的16S rDNA序列测定第53-55页
            4.3.7.1 菌株HS-C261基因组DNA的提取第53-54页
            4.3.7.2 大肠杆菌DH5α细胞感受态的制备与转化第54页
            4.3.7.3 菌落PCR与质粒提取第54-55页
    4.4 结果与分析第55-66页
        4.4.1 产溶菌酶海洋微生物的初筛结果第55-58页
        4.4.2 产溶菌酶海洋微生物的复筛结果第58-60页
        4.4.3 菌株溶菌酶产量的测定第60-61页
        4.4.4 菌株HS-C261的16S rDNA序列测定结果第61-65页
            4.4.4.1 菌株HS-C261基因组DNA的提取第61-62页
            4.4.4.2 菌株HS-B31和HS-B34基因组DNA的纯化回收第62-63页
            4.4.4.3 大肠杆菌DH5α细胞感受态的制备与转化第63页
            4.4.4.4 菌落PCR分析第63-64页
            4.4.4.5 质粒提取条带分析第64-65页
        4.4.5 系统发育树的构建第65-66页
    4.5 小结第66-68页
结论第68-69页
参考文献第69-73页
致谢第73页

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