| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 缩略词 | 第9-13页 |
| 1 前言 | 第13-29页 |
| 1.1 棉花雄性不育研究进展 | 第14-18页 |
| 1.1.1 棉花细胞核雄性不育 | 第14-15页 |
| 1.1.2 棉花细胞质雄性不育 | 第15-17页 |
| 1.1.3 生态敏感型雄性不育 | 第17-18页 |
| 1.2 植物CMS分子机理 | 第18-22页 |
| 1.2.1 植物线粒体基因组与CMS的关系 | 第18-21页 |
| 1.2.2 植物叶绿体基因组与CMS的关系 | 第21-22页 |
| 1.3 分子标记技术在CMS中的应用 | 第22-28页 |
| 1.3.1 分子标记技术的种类及特点 | 第23-26页 |
| 1.3.2 分子标记技术在棉花CMS研究中的应用 | 第26-27页 |
| 1.3.3 AFLP在棉花CMS研究中的应用 | 第27-28页 |
| 1.4 研究内容、目的及意义 | 第28-29页 |
| 2 材料与方法 | 第29-45页 |
| 2.1 实验材料 | 第29页 |
| 2.1.1 材料来源 | 第29页 |
| 2.1.2 材料筛选 | 第29页 |
| 2.2 实验仪器 | 第29-30页 |
| 2.3 实验方法 | 第30-44页 |
| 2.3.1 基因组DNA的提取 | 第30-31页 |
| 2.3.2 AFLP分子标记操作体系及技术 | 第31-36页 |
| 2.3.3 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第36-39页 |
| 2.3.4 差异条带统计 | 第39页 |
| 2.3.5 差异条带回收 | 第39-40页 |
| 2.3.6 差异条带纯化 | 第40-41页 |
| 2.3.7 差异条带克隆及测序 | 第41-44页 |
| 2.3.8 H276A与H276B差异位点的定位 | 第44页 |
| 2.4 海岛棉细胞质分子标签的开发 | 第44-45页 |
| 3 结果与分析 | 第45-56页 |
| 3.1 基因组DNA检测 | 第45-47页 |
| 3.1.1 基因组DNA提取 | 第45-46页 |
| 3.1.2 不育池DNA检测 | 第46-47页 |
| 3.2 AFLP分子标记 | 第47-51页 |
| 3.2.1 酶切检测 | 第47页 |
| 3.2.2 预扩增检测结果 | 第47-48页 |
| 3.2.3 选择性扩增差异图谱 | 第48-51页 |
| 3.2.4 AFLP标记图谱差异条带统计分析 | 第51页 |
| 3.3 差异片段的回收与克隆 | 第51-56页 |
| 3.3.1 差异片段测序结果 | 第54-56页 |
| 4 差异条带序列生物信息学分析讨论 | 第56-71页 |
| 4.1 同源序列基因定位 | 第56-60页 |
| 4.1.1 E9M11,E11M11引物扩增序列分析 | 第57-58页 |
| 4.1.2 E5M16引物扩增序列分析 | 第58-59页 |
| 4.1.3 E7M15引物扩增序列分析 | 第59-60页 |
| 4.1.4 E16M5,E14M5引物扩增序列分析 | 第60页 |
| 4.2 差异位点分析 | 第60-63页 |
| 4.2.1 引物E9M11与E11M11扩增片段比对 | 第60-61页 |
| 4.2.2 引物E5M16扩增片段比对 | 第61页 |
| 4.2.3 引物E16M5与E14M5扩增片段比对 | 第61-62页 |
| 4.2.4 引物E7M15扩增片段比对 | 第62-63页 |
| 4.3 海岛棉CMS分子标签的制备 | 第63-67页 |
| 4.4 讨论 | 第67-71页 |
| 4.4.1 DNA模板质量对AFLP的影响 | 第67页 |
| 4.4.2 酶切连接分步法 | 第67页 |
| 4.4.3 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测 | 第67-68页 |
| 4.4.4 AFLP图谱差异条带与CMS | 第68-69页 |
| 4.4.5 分子标签的开发 | 第69页 |
| 4.4.6 棉花线粒体DNA与CMS | 第69-70页 |
| 4.4.7 创新性 | 第70-71页 |
| 5 结论 | 第71-73页 |
| 5.1 高质量DNA的提取 | 第71页 |
| 5.2 优化适于棉花的AFLP技术反应条件及体系 | 第71页 |
| 5.3 多态性条带统计及分析 | 第71-72页 |
| 5.4 开发海岛棉不育系与保持系分子标签 | 第72页 |
| 5.5 问题与展望 | 第72-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-81页 |
