| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 1 绪论 | 第9-15页 |
| 1.1 植物蛋白酶抑制剂研究进展 | 第9-10页 |
| 1.2 鳞翅目昆虫唾液中与植物防御反应相关的激发子（抑制子）种类、功能及研究现状 | 第10-11页 |
| 1.3 植食性昆虫葡萄糖苷酶在植物诱导防御反应中的作用及研究进展 | 第11-13页 |
| 1.4 研究目的、意义和研究内容 | 第13-15页 |
| 2 茶树丝氨酸蛋白酶抑制剂基因的克隆、表达 | 第15-26页 |
| 2.1 材料与方法 | 第15-20页 |
| 2.1.1 仪器设备 | 第15页 |
| 2.1.2 供试试剂 | 第15页 |
| 2.1.3 供试材料 | 第15-16页 |
| 2.1.4 引物设计 | 第16页 |
| 2.1.5 茶树Total RNA提取 | 第16-17页 |
| 2.1.6 cDNA第一链的合成 | 第17页 |
| 2.1.7 Luria-Bertani培养基的制备 | 第17页 |
| 2.1.8 PCR扩增 | 第17-18页 |
| 2.1.9 DNA的凝胶回收 | 第18页 |
| 2.1.10 纯化加A | 第18页 |
| 2.1.11 连接T载体 | 第18-19页 |
| 2.1.12 大肠杆菌的热击转化 | 第19页 |
| 2.1.13 菌落PCR | 第19页 |
| 2.1.14 CsSPI基因表达分析 | 第19-20页 |
| 2.1.15 数据分析方法 | 第20页 |
| 2.2 结果与分析 | 第20-24页 |
| 2.2.1 CsSPI基因PCR扩增 | 第20-21页 |
| 2.2.2 CsSPI的理化性质 | 第21-22页 |
| 2.2.3 CsSPI的结构分析 | 第22页 |
| 2.2.4 实时荧光定量PCR反应条件的确定 | 第22页 |
| 2.2.5 CsSPI的表达特征分析 | 第22-24页 |
| 2.3 讨论 | 第24-26页 |
| 3 不同茶树品种胰蛋白酶抑制剂及抗性分析 | 第26-32页 |
| 3.1 材料与方法 | 第26-27页 |
| 3.1.1 仪器设备 | 第26页 |
| 3.1.2 供试试剂 | 第26页 |
| 3.1.3 供试材料 | 第26-27页 |
| 3.1.4 茶树蛋白酶抑制剂活性的测定 | 第27页 |
| 3.1.5 生物量测定 | 第27页 |
| 3.1.6 数据分析方法 | 第27页 |
| 3.2 结果与分析 | 第27-30页 |
| 3.2.1 不同茶树品种胰蛋白酶抑制剂活性的测定 | 第27-28页 |
| 3.2.2 不同茶树品种对灰茶尺蠖幼虫体重的影响 | 第28-29页 |
| 3.2.3 不同茶树品种对灰茶尺蠖幼虫死亡率、化蛹率、成虫羽化率的影响 | 第29页 |
| 3.2.4 不同茶树品种对灰茶尺蠖幼虫期和蛹的影响 | 第29-30页 |
| 3.3 讨论 | 第30-32页 |
| 4 灰茶尺蠖葡萄糖苷酶基因EgGL的克隆和生物信息学分析 | 第32-40页 |
| 4.1 材料与方法 | 第32-35页 |
| 4.1.1 仪器设备 | 第32页 |
| 4.1.2 供试试剂 | 第32页 |
| 4.1.3 供试材料 | 第32页 |
| 4.1.4 引物设计 | 第32页 |
| 4.1.5 灰茶尺蠖幼虫Total RNA提取 | 第32-33页 |
| 4.1.6 cDNA第一链的合成 | 第33页 |
| 4.1.7 Luria-Bertani培养基的制备 | 第33页 |
| 4.1.8 PCR扩增 | 第33-34页 |
| 4.1.9 DNA的凝胶回收 | 第34页 |
| 4.1.10 纯化加A | 第34页 |
| 4.1.11 连接T载体 | 第34页 |
| 4.1.12 大肠杆菌的热击转化 | 第34页 |
| 4.1.13 菌落PCR | 第34-35页 |
| 4.1.14 数据分析方法 | 第35页 |
| 4.2 结果与分析 | 第35-39页 |
| 4.2.1 EgGL基因PCR扩增 | 第35页 |
| 4.2.2 EgGL基因序列分析 | 第35-36页 |
| 4.2.3 EgGL蛋白质的理化性质 | 第36-37页 |
| 4.2.4 EgGL序列的结构分析 | 第37-39页 |
| 4.2.5 EgGL序列的同源性比对 | 第39页 |
| 4.3 讨论 | 第39-40页 |
| 5 L4440-EgGL重组表达载体的构建与转化 | 第40-51页 |
| 5.1 材料与方法 | 第40-47页 |
| 5.1.1 仪器设备 | 第40页 |
| 5.1.2 供试试剂 | 第40-41页 |
| 5.1.3 供试材料 | 第41页 |
| 5.1.4 大肠杆菌DH5α 感受态细胞的制备 | 第41-42页 |
| 5.1.5 重组质粒的筛选与鉴定 | 第42页 |
| 5.1.6 L4440-EgGL重组表达载体的构建 | 第42-45页 |
| 5.1.7 大肠杆菌HT115（DE3）表达ds RNA | 第45-46页 |
| 5.1.8 EgGL基因表达分析 | 第46页 |
| 5.1.9 数据分析方法 | 第46-47页 |
| 5.2 结果与分析 | 第47-50页 |
| 5.2.1 灰茶尺蠖EgGL基因的表达模式分析 | 第47页 |
| 5.2.2 L4440载体的获得与鉴定 | 第47-48页 |
| 5.2.3 表达EgGL dsRNA目的片段的选择与获得 | 第48-49页 |
| 5.2.4 L4440-EgGL在大肠杆菌HT115（DE3）中的鉴定 | 第49-50页 |
| 5.3 讨论 | 第50-51页 |
| 6 结论 | 第51-53页 |
| 6.1 总结 | 第51页 |
| 6.2 展望 | 第51-53页 |
| 参考文献 | 第53-59页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第59-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
