致谢 | 第7-12页 |
缩写词(Abbreviation) | 第12-14页 |
氨基酸简写符号(Amino acid abbreviation) | 第14-15页 |
摘要 | 第15-17页 |
Abstract | 第17-18页 |
引言 | 第19-21页 |
1 文献综述 | 第21-35页 |
1.1 芦笋营养及药用价值 | 第21-28页 |
1.1.1 芦笋的营养价值 | 第21页 |
1.1.2 芦笋的药用价值 | 第21-22页 |
1.1.3 皂苷合成机制研究进展 | 第22-26页 |
1.1.4 芦笋皂苷合成研究进展 | 第26-28页 |
1.2 miRNA研究进展 | 第28-30页 |
1.2.1 miRNA形成机制 | 第28-29页 |
1.2.2 miRNA作用方式 | 第29-30页 |
1.2.3 植物miRNA的功能研究进展 | 第30页 |
1.3 植物性别分化研究进展 | 第30-34页 |
1.3.1 性别决定相关基因的研究 | 第31页 |
1.3.2 植物性染色体研究 | 第31-34页 |
1.4 展望 | 第34-35页 |
2 芦笋皂苷合成相关基因克隆及序列分析 | 第35-73页 |
2.1 材料与方法 | 第35-46页 |
2.1.1 试验材料与主要试剂 | 第35-36页 |
2.1.2 芦笋总RNA的提取 | 第36页 |
2.1.3 芦笋皂苷合成相关基因片段克隆 | 第36-38页 |
2.1.4 3'RACE | 第38-40页 |
2.1.5 5'RACE | 第40-42页 |
2.1.6 目的片段的回收、连接、转化、克隆与测序 | 第42-44页 |
2.1.7 芦笋FPPS,SQS,SE,CAS基因序列分析 | 第44-45页 |
2.1.8 芦笋FPPS、SQS、SE、CAS基因瞬时表达分析 | 第45-46页 |
2.2 结果与分析 | 第46-69页 |
2.2.1 RNA的提取和cDNA的合成 | 第46-48页 |
2.2.2 芦笋FPPS,SQS,SE,CAS的克隆 | 第48-50页 |
2.2.3 芦笋FPPS的序列特征分析 | 第50-57页 |
2.2.4 芦笋SQS的序列分析 | 第57-62页 |
2.2.5 芦笋SE基因序列分析 | 第62-66页 |
2.2.6 芦笋CAS基因序列分析 | 第66-69页 |
2.3 讨论 | 第69-73页 |
3 芦笋皂苷的积累特点研究与皂苷合成相关基因表达分析 | 第73-83页 |
3.1 材料与方法 | 第73-76页 |
3.1.1 实验材料与主要试剂 | 第73-74页 |
3.1.2 实时荧光定量PCR分析的方法 | 第74-75页 |
3.1.3 芦笋总皂苷提取及含量分析 | 第75-76页 |
3.2 结果与分析 | 第76-80页 |
3.2.1 不同部位RNA的提取与cDNA的合成 | 第76页 |
3.2.2 芦笋皂苷代谢相关基因表达分析 | 第76-79页 |
3.2.3 不同组织部位以及嫩茎不同发育时期总皂苷含量的比较 | 第79-80页 |
3.3 讨论 | 第80-83页 |
4 芦笋miRNAs分离及其靶基因鉴定 | 第83-113页 |
4.1 材料与方法 | 第83-91页 |
4.1.1 实验材料 | 第83-84页 |
4.1.2 小分子RNA文库构建及测序 | 第84页 |
4.1.3 芦笋EST序列收集及序列拼装 | 第84页 |
4.1.4 测序数据分析 | 第84-85页 |
4.1.5 miRNA差异表达分析 | 第85页 |
4.1.6 降解组文库构建 | 第85页 |
4.1.7 降解组数据分析 | 第85-86页 |
4.1.8 qRT-PCR分析验证 | 第86-89页 |
4.1.9 靶基因qRT-PCR分析 | 第89-91页 |
4.2 结果与分析 | 第91-108页 |
4.2.1 芦笋小RNA文库序列分析 | 第91-92页 |
4.2.2 芦笋已知miRNA分离鉴定 | 第92-93页 |
4.2.3 芦笋新miRNA分离鉴定 | 第93页 |
4.2.4 芦笋雌株与雄株miRNA差异表达分析 | 第93-100页 |
4.2.5 芦笋miRNA靶基因预测 | 第100-107页 |
4.2.6 芦笋miRNA靶基因的GO分析 | 第107页 |
4.2.7 芦笋花发育相关miRNA靶基因的qRT-PCR分析 | 第107-108页 |
4.3 讨论 | 第108-113页 |
结论 | 第113-115页 |
参考文献 | 第115-126页 |
附表 | 第126-138页 |