| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 1 前言 | 第8-19页 |
| 1.1 细胞规模化培养概述 | 第8-10页 |
| 1.1.1 细胞规模化培养技术简介 | 第8页 |
| 1.1.2 细胞规模化培养的条件 | 第8-9页 |
| 1.1.3 细胞规模化培养技术应用 | 第9-10页 |
| 1.2 胃癌概述 | 第10-12页 |
| 1.2.1 胃癌简介 | 第10页 |
| 1.2.2 胃癌发展现状 | 第10页 |
| 1.2.3 胃癌发病机制及治疗 | 第10-12页 |
| 1.3 硒多糖概述 | 第12-15页 |
| 1.3.1 硒多糖简介 | 第12-13页 |
| 1.3.2 硒多糖的存在形式及分布 | 第13页 |
| 1.3.3 硒多糖的生物活性 | 第13-14页 |
| 1.3.4 硒多糖的开发应用现状 | 第14-15页 |
| 1.4 细胞凋亡概述 | 第15-17页 |
| 1.4.1 细胞凋亡简介 | 第15页 |
| 1.4.2 细胞凋亡的特征 | 第15页 |
| 1.4.3 细胞凋亡的分子机制 | 第15-16页 |
| 1.4.4 细胞凋亡的相关蛋白 | 第16-17页 |
| 1.5 本课题研究意义及研究内容 | 第17-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-36页 |
| 2.1 实验材料 | 第19-23页 |
| 2.1.1 主要试剂及药品 | 第19-20页 |
| 2.1.2 主要仪器及设备 | 第20-21页 |
| 2.1.3 实验细胞及硒酸壳聚糖制备 | 第21-23页 |
| 2.2 主要方法 | 第23-36页 |
| 2.2.1 MGC-803细胞的培养 | 第23-24页 |
| 2.2.2 MGC-803细胞滚瓶培养条件的研究 | 第24-26页 |
| 2.2.3 MTT法检测细胞活性 | 第26-27页 |
| 2.2.4 MGC-803细胞形态观察 | 第27-28页 |
| 2.2.5 Hoechst 33258单染观察MGC-803细胞凋亡情况 | 第28页 |
| 2.2.6 Annexin V-FITC/PI双染测定MGC-803细胞凋亡率 | 第28-29页 |
| 2.2.7 流式细胞仪检测硒酸壳聚糖对MGC-803细胞周期的影响 | 第29页 |
| 2.2.8 罗丹明123染色检测细胞线粒体内跨膜电位的变化 | 第29-30页 |
| 2.2.9 细胞内活性氧含量的检测 | 第30-31页 |
| 2.2.10 SDS-PAGE比较MGC-803蛋白差异 | 第31-33页 |
| 2.2.11 免疫印迹法检测细胞相关凋亡蛋白变化 | 第33-35页 |
| 2.2.12 统计分析 | 第35-36页 |
| 3 结果与讨论 | 第36-54页 |
| 3.1 MGC-803细胞的滚瓶培养条件研究 | 第36-41页 |
| 3.1.1 培养液添加方式 | 第36页 |
| 3.1.2 转速范围 | 第36-37页 |
| 3.1.3 接种量 | 第37-38页 |
| 3.1.4 培养时间 | 第38-39页 |
| 3.1.5 培养液用量 | 第39页 |
| 3.1.6 正交法优化培养条件 | 第39-41页 |
| 3.2 硒酸壳聚糖对MGC-803抑制的活性(MTT) | 第41-42页 |
| 3.3 MGC-803细胞形态观察 | 第42-44页 |
| 3.3.1 转瓶细胞观察台观察硒酸壳聚糖对MGC-803的作用 | 第42-43页 |
| 3.3.2 扫描电镜观察硒酸壳聚糖对MGC-803的作用 | 第43-44页 |
| 3.4 Hoechst 33258单染检测MGC-803的凋亡作用 | 第44-45页 |
| 3.5 Annexin V-FITC/PI双染色检测MGC-803的凋亡作用 | 第45-46页 |
| 3.6 流式细胞术测定MGC-803细胞周期结果 | 第46-48页 |
| 3.7 罗丹明-123检测MGC-803细胞线粒体膜电位 | 第48-49页 |
| 3.8 细胞内活性氧含量的检测 | 第49-51页 |
| 3.9 电泳检测MGC-803的凋亡作用 | 第51页 |
| 3.10 免疫印迹检测MGC-803的凋亡作用 | 第51-54页 |
| 4 结论 | 第54-55页 |
| 5 展望 | 第55-56页 |
| 6 参考文献 | 第56-63页 |
| 7 攻读工程硕士学位期间发表论文情况 | 第63-64页 |
| 8 致谢 | 第64页 |
