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MiRNA-148b和miRNA-152在肾细胞癌中的表达及其功能与机制研究

摘要第2-4页
Abstract第4-6页
引言第10-13页
第一章 miR-148b和miR-152 在人肾细胞癌中的表达情况及临床意义第13-25页
    1.1 材料第13-15页
        1.1.1 组织样本第13-15页
        1.1.2 主要试剂第15页
    1.2 实验方法第15-17页
        1.2.1 实验步骤第15-17页
        1.2.2 引物设计第17页
        1.2.3 统计学处理第17页
    1.3 实验结果第17-22页
        1.3.1 肾细胞癌病例的临床分期、病理分级情况第17-18页
        1.3.2 PCR熔点曲线分析第18-19页
        1.3.3 实时定量PCR检测miR-148b和miR-152 在肾细胞癌及癌旁正常肾组织中的表达情况第19-20页
        1.3.4 实时定量PCR检测miR-148b和miR-152 在不同病理分级和临床分期肾细胞癌中的表达情况第20-22页
    1.4 讨论第22-24页
    1.5 小结第24-25页
第二章 miR-148b和miR-152 对肾癌细胞功能及肿瘤进展的影响第25-41页
    2.1 实验材料第25-26页
        2.1.1 细胞第25页
        2.1.2 主要试剂第25-26页
        2.1.3 主要仪器第26页
        2.1.4 主要溶液配制第26页
    2.2 实验方法第26-30页
        2.2.1 细胞培养第26-27页
        2.2.2 人肾癌细胞株转染第27-28页
        2.2.3 MTT法测定miR-148b和miR-152 对肾癌细胞增殖率的影响第28页
        2.2.4 miR-148b和miR-152 影响肾癌细胞凋亡的检测第28页
        2.2.5 miR-148b和miR-152 影响肾癌细胞克隆形成能力检测第28-29页
        2.2.6 Transwell细胞侵袭检测第29页
        2.2.7 Transwell细胞迁移检测第29-30页
        2.2.8 统计学处理第30页
    2.3 实验结果第30-38页
        2.3.1 过表达miR-148b和miR-152 对肾透明癌细胞增殖的影响第30-32页
        2.3.2 过表达miR-148b和miR-152 对肾透明癌细胞凋亡的影响第32-34页
        2.3.3 过表达miR-148b和miR-152 对肾癌细胞集落形成能力的影响第34-36页
        2.3.4 过表达miR-148b和miR-152 对肾癌细胞体外侵袭能力的影响第36-37页
        2.3.5 过表达miR-148b和miR-152 对肾癌细胞体外转移能力的影响第37-38页
    2.4 讨论第38-40页
    2.5 小结第40-41页
第三章 miR-148b和miR-152 影响肾癌细胞生物学行为的机制研究第41-57页
    3.1 实验材料第41-44页
        3.1.1 细胞第41页
        3.1.2 主要试剂第41-42页
        3.1.3 主要仪器第42页
        3.1.4 主要溶液配制第42-44页
    3.2 实验方法第44-46页
        3.2.1 利用生物信息软件预测miR-148b和miR-152 靶基因第44页
        3.2.2 转染和实验分组第44页
        3.2.3 Western Blot检测miR-148b和miR-152 对靶基因蛋白的影响第44-46页
    3.3 实验结果第46-52页
        3.3.1 预测miR-148b和miR-152 靶基因第46-47页
        3.3.2 Western Blot检测 786-O和SN12-PM6中靶基因和信号通路蛋白的表达水平第47-52页
    3.4 讨论第52-56页
    3.5 小结第56-57页
结论第57-58页
参考文献第58-63页
综述第63-79页
    参考文献第72-79页
攻读学位期间的研究成果第79-80页
附录第80-82页
致谢第82-83页

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