摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
1、前言 | 第12-22页 |
1.1 Wolbachia与CI关系的概述 | 第12-13页 |
1.2 果蝇精子发生 | 第13-19页 |
1.2.1 果蝇精子发生过程 | 第13-14页 |
1.2.2 果蝇精巢生殖干细胞中的主要转录调控 | 第14-17页 |
1.2.3 果蝇精子发生过程相关基因研究概述 | 第17-19页 |
1.3 mlc2基因研究进展 | 第19-20页 |
1.4 ocnus基因研究进展 | 第20页 |
1.5 本研究的目的与意义 | 第20-22页 |
2、实验材料与方法 | 第22-29页 |
2.1 实验材料 | 第22页 |
2.2 主要仪器设备 | 第22-23页 |
2.3 试验方法 | 第23-29页 |
2.3.1 果蝇普通培养基的配置 | 第23页 |
2.3.2 果蝇四环素培养基的配置 | 第23-24页 |
2.3.3 胚胎收集盘培养基的配置 | 第24页 |
2.3.4 果蝇中Wolbachia的检测 | 第24页 |
2.3.5 果蝇基因组DNA的提取 | 第24-25页 |
2.3.6 果蝇RNA的提取 | 第25页 |
2.3.7 DNA消化、RNA反转录 | 第25-26页 |
2.3.8 果蝇精巢DAPI染色 | 第26-27页 |
2.3.9 敲降雄蝇繁殖力的检测 | 第27页 |
2.3.10 敲降雄蝇性活力测定 | 第27页 |
2.3.11 敲降雌蝇产卵量和胚胎孵化率的测定 | 第27页 |
2.3.12 敲降雄蝇嗅觉反应能力的测定 | 第27-29页 |
3、实验结果与分析 | 第29-38页 |
3.1 果蝇体内Wolbachia的去除 | 第29页 |
3.2 感染Wolbachia的雄性果蝇中ocnus表达量下调 | 第29-30页 |
3.3 NosGal4和BamGal4驱动ocnus在雄果蝇中表达水平显著下调 | 第30-31页 |
3.4 ocnus敲降雄蝇的繁殖力的检测 | 第31-32页 |
3.5 ocnus基因敲降一日龄雄蝇精巢的DAPI染色 | 第32-33页 |
3.6 ocnus敲降雄蝇的性活力下降 | 第33页 |
3.7 ocnus敲降降低雄蝇嗅觉陷阱反应能力 | 第33-34页 |
3.8 ocnus敲降减弱雄蝇的自身运动能力和对雌蝇陷阱的反应能力 | 第34-35页 |
3.9 ocnus敲降导致运动相关基因mlc2基因表达量显著下调 | 第35-36页 |
3.10 ocnus基因敲降对雌蝇产卵量及胚胎孵化率的影响 | 第36-37页 |
3.11 ocnus全身广泛敲降(ActGAl4)导致幼虫生长发育受阻 | 第37-38页 |
4、讨论 | 第38-42页 |
4.1 ocnus在生殖腺敲降(NosGal4)和在精巢中特异敲降(BamGal4)严重影响精子发生过程和精巢形状大小 | 第38-39页 |
4.2 ocnus敲降显著减弱雄蝇交配活力 | 第39页 |
4.3 ocnus敲降显著减弱雄蝇自身运动能力和对雌蝇陷阱反应能力 | 第39-41页 |
4.4 ocnus全身广泛敲降对幼虫生长发育的影响 | 第41页 |
4.5 ocnus敲降对雌蝇产卵量的影响 | 第41-42页 |
参考文献 | 第42-50页 |
攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第50-51页 |
致谢 | 第51页 |