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重组酿酒酵母14号菌株同步糖化发酵玉米秸秆生产乙醇和单细胞蛋白

摘要第7-9页
Abstract第9-10页
1 前言第11-24页
    1.1 秸秆资源利用状况第11-12页
    1.2 粮食问题及秸秆饲料化的意义第12-15页
    1.3 能源需求及秸秆资源能源化的重要意义第15-17页
    1.4 秸秆资源化利用中面临的问题第17-23页
        1.4.1 农作物秸秆的原料收集供应第17页
        1.4.2 纤维素酶和半纤维素酶的需求、行业发展及使用成本第17-19页
        1.4.3 秸秆乙醇生产工艺的问题第19-22页
        1.4.4 发酵残留物及其他废弃物处理第22-23页
    1.5 本研究目的第23-24页
2 材料与方法第24-38页
    2.1 主要菌株及实验材料第24页
    2.2 主要试剂第24-25页
    2.3 实验用主要仪器第25页
    2.4 培养基第25-27页
    2.5 实验方法第27-38页
        2.5.1 检测方法第27-28页
        2.5.2 秸秆预处理方法第28页
        2.5.3 菌种保藏第28页
        2.5.4 发酵种子液的准备第28-29页
        2.5.5 摇瓶发酵检测转化子发酵性能第29-30页
        2.5.6 重组酵母菌株Str.14在发酵罐中发酵纯糖生产乙醇和菌体蛋白能力检测第30-31页
        2.5.7 Str.14混合糖模拟实验对其混合糖生产乙醇及菌体蛋白能力进行检测第31-33页
        2.5.8 重组酵母菌株Str.14发酵玉米秸秆生产乙醇和SCP能力的检测第33-34页
        2.5.9 木糖异构酶基因的克隆表达第34-36页
        2.5.10 酿酒酵母整合型表达载体pScNTS及质粒型表达载体pSc2U的构建第36-37页
        2.5.11 高温酿酒酵母感受态的制备第37页
        2.5.12 质粒的电转及阳性转化子的筛选第37-38页
        2.5.13 载体的表达验证第38页
        2.5.14 重组质粒的构建第38页
3 实验结果与分析第38-61页
    3.1 酵母菌株Str. 14纯糖发酵进行关键发酵性能的检测第38-49页
        3.1.1 所得的转化子进行葡萄糖厌氧发酵,检测产乙醇能力第39-40页
        3.1.2 酵母菌株Str.14利用葡萄糖为碳源进行厌氧(微好氧)发酵第40-42页
        3.1.3 酵母菌株Str.14低浓度木糖微好氧发酵第42-44页
        3.1.4 酵母菌株Str.14及亲本菌株不同糖发酵第44-46页
        3.1.5 Str.14纯糖上罐发酵进行好氧和厌氧条件下发酵性能的检测第46-49页
    3.2 重组菌株Str. 14混合糖模拟实验对其生产乙醇和菌体能力进行检测第49-57页
        3.2.1 利用木糖与葡萄糖混合糖为碳源,模拟玉米秸秆水解液发酵(未蒸馏)第49-51页
        3.2.2 利用木糖与葡萄糖混合糖为碳源,模拟玉米粉水解液发酵(未蒸馏)第51-52页
        3.2.3 不同乙醇浓度对酵母菌株Str.14好氧发酵的影响第52-53页
        3.2.4 利用Str.14在混合糖中进行多轮连续分批补料发酵(蒸馏)检测其生产乙醇和单细胞蛋白的能力以及菌体多轮连续发酵过程中菌体活性保持情况第53-54页
        3.2.5 利用混合糖模拟玉米秸秆水解液发酵(蒸馏,补加除碳源外的营养成分)第54-57页
    3.3 酵母菌株Str.14同步糖化发酵玉米秸秆生产乙醇和单细胞蛋白第57-61页
        3.3.1 酵母菌株Str.14在5-L发酵罐中进行玉米秸秆的同步糖化发酵第57-59页
        3.3.2 酵母菌株Str.14在5-L发酵罐中进行玉米秸秆的高浓度底物同步糖化补料发酵第59-61页
4 讨论与展望第61-71页
    4.1 酒酵母表达系统的构建及木糖异构酶在酿酒酵母中的表达第64-70页
        4.1.1 木糖异构酶基因的获得第64-66页
        4.1.2 质粒构建示意图第66-67页
        4.1.3 各个片段电泳胶图第67页
        4.1.4 构建好质粒的电泳图第67-68页
        4.1.5 载体的表达验证第68-69页
        4.1.6 重组质粒的电转及阳性转化子的筛选第69-70页
    4.2 展望第70-71页
参考文献第71-75页
附表 1. xyl A 基因从头合成所用引物第75-78页
研究生阶段的学术成果第78-79页
致谢第79页

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