| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第11-24页 |
| 1.1 秸秆资源利用状况 | 第11-12页 |
| 1.2 粮食问题及秸秆饲料化的意义 | 第12-15页 |
| 1.3 能源需求及秸秆资源能源化的重要意义 | 第15-17页 |
| 1.4 秸秆资源化利用中面临的问题 | 第17-23页 |
| 1.4.1 农作物秸秆的原料收集供应 | 第17页 |
| 1.4.2 纤维素酶和半纤维素酶的需求、行业发展及使用成本 | 第17-19页 |
| 1.4.3 秸秆乙醇生产工艺的问题 | 第19-22页 |
| 1.4.4 发酵残留物及其他废弃物处理 | 第22-23页 |
| 1.5 本研究目的 | 第23-24页 |
| 2 材料与方法 | 第24-38页 |
| 2.1 主要菌株及实验材料 | 第24页 |
| 2.2 主要试剂 | 第24-25页 |
| 2.3 实验用主要仪器 | 第25页 |
| 2.4 培养基 | 第25-27页 |
| 2.5 实验方法 | 第27-38页 |
| 2.5.1 检测方法 | 第27-28页 |
| 2.5.2 秸秆预处理方法 | 第28页 |
| 2.5.3 菌种保藏 | 第28页 |
| 2.5.4 发酵种子液的准备 | 第28-29页 |
| 2.5.5 摇瓶发酵检测转化子发酵性能 | 第29-30页 |
| 2.5.6 重组酵母菌株Str.14在发酵罐中发酵纯糖生产乙醇和菌体蛋白能力检测 | 第30-31页 |
| 2.5.7 Str.14混合糖模拟实验对其混合糖生产乙醇及菌体蛋白能力进行检测 | 第31-33页 |
| 2.5.8 重组酵母菌株Str.14发酵玉米秸秆生产乙醇和SCP能力的检测 | 第33-34页 |
| 2.5.9 木糖异构酶基因的克隆表达 | 第34-36页 |
| 2.5.10 酿酒酵母整合型表达载体pScNTS及质粒型表达载体pSc2U的构建 | 第36-37页 |
| 2.5.11 高温酿酒酵母感受态的制备 | 第37页 |
| 2.5.12 质粒的电转及阳性转化子的筛选 | 第37-38页 |
| 2.5.13 载体的表达验证 | 第38页 |
| 2.5.14 重组质粒的构建 | 第38页 |
| 3 实验结果与分析 | 第38-61页 |
| 3.1 酵母菌株Str. 14纯糖发酵进行关键发酵性能的检测 | 第38-49页 |
| 3.1.1 所得的转化子进行葡萄糖厌氧发酵，检测产乙醇能力 | 第39-40页 |
| 3.1.2 酵母菌株Str.14利用葡萄糖为碳源进行厌氧（微好氧）发酵 | 第40-42页 |
| 3.1.3 酵母菌株Str.14低浓度木糖微好氧发酵 | 第42-44页 |
| 3.1.4 酵母菌株Str.14及亲本菌株不同糖发酵 | 第44-46页 |
| 3.1.5 Str.14纯糖上罐发酵进行好氧和厌氧条件下发酵性能的检测 | 第46-49页 |
| 3.2 重组菌株Str. 14混合糖模拟实验对其生产乙醇和菌体能力进行检测 | 第49-57页 |
| 3.2.1 利用木糖与葡萄糖混合糖为碳源，模拟玉米秸秆水解液发酵（未蒸馏） | 第49-51页 |
| 3.2.2 利用木糖与葡萄糖混合糖为碳源，模拟玉米粉水解液发酵（未蒸馏） | 第51-52页 |
| 3.2.3 不同乙醇浓度对酵母菌株Str.14好氧发酵的影响 | 第52-53页 |
| 3.2.4 利用Str.14在混合糖中进行多轮连续分批补料发酵（蒸馏）检测其生产乙醇和单细胞蛋白的能力以及菌体多轮连续发酵过程中菌体活性保持情况 | 第53-54页 |
| 3.2.5 利用混合糖模拟玉米秸秆水解液发酵（蒸馏，补加除碳源外的营养成分） | 第54-57页 |
| 3.3 酵母菌株Str.14同步糖化发酵玉米秸秆生产乙醇和单细胞蛋白 | 第57-61页 |
| 3.3.1 酵母菌株Str.14在5-L发酵罐中进行玉米秸秆的同步糖化发酵 | 第57-59页 |
| 3.3.2 酵母菌株Str.14在5-L发酵罐中进行玉米秸秆的高浓度底物同步糖化补料发酵 | 第59-61页 |
| 4 讨论与展望 | 第61-71页 |
| 4.1 酒酵母表达系统的构建及木糖异构酶在酿酒酵母中的表达 | 第64-70页 |
| 4.1.1 木糖异构酶基因的获得 | 第64-66页 |
| 4.1.2 质粒构建示意图 | 第66-67页 |
| 4.1.3 各个片段电泳胶图 | 第67页 |
| 4.1.4 构建好质粒的电泳图 | 第67-68页 |
| 4.1.5 载体的表达验证 | 第68-69页 |
| 4.1.6 重组质粒的电转及阳性转化子的筛选 | 第69-70页 |
| 4.2 展望 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-75页 |
| 附表 1. xyl A 基因从头合成所用引物 | 第75-78页 |
| 研究生阶段的学术成果 | 第78-79页 |
| 致谢 | 第79页 |
