| 摘要 | 第4-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 英文缩略表 | 第14-16页 |
| 第一章 文献总述 | 第16-28页 |
| 1. H1N1亚型猪流感病毒概述 | 第16-21页 |
| 1.1 H1N1亚型猪流感病毒的病原学特征 | 第16页 |
| 1.2 H1N1亚型猪流感病毒(Swine influenza virus)流行病学 | 第16-19页 |
| 1.2.1 古典型H1N1猪流感(classical swine H1N1 virues)流行病学 | 第17-18页 |
| 1.2.2 类禽型H1N1猪流感流行病学 | 第18-19页 |
| 1.2.3 类人型H1N1猪流感流行病学 | 第19页 |
| 1.3 2009甲型H1N1流感病毒流行病学 | 第19-21页 |
| 1.3.1 2009年甲型H1N1流感起源 | 第19-20页 |
| 1.3.2 2009甲型H1N1流感在我国猪群中的流行状况 | 第20-21页 |
| 2. 2009甲型H1N1流感病毒的致病性分子生物学基础 | 第21-26页 |
| 2.1 血凝素(Hemagglutinin,HA) | 第21-22页 |
| 2.2 神经氨酸酶(Neuraminidase,NA) | 第22页 |
| 2.3 核蛋白(Nucleoprotein,NP) | 第22-23页 |
| 2.4 基质蛋白(Matrix proteins M) | 第23页 |
| 2.5 聚合酶 | 第23-25页 |
| 2.6 非结构蛋白(Nonstructural proteins,NS) | 第25-26页 |
| 3. 反向遗传操作系统的研究进展 | 第26-27页 |
| 4. 本研究的目的和意义 | 第27-28页 |
| 第二章 猪群中2009 (H1N1)病毒的分离鉴定与序列分析 | 第28-53页 |
| 1. 前言 | 第28页 |
| 2. 材料与方法 | 第28-34页 |
| 2.1 样品来源 | 第28页 |
| 2.2 主要试剂 | 第28-29页 |
| 2.3 主要实验仪器 | 第29页 |
| 2.4 病毒的分离 | 第29-30页 |
| 2.5 病毒亚型血凝抑制试验的鉴定 | 第30-31页 |
| 2.6 PCR鉴定病毒亚型与PCR扩增回收全基因组 | 第31-33页 |
| 2.7 病毒基因序列测定 | 第33页 |
| 2.8 遗传进化分析 | 第33-34页 |
| 3. 结果 | 第34-49页 |
| 3.1 病毒的分离及鉴定 | 第34页 |
| 3.2 亚型H1N1的猪流感病毒全基因测序分析 | 第34-49页 |
| 4. 讨论 | 第49-53页 |
| 4.1 流行病学调查 | 第49页 |
| 4.2 HA基因的分子生物学分析 | 第49-50页 |
| 4.3 遗传进化分析 | 第50-51页 |
| 4.4 药物敏感性分析 | 第51-53页 |
| 第三章 2009甲型H1N1病毒对小鼠的致病性实验 | 第53-61页 |
| 1. 前言 | 第53页 |
| 2. 材料与方法 | 第53-56页 |
| 2.1 毒株 | 第53页 |
| 2.2 细胞 | 第53页 |
| 2.3 实验动物 | 第53-54页 |
| 2.4 试剂 | 第54页 |
| 2.5 实验器材 | 第54页 |
| 2.6 病毒在MDCK细胞上培养增殖 | 第54-55页 |
| 2.7 组织半数感染量(50% Tissue culture infections dose,TCID_(50))测定 | 第55页 |
| 2.8 感染实验 | 第55-56页 |
| 2.9 病毒滴定 | 第56页 |
| 2.10 整理数据 | 第56页 |
| 3. 结果 | 第56-59页 |
| 3.1 3株2009甲型H1N1流感病毒细胞半数感染量(TCID_(50))/mL结果 | 第56页 |
| 3.2 鼻腔感染BALB/c小鼠存活及体重变化结果 | 第56-57页 |
| 3.3 3株2009甲型H1N1流感病毒鼻腔感染小鼠脏器病毒分离结果 | 第57-58页 |
| 3.4 3株2009甲型H1N1流感病毒对小鼠感染性划分 | 第58-59页 |
| 4. 讨论 | 第59-61页 |
| 第四章 2009(H1N1)流感病毒A/Swine/Guangxi/12/2011株血凝素点突变拯救毒株对小鼠致病性的研究 | 第61-80页 |
| 1. 前言 | 第61-62页 |
| 2. 材料与方法 | 第62-72页 |
| 2.1 毒株 | 第62页 |
| 2.2 鸡胚及动物 | 第62页 |
| 2.3 主要试剂、仪器设备 | 第62页 |
| 2.4 293T细胞 | 第62页 |
| 2.5 pBD载体 | 第62-64页 |
| 2.6 重组质粒的构建 | 第64-67页 |
| 2.7 病毒拯救 | 第67-69页 |
| 2.8 HA基因定点突变 | 第69-71页 |
| 2.9 定点突变毒株的拯救 | 第71-72页 |
| 2.10 获救的亲本重组以及点突变病毒对BALB/c小鼠的致病性试验 | 第72页 |
| 3. 结果 | 第72-77页 |
| 3.1 救获亲本毒株结果 | 第72-74页 |
| 3.2 HA基因定点突变结果 | 第74-75页 |
| 3.3 救获病毒对BALB/c小鼠的致病性结果 | 第75-77页 |
| 4. 讨论 | 第77-80页 |
| 4.1 反向遗传操作技术的应用 | 第77-78页 |
| 4.2 流感病毒基因突变对致病性的影响 | 第78-80页 |
| 第五章 结论 | 第80-82页 |
| 参考文献 | 第82-99页 |
| 附录 | 第99-120页 |
| 致谢 | 第120-121页 |
| 攻读学位期间论文发表及科研成果情况 | 第121页 |
