| 摘要 | 第5-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 1 绪论 | 第13-25页 |
| 1.1 角蛋白的介绍 | 第13-15页 |
| 1.2 微生物降解角蛋白的机理 | 第15-16页 |
| 1.3 角蛋白酶的介绍 | 第16-23页 |
| 1.3.1 角蛋白酶的来源 | 第16-19页 |
| 1.3.2 角蛋白酶的理化性质 | 第19-20页 |
| 1.3.3 角蛋白酶的基因序列和氨基酸序列 | 第20-21页 |
| 1.3.4 角蛋白酶的应用 | 第21-23页 |
| 1.4 选题意义和主要内容 | 第23-25页 |
| 1.4.1 选题意义 | 第23-24页 |
| 1.4.2 主要内容 | 第24-25页 |
| 2 Stenotrophomonas maltophilia DHHJ降解羽毛的生理效应及酶学研究 | 第25-35页 |
| 2.1 实验材料与仪器 | 第25-27页 |
| 2.1.1 供试细菌 | 第25页 |
| 2.1.2 底物(诱导物) | 第25页 |
| 2.1.3 培养基(W/V%) | 第25-26页 |
| 2.1.4 药品与试剂 | 第26页 |
| 2.1.5 仪器与设备 | 第26-27页 |
| 2.2 实验方法 | 第27-28页 |
| 2.2.1 菌株复壮 | 第27页 |
| 2.2.2 角蛋白酶活的测定 | 第27页 |
| 2.2.3 超声波对细胞破碎及角蛋白酶活的影响 | 第27-28页 |
| 2.2.4 发酵罐发酵产角蛋白酶 | 第28页 |
| 2.2.5 不同诱导物诱导产角蛋白酶 | 第28页 |
| 2.2.6 粗酶液处理后的羽毛电镜观察 | 第28页 |
| 2.2.7 细菌表面形态的电镜观察 | 第28页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第28-34页 |
| 2.3.1 不同诱导物诱导产角蛋白酶 | 第29-30页 |
| 2.3.2 超声波对细胞破碎及角蛋白酶活的影响 | 第30-31页 |
| 2.3.3 发酵罐发酵产角蛋白酶 | 第31-32页 |
| 2.3.4 粗酶液处理后的羽毛电镜观察 | 第32-33页 |
| 2.3.5 细菌表面形态的电镜观察 | 第33页 |
| 2.3.6 发酵后羽毛的形态观察 | 第33-34页 |
| 2.4 本章小结 | 第34-35页 |
| 3 角蛋白酶的纯化,酶学性质研究及质谱分析 | 第35-62页 |
| 3.1 实验材料与仪器 | 第35-38页 |
| 3.1.1 供试细菌 | 第35页 |
| 3.1.2 底物(诱导物) | 第35页 |
| 3.1.3 培养基(W/V%) | 第35-36页 |
| 3.1.4 药品与试剂 | 第36-37页 |
| 3.1.5 仪器与设备 | 第37-38页 |
| 3.2 实验方法 | 第38-43页 |
| 3.2.1 角蛋白酶活的测定 | 第38页 |
| 3.2.2 蛋白含量的测定 | 第38-39页 |
| 3.2.3 发酵培养条件及粗酶液的提取 | 第39页 |
| 3.2.4 盐析与透析 | 第39页 |
| 3.2.5 蛋白酶液的浓缩 | 第39页 |
| 3.2.6 陶瓷羟基磷灰石CHT层析 | 第39页 |
| 3.2.7 离子交换柱DEAE层析 | 第39-40页 |
| 3.2.8 Sephadex G-50凝胶柱层析 | 第40页 |
| 3.2.9 SDS-PAGE电泳 | 第40-42页 |
| 3.2.10 粗酶液与纯角蛋白酶的温度稳定性 | 第42页 |
| 3.2.11 金属离子,有机溶剂和表面活性剂对角蛋白酶活力的影响 | 第42-43页 |
| 3.2.12 角蛋白酶的酶促反应动力学 | 第43页 |
| 3.2.13 NanoLC-ESI-MS/MS质谱分析 | 第43页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第43-60页 |
| 3.3.1 盐析 | 第43-44页 |
| 3.3.2 蛋白质的浓缩 | 第44页 |
| 3.3.3 CHT层析 | 第44-45页 |
| 3.3.4 DEAE层析 | 第45-46页 |
| 3.3.5 Sephadex G-50凝胶过滤层析 | 第46-47页 |
| 3.3.6 酶的纯化结果 | 第47-48页 |
| 3.3.7 SDS-PAGE电泳 | 第48-51页 |
| 3.3.8 粗酶液与纯角蛋白酶温度稳定性 | 第51-52页 |
| 3.3.9 金属离子,有机溶剂和表面活性剂对角蛋白酶活力的影响 | 第52-54页 |
| 3.3.10 角蛋白酶的酶促反应动力学 | 第54-56页 |
| 3.3.11 NanoLC-ESI-MS/MS质谱分析结果 | 第56-60页 |
| 3.4 本章小结 | 第60-62页 |
| 4 结论与展望 | 第62-64页 |
| 4.1 结论 | 第62-63页 |
| 4.1.1 嗜麦芽窄食单胞菌降解DHHJ羽毛的机制研究 | 第62页 |
| 4.1.2 角蛋白酶的纯化,酶学性质研究及质谱分析 | 第62-63页 |
| 4.2 展望 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-70页 |
| 攻读学位期间发表的学位论文及专利 | 第70-71页 |
| 致谢 | 第71页 |
