| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-6页 |
| 英文缩写词表 | 第6-10页 |
| 第一章 绪论 | 第10-34页 |
| ·TGEV 基因组结构特征 | 第10-16页 |
| ·结构蛋白 | 第12-15页 |
| ·非结构蛋白 | 第15-16页 |
| ·TGEV 的组织嗜性 | 第16-17页 |
| ·TGEV 实验室检测方法 | 第17-20页 |
| ·传统的诊断方法 | 第17-18页 |
| ·分子生物学诊断方法 | 第18-20页 |
| ·病毒的变异性 | 第20-21页 |
| ·反向遗传系统研究概况 | 第21-26页 |
| ·TGEV 反向遗传系统的建立 | 第21-23页 |
| ·反向遗传系统在TGEV 研究中的应用 | 第23-25页 |
| ·反向遗传系统的前景与展望 | 第25-26页 |
| ·TGEV 基因工程疫苗研究进展 | 第26-32页 |
| ·重组活载体疫苗 | 第26-29页 |
| ·基因缺失疫苗 | 第29-30页 |
| ·合成肽疫苗 | 第30-31页 |
| ·RNA 复制子疫苗 | 第31页 |
| ·转基因工程疫苗 | 第31-32页 |
| ·展望 | 第32页 |
| ·本研究目的与意义 | 第32-34页 |
| 第二章 上海地区猪场粪样检测及ORF 7 序列分析 | 第34-48页 |
| ·实验材料 | 第34-35页 |
| ·粪便样本 | 第34页 |
| ·主要试剂与仪器 | 第34-35页 |
| ·实验方法与步骤 | 第35-41页 |
| ·引物设计与合成 | 第35页 |
| ·RNA 的提取 | 第35-36页 |
| ·反转录及PCR 扩增 | 第36-37页 |
| ·片段的纯化回收 | 第37-38页 |
| ·克隆质粒的构建 | 第38页 |
| ·克隆质粒的转化及筛选 | 第38页 |
| ·克隆质粒的提取及鉴定 | 第38-39页 |
| ·ORF7 基因的扩增 | 第39-41页 |
| ·序列分析及进化树绘制 | 第41页 |
| ·结果 | 第41-46页 |
| ·检测结果 | 第41页 |
| ·ORF7 基因扩增结果及序列分析 | 第41-45页 |
| ·基于ORF7 序列绘制进化树 | 第45-46页 |
| ·讨论 | 第46-47页 |
| ·本章小结 | 第47-48页 |
| 第三章 TGETGEV SYBR GREEN I 荧光定量PCR 检测方法建立 | 第48-57页 |
| ·实验材料 | 第50页 |
| ·病毒与细胞 | 第50页 |
| ·仪器与试剂 | 第50页 |
| ·实验方法与步骤 | 第50-52页 |
| ·引物设计与合成 | 第50页 |
| ·病毒增殖与RNA 的提取 | 第50页 |
| ·标准品的制备 | 第50-51页 |
| ·Real time PCR 反应条件的优化 | 第51页 |
| ·标准曲线的建立 | 第51页 |
| ·敏感性试验 | 第51-52页 |
| ·特异性试验 | 第52页 |
| ·临床样品检测 | 第52页 |
| ·实验结果 | 第52-56页 |
| ·标准曲线的建立 | 第52-54页 |
| ·敏感性实验 | 第54页 |
| ·特异性实验及熔解曲线分析 | 第54-55页 |
| ·临床样品检测 | 第55-56页 |
| ·讨论 | 第56页 |
| ·本章小结 | 第56-57页 |
| 第四章结论 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-67页 |
| 附录 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第69-71页 |