摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第一章 引言 | 第11-13页 |
第二章 材料与方法 | 第13-26页 |
2.1 实验对象 | 第13页 |
2.2 新生期结肠炎性刺激症(NEONATAL COLONIC INFLAMMATION ,NCI)模型的建立 | 第13页 |
2.3 腹壁撤回反射(ABDOMINAL WITHDRAWAL REFLEX,AWR) 评分检测痛阈 | 第13-14页 |
2.3.1 实验仪器 | 第13页 |
2.3.2 实验方法 | 第13-14页 |
2.3.3 给药方法 | 第14页 |
2.3.4 实验用药 | 第14页 |
2.4 WESTERN BLOTTING检测蛋白表达 | 第14-16页 |
2.4.1 实验试剂 | 第14-15页 |
2.4.2 实验仪器 | 第15页 |
2.4.3 实验方法 | 第15-16页 |
2.5 急性分离DRG神经元和全细胞膜片钳实验 | 第16-19页 |
2.5.1 实验试剂 | 第16页 |
2.5.2 实验仪器 | 第16-17页 |
2.5.3 荧光染料DiI标记肠相关DRG神经元 | 第17页 |
2.5.4 急性分离DRG神经元 | 第17-18页 |
2.5.5 拉制玻璃微电极 | 第18页 |
2.5.6 全细胞膜片钳记录 | 第18-19页 |
2.5.7 神经元兴奋性记录 | 第19页 |
2.6 原代DRG细胞培养 | 第19-21页 |
2.6.1 实验试剂 | 第19-20页 |
2.6.2 实验仪器 | 第20页 |
2.6.3 急性分离DRG神经元 | 第20页 |
2.6.4 培养DRG神经元 | 第20-21页 |
2.7 免疫组化 | 第21-22页 |
2.7.1 实验试剂 | 第21页 |
2.7.2 实验仪器 | 第21页 |
2.7.3 实验方法 | 第21-22页 |
2.8 核蛋白提取 | 第22-23页 |
2.8.1 实验试剂Nc-细胞核/浆蛋白抽提试剂盒(康为世纪) | 第22-23页 |
2.8.2 实验仪器 | 第23页 |
2.8.3 实验方法 | 第23页 |
2.9 染色质免疫共沉淀(CHIP) | 第23-26页 |
2.9.1 实验试剂Chromatin Immunoprecipitation Kit (Millipore公司) | 第23页 |
2.9.2 实验仪器 | 第23页 |
2.9.3 实验方法 | 第23-26页 |
第三章 实验结果 | 第26-37页 |
3.1 TOLL样受体 4(TLR4)介导新生期结肠炎性刺激(NEONATAL COLONIC INFLAMMATION ,NCI)诱导的慢性内脏痛 | 第26-27页 |
3.1.1 TLR4 的表达上调参与新生期结肠炎性刺激诱导的慢性内脏痛 | 第26页 |
3.1.2 TLR4 参与NCI诱导的慢性内脏痛觉超敏 | 第26-27页 |
3.2 TLR4 抑制剂CLI-095 能够减少NCI大鼠肠相关DRG神经元的兴奋性 | 第27-29页 |
3.3 TLR4 抑制剂CLI-095 能够减少NCI大鼠肠相关DRG神经元中CBS的表达 | 第29-30页 |
3.4 NCI通过活化的TLR4 上调核转录因子NF-ΚB的表达 | 第30-32页 |
3.4.1 TLR4 和核转录因子p65 在SD大鼠结肠特异性神经元中共表达 | 第30页 |
3.4.2 NCI诱导NF-κB (p65)活化 | 第30-31页 |
3.4.3 TLR4 的拮抗剂CLI-095 翻转NF-κB (p65)的高表达 | 第31-32页 |
3.5 核转录因子NF-ΚB在NCI诱发的慢性内脏痛中的作用 | 第32-34页 |
3.5.1 核转录因子p65 和胱硫醚合酶CBS在大鼠结肠特异性神经元中共表达 | 第32-33页 |
3.5.2 NF-κB抑制剂PDTC翻转NCI诱导的成年大鼠内脏痛觉过敏 | 第33-34页 |
3.6 NCI能够增强NF-ΚB和CBS基因启动子区的结合 | 第34-35页 |
3.7 NF-ΚB抑制剂能够翻转TLR4 诱导的CBS蛋白表达的增加 | 第35-37页 |
3.7.1 TLR4 激动剂LPS孵育DRG神经元可引起NF-κB和CBS蛋白表达的改变 | 第35页 |
3.7.2 PDTC能够翻转LPS诱导激活的CBS的蛋白表达升高 | 第35-37页 |
第四章 讨论 | 第37-40页 |
参考文献 | 第40-45页 |
综述 | 第45-56页 |
References | 第50-56页 |
攻读硕士学位期间公开发表的论文、会议摘要和奖励 | 第56-57页 |
致谢 | 第57-59页 |