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Toll样受体4通过依赖NFκ-B激活胱硫醚β合成酶介导肠易激综合征大鼠的内脏痛敏

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
第一章 引言第11-13页
第二章 材料与方法第13-26页
    2.1 实验对象第13页
    2.2 新生期结肠炎性刺激症(NEONATAL COLONIC INFLAMMATION ,NCI)模型的建立第13页
    2.3 腹壁撤回反射(ABDOMINAL WITHDRAWAL REFLEX,AWR) 评分检测痛阈第13-14页
        2.3.1 实验仪器第13页
        2.3.2 实验方法第13-14页
        2.3.3 给药方法第14页
        2.3.4 实验用药第14页
    2.4 WESTERN BLOTTING检测蛋白表达第14-16页
        2.4.1 实验试剂第14-15页
        2.4.2 实验仪器第15页
        2.4.3 实验方法第15-16页
    2.5 急性分离DRG神经元和全细胞膜片钳实验第16-19页
        2.5.1 实验试剂第16页
        2.5.2 实验仪器第16-17页
        2.5.3 荧光染料DiI标记肠相关DRG神经元第17页
        2.5.4 急性分离DRG神经元第17-18页
        2.5.5 拉制玻璃微电极第18页
        2.5.6 全细胞膜片钳记录第18-19页
        2.5.7 神经元兴奋性记录第19页
    2.6 原代DRG细胞培养第19-21页
        2.6.1 实验试剂第19-20页
        2.6.2 实验仪器第20页
        2.6.3 急性分离DRG神经元第20页
        2.6.4 培养DRG神经元第20-21页
    2.7 免疫组化第21-22页
        2.7.1 实验试剂第21页
        2.7.2 实验仪器第21页
        2.7.3 实验方法第21-22页
    2.8 核蛋白提取第22-23页
        2.8.1 实验试剂Nc-细胞核/浆蛋白抽提试剂盒(康为世纪)第22-23页
        2.8.2 实验仪器第23页
        2.8.3 实验方法第23页
    2.9 染色质免疫共沉淀(CHIP)第23-26页
        2.9.1 实验试剂Chromatin Immunoprecipitation Kit (Millipore公司)第23页
        2.9.2 实验仪器第23页
        2.9.3 实验方法第23-26页
第三章 实验结果第26-37页
    3.1 TOLL样受体 4(TLR4)介导新生期结肠炎性刺激(NEONATAL COLONIC INFLAMMATION ,NCI)诱导的慢性内脏痛第26-27页
        3.1.1 TLR4 的表达上调参与新生期结肠炎性刺激诱导的慢性内脏痛第26页
        3.1.2 TLR4 参与NCI诱导的慢性内脏痛觉超敏第26-27页
    3.2 TLR4 抑制剂CLI-095 能够减少NCI大鼠肠相关DRG神经元的兴奋性第27-29页
    3.3 TLR4 抑制剂CLI-095 能够减少NCI大鼠肠相关DRG神经元中CBS的表达第29-30页
    3.4 NCI通过活化的TLR4 上调核转录因子NF-ΚB的表达第30-32页
        3.4.1 TLR4 和核转录因子p65 在SD大鼠结肠特异性神经元中共表达第30页
        3.4.2 NCI诱导NF-κB (p65)活化第30-31页
        3.4.3 TLR4 的拮抗剂CLI-095 翻转NF-κB (p65)的高表达第31-32页
    3.5 核转录因子NF-ΚB在NCI诱发的慢性内脏痛中的作用第32-34页
        3.5.1 核转录因子p65 和胱硫醚合酶CBS在大鼠结肠特异性神经元中共表达第32-33页
        3.5.2 NF-κB抑制剂PDTC翻转NCI诱导的成年大鼠内脏痛觉过敏第33-34页
    3.6 NCI能够增强NF-ΚB和CBS基因启动子区的结合第34-35页
    3.7 NF-ΚB抑制剂能够翻转TLR4 诱导的CBS蛋白表达的增加第35-37页
        3.7.1 TLR4 激动剂LPS孵育DRG神经元可引起NF-κB和CBS蛋白表达的改变第35页
        3.7.2 PDTC能够翻转LPS诱导激活的CBS的蛋白表达升高第35-37页
第四章 讨论第37-40页
参考文献第40-45页
综述第45-56页
    References第50-56页
攻读硕士学位期间公开发表的论文、会议摘要和奖励第56-57页
致谢第57-59页

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