| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 英文缩略词 | 第8-12页 |
| 1 前言 | 第12-23页 |
| 1.1 流感病毒 | 第12-14页 |
| 1.1.1 H5N1高致病性禽流感流行现状 | 第12-13页 |
| 1.1.2 禽流感病毒分子生物学 | 第13-14页 |
| 1.2 禽流感疫苗的研究进展 | 第14-19页 |
| 1.2.1 全病毒灭活疫苗 | 第14-15页 |
| 1.2.2 DNA疫苗 | 第15页 |
| 1.2.3 重组活载体疫苗 | 第15-16页 |
| 1.2.4 基因工程亚单位疫苗 | 第16页 |
| 1.2.5 通用型流感疫苗 | 第16-19页 |
| 1.3 昆虫杆状病毒表达系统 | 第19-22页 |
| 1.3.1 昆虫杆状病毒表达系统概述 | 第19-21页 |
| 1.3.2 昆虫杆状病毒表达系统在禽流感疫苗研究中的应用 | 第21-22页 |
| 1.4 研究目的和意义 | 第22-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-37页 |
| 2.1 材料 | 第23-26页 |
| 2.1.1 病毒 | 第23页 |
| 2.1.2 细胞 | 第23页 |
| 2.1.3 菌种与质粒 | 第23页 |
| 2.1.4 抗体 | 第23页 |
| 2.1.5 主要试剂 | 第23-24页 |
| 2.1.6 细胞培养试剂配制 | 第24页 |
| 2.1.7 细菌培养试剂配制 | 第24页 |
| 2.1.8 抗生素配制 | 第24-25页 |
| 2.1.9 质粒提取相关试剂 | 第25页 |
| 2.1.10 其它试剂配制 | 第25-26页 |
| 2.1.11 主要仪器和设备 | 第26页 |
| 2.2 方法 | 第26-37页 |
| 2.2.1 重组质粒pc DNA3.1-HMNN的构建与鉴定 | 第26-29页 |
| 2.2.2 重组质粒p Fast-G-CMV-HMNN的构建与鉴定 | 第29-31页 |
| 2.2.3 三抗高盐LB琼脂培养平板的制备 | 第31页 |
| 2.2.4 重组杆状病毒BV-HMNN的获得 | 第31-33页 |
| 2.2.5 重组杆状病毒BV-HMNN的鉴定 | 第33-34页 |
| 2.2.6 重组杆状病毒的纯化与毒价测定 | 第34页 |
| 2.2.7 免疫原性分析以及攻毒保护实验 | 第34-37页 |
| 3 结果与分析 | 第37-45页 |
| 3.1 抗原表位氨基酸序列 | 第37页 |
| 3.2 重组质粒pc DNA3.1-HMNN的鉴定 | 第37-38页 |
| 3.3 重组转移质粒p Fast-G-CMV-HMNN的鉴定 | 第38-39页 |
| 3.4 重组穿梭载体Bacmid-G-HMNN的鉴定 | 第39-40页 |
| 3.5 重组杆状病毒BV-HMNN的获得 | 第40页 |
| 3.6 重组杆状病毒结构示意图 | 第40页 |
| 3.7 重组杆状病毒BV-HMNN转导CEF细胞 | 第40-41页 |
| 3.8 HI抗体和M2e抗体检测 | 第41-42页 |
| 3.9 保护率 | 第42-43页 |
| 3.10 排毒情况 | 第43-45页 |
| 4 讨论与结论 | 第45-48页 |
| 全文总结 | 第48-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-56页 |
| 附录A pc DNA3.1 (+) 表达载体图谱 | 第56-57页 |
| 附录B p Fast Bac~(TM) Dual表达载体图谱 | 第57-58页 |
| 附录C 硕士期间发表文章 | 第58页 |
