摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第一章 引言 | 第12-20页 |
1.1 研究背景 | 第12-13页 |
1.2 海洋微生物的简介 | 第13页 |
1.3 海洋放线菌的研究概况 | 第13-16页 |
1.3.1 海洋放线菌的多样性 | 第13-14页 |
1.3.2 海洋放线菌的应用 | 第14-16页 |
1.4 溶菌酶的研究概况 | 第16-18页 |
1.4.1 溶菌酶的简介 | 第16-17页 |
1.4.2 溶菌酶的应用 | 第17-18页 |
1.5 研究内容 | 第18-19页 |
1.6 本研究的设计思路 | 第19-20页 |
第二章 产生物活性物质海洋放线菌的筛选和鉴定 | 第20-39页 |
2.1 引言 | 第20页 |
2.2 材料 | 第20-23页 |
2.2.1 实验样品 | 第20页 |
2.2.2 供试菌株 | 第20-21页 |
2.2.3 培养基 | 第21页 |
2.2.4 试剂与药品 | 第21-22页 |
2.2.5 实验仪器与设备 | 第22页 |
2.2.6 辅助器材 | 第22-23页 |
2.3 方法 | 第23-29页 |
2.3.1 样品的预处理 | 第23页 |
2.3.2 菌株的分离与富集培养 | 第23页 |
2.3.3 海洋放线菌的初筛 | 第23-24页 |
2.3.4 海洋放线菌的复筛 | 第24页 |
2.3.5 海洋放线菌的保藏 | 第24页 |
2.3.6 海洋放线菌的染色及形态观察 | 第24-25页 |
2.3.7 海洋放线菌的16S rDNA鉴定 | 第25-29页 |
2.3.7.1 海洋放线菌基因组DNA的提取 | 第25-26页 |
2.3.7.2 海洋放线菌基因组DNA的纯化回收 | 第26-27页 |
2.3.7.3 大肠杆菌DH5α细胞感受态的制备与转化 | 第27页 |
2.3.7.4 菌落PCR | 第27-28页 |
2.3.7.5 质粒提取 | 第28-29页 |
2.3.8 海洋放线菌系统发育树的构建 | 第29页 |
2.4 结果与分析 | 第29-38页 |
2.4.1 菌株的分离与富集培养 | 第29页 |
2.4.2 海洋放线菌的初筛结果 | 第29-30页 |
2.4.3 海洋放线菌的复筛 | 第30-31页 |
2.4.4 海洋放线菌HS-B31和HS-B34的形态特征 | 第31-32页 |
2.4.5 海洋放线菌的16S rDNA鉴定结果 | 第32-35页 |
2.4.5.1 菌株HS-B31和HS-B34基因组DNA的提取 | 第32页 |
2.4.5.2 菌株HS-B31和HS-B34基因组DNA的纯化回收 | 第32-33页 |
2.4.5.3 大肠杆菌DH5α细胞感受态的制备与转化 | 第33-34页 |
2.4.5.4 菌落PCR分析 | 第34页 |
2.4.5.5 质粒提取条带分析 | 第34-35页 |
2.4.6 海洋放线菌系统发育树的构建 | 第35-38页 |
2.5 小结 | 第38-39页 |
第三章 菌株HS-B31和HS-B34产抗菌活性物质的研究 | 第39-49页 |
3.1 引言 | 第39页 |
3.2 材料 | 第39-41页 |
3.2.1 供试菌株 | 第39页 |
3.2.2 培养基 | 第39-40页 |
3.2.3 试剂与药品 | 第40页 |
3.2.4 实验仪器与设备 | 第40-41页 |
3.2.5 辅助器材 | 第41页 |
3.3 方法 | 第41-43页 |
3.3.1 菌株HS-B31和HS-B34发酵上清液抗菌谱的测定 | 第41页 |
3.3.2 菌株HS-B31和HS-B34发酵液中活性物质的粗提 | 第41-42页 |
3.3.3 粗提物B31和B34抑菌活性的测定 | 第42页 |
3.3.4 粗提物B31和B34中活性物质的薄层层析分析 | 第42页 |
3.3.5 粗提物中活性物质的分离及活性测定 | 第42-43页 |
3.4 结果与分析 | 第43-47页 |
3.4.1 菌株HS-B31和HS-B34发酵上清液抗菌谱的测定结果 | 第43-44页 |
3.4.2 粗提物B31和B34抑菌活性的测定结果 | 第44-45页 |
3.4.3 粗提物B31和B34中活性物质的薄层层析分析 | 第45-46页 |
3.4.4 粗提物中活性物质的分离及活性测定结果 | 第46-47页 |
3.5 小结 | 第47-49页 |
第四章 产溶菌酶海洋微生物的筛选鉴定 | 第49-68页 |
4.1 引言 | 第49页 |
4.2 材料 | 第49-51页 |
4.2.1 实验样品 | 第49页 |
4.2.2 供试菌株 | 第49页 |
4.2.3 培养基 | 第49-50页 |
4.2.4 试剂与药品 | 第50-51页 |
4.2.5 实验仪器与设备 | 第51页 |
4.2.6 辅助器材 | 第51页 |
4.3 方法 | 第51-55页 |
4.3.1 样品的预处理 | 第51-52页 |
4.3.2 菌株的分离与富集培养 | 第52页 |
4.3.3 产溶菌酶海洋微生物的初筛 | 第52页 |
4.3.4 产溶菌酶海洋微生物的复筛 | 第52-53页 |
4.3.5 菌种的保藏 | 第53页 |
4.3.6 菌株溶菌酶产量的测定 | 第53页 |
4.3.7 菌株HS-C261的16S rDNA序列测定 | 第53-55页 |
4.3.7.1 菌株HS-C261基因组DNA的提取 | 第53-54页 |
4.3.7.2 大肠杆菌DH5α细胞感受态的制备与转化 | 第54页 |
4.3.7.3 菌落PCR与质粒提取 | 第54-55页 |
4.4 结果与分析 | 第55-66页 |
4.4.1 产溶菌酶海洋微生物的初筛结果 | 第55-58页 |
4.4.2 产溶菌酶海洋微生物的复筛结果 | 第58-60页 |
4.4.3 菌株溶菌酶产量的测定 | 第60-61页 |
4.4.4 菌株HS-C261的16S rDNA序列测定结果 | 第61-65页 |
4.4.4.1 菌株HS-C261基因组DNA的提取 | 第61-62页 |
4.4.4.2 菌株HS-B31和HS-B34基因组DNA的纯化回收 | 第62-63页 |
4.4.4.3 大肠杆菌DH5α细胞感受态的制备与转化 | 第63页 |
4.4.4.4 菌落PCR分析 | 第63-64页 |
4.4.4.5 质粒提取条带分析 | 第64-65页 |
4.4.5 系统发育树的构建 | 第65-66页 |
4.5 小结 | 第66-68页 |
结论 | 第68-69页 |
参考文献 | 第69-73页 |
致谢 | 第73页 |