| 摘要 | 第8-10页 |
| 英文摘要 | 第10-11页 |
| 1 引言 | 第12-21页 |
| 1.1 鸡球虫病简介 | 第12-13页 |
| 1.1.1 鸡球虫的分类 | 第12页 |
| 1.1.2 鸡球虫病的临床表现及危害 | 第12页 |
| 1.1.3 鸡球虫的生活史 | 第12-13页 |
| 1.2 顶复门原虫顶体膜抗原1（AMA1）研究进展 | 第13-15页 |
| 1.2.1 弓形虫、疟原虫AMA1的研究进展 | 第14-15页 |
| 1.2.2 鸡柔嫩艾美耳球虫AMA1研究进展 | 第15页 |
| 1.3 噬菌体展示技术研究进展 | 第15-18页 |
| 1.3.1 噬菌体展示技术的原理 | 第16-17页 |
| 1.3.2 噬菌体展示技术的应用 | 第17-18页 |
| 1.4 分子模拟方法简介 | 第18-19页 |
| 1.4.1 同源建模 | 第19页 |
| 1.4.2 分子对接 | 第19页 |
| 1.5 研究的目的和意义 | 第19-21页 |
| 2 材料和方法 | 第21-35页 |
| 2.1 实验材料 | 第21-24页 |
| 2.1.1 实验动物和虫种 | 第21页 |
| 2.1.2 菌种与细胞株 | 第21页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第21页 |
| 2.1.4 标准参照物 | 第21页 |
| 2.1.5 主要仪器与设备 | 第21-22页 |
| 2.1.6 主要溶液的配制 | 第22-24页 |
| 2.2 实验方法 | 第24-35页 |
| 2.2.1 EctoAMA1重组蛋白的纯化与复性 | 第24-25页 |
| 2.2.2 利用噬菌体随机十二肽库筛选EctoAMA1蛋白亲和配体 | 第25-26页 |
| 2.2.3 结合克隆的特征鉴定 | 第26-28页 |
| 2.2.4 亲和噬菌体氨基酸序列推导与合成 | 第28页 |
| 2.2.5 ELISA检测亲和噬菌体与重组EctoAMA1蛋白及虫体EtAMA1蛋白结合情况 | 第28-30页 |
| 2.2.6 体外检测两多肽抑制E. tenella子孢子入侵细胞的作用 | 第30-31页 |
| 2.2.7 体内检测两多肽阳性噬菌体抗球虫保护作用 | 第31-33页 |
| 2.2.8 利用同源模建和分子对接分析Et AMA1与L肽、C肽的结合 | 第33-35页 |
| 3 结果 | 第35-51页 |
| 3.1 重组EctoAMA1蛋白的纯化与复性 | 第35页 |
| 3.2 噬菌体十二肽库对EctoAMA1重组蛋白亲和配体的生物淘选 | 第35-38页 |
| 3.2.1 噬菌体十二肽库对Ecto AMAl重组蛋白的四轮淘洗 | 第35-38页 |
| 3.3 多肽的亲和力检测 | 第38-40页 |
| 3.3.1 亲和噬菌体与EctoAMA1结合情况的ELISA检测 | 第38页 |
| 3.3.2 EctoAMA1多抗竞争抑制亲和噬菌体与EctoAMA1重组蛋白结合 | 第38-39页 |
| 3.3.3 虫体EtAMA1蛋白与亲和噬菌体结合的ELISA检测 | 第39-40页 |
| 3.4 L、C两多肽对E.tenella子孢子入侵的体外抑制作用 | 第40-43页 |
| 3.4.1 E.tenella子孢子的纯化 | 第40页 |
| 3.4.2 多肽浓度的选择 | 第40-41页 |
| 3.4.3 EctoAMA1多克隆抗体抑制E.tenella子孢子入侵MDBK细胞 | 第41-42页 |
| 3.4.4 多肽对E.tenella子孢子入侵MDBK细胞的抑制 | 第42-43页 |
| 3.5 L、C两多肽体内抑制E.tenella子孢子入侵分析 | 第43-47页 |
| 3.5.1 体重增重变化 | 第43-44页 |
| 3.5.2 感染球虫后盲肠病变计分 | 第44页 |
| 3.5.3 卵囊排出减少率 | 第44-45页 |
| 3.5.4 抗球虫指数ACI | 第45页 |
| 3.5.5 盲肠病理组织学变化 | 第45-47页 |
| 3.6 同源建模与分子对接分析L、C两多肽与EtAMA1的结合情况 | 第47-51页 |
| 3.6.1 同源建模 | 第47-48页 |
| 3.6.2 分子对接 | 第48-51页 |
| 4 讨论 | 第51-55页 |
| 4.1 EctoAMA1亲和肽的筛选与鉴定 | 第51页 |
| 4.2 体外评价两个亲和肽抑制E.tenella子孢子入侵细胞的能力 | 第51-52页 |
| 4.3 体内评价亲和噬菌体抑制E.tenella子孢子入侵细胞的能力 | 第52-53页 |
| 4.4 利用同源建模和分子对接分析L、C两多肽与EtAMA1的结合 | 第53-55页 |
| 5 结论 | 第55-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-62页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第62页 |
