| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 1 前言 | 第8-18页 |
| 1.1 肺癌概述 | 第8-9页 |
| 1.1.1 肺癌致病因素 | 第8-9页 |
| 1.1.2 肺癌治疗现状 | 第9页 |
| 1.2 细胞凋亡概述 | 第9-12页 |
| 1.2.1 内源性凋亡途径 | 第10页 |
| 1.2.2 外源性凋亡途径 | 第10-11页 |
| 1.2.3 内质网途径 | 第11-12页 |
| 1.2.4 细胞周期阻滞 | 第12页 |
| 1.3 硒化合物简介 | 第12-15页 |
| 1.3.1 硒化合物抗肿瘤活性 | 第13-14页 |
| 1.3.2 硒化合物抗氧化功能 | 第14页 |
| 1.3.3 硒化合物增强机体免疫力活性 | 第14页 |
| 1.3.4 硒蛋白 | 第14-15页 |
| 1.3.5 硒多糖 | 第15页 |
| 1.3.6 硒核酸 | 第15页 |
| 1.4 β-乳球蛋白 | 第15-16页 |
| 1.4.1 β-乳球蛋白概述 | 第15-16页 |
| 1.4.2 β-乳球蛋白功能及生物活性 | 第16页 |
| 1.5 本课题的研究目的及意义 | 第16-18页 |
| 2 材料和方法 | 第18-34页 |
| 2.1 实验材料 | 第18-20页 |
| 2.1.1 主要试剂 | 第18-19页 |
| 2.1.2 主要仪器设备 | 第19-20页 |
| 2.2 主要方法 | 第20-34页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第20-21页 |
| 2.2.2 MTT法检测亚硒酸化β-乳球蛋白对A549细胞增殖的影响 | 第21-22页 |
| 2.2.3 光学显微镜下观察亚硒酸化β-乳球蛋白对A549细胞形态学的影响 | 第22页 |
| 2.2.4 Hoechst 33342/PI双染检测亚硒酸化β-乳球蛋白对A549细胞的凋亡作用 | 第22-23页 |
| 2.2.5 Annexin V-FITC/PI双染检测亚硒酸化β-乳球蛋白对A549细胞的凋亡作用 | 第23-24页 |
| 2.2.6 流式细胞仪检测亚硒酸化β-乳球蛋白对A549细胞周期的影响 | 第24-25页 |
| 2.2.7 罗丹明-123检测亚硒酸化β-乳球蛋白对A549细胞线粒体膜电位的影响 | 第25-26页 |
| 2.2.8 亚硒酸化β-乳球蛋白诱导A549细胞线粒体膜通道孔的开放 | 第26页 |
| 2.2.9 流式细胞仪检测亚硒酸化β-乳球蛋白对A549细胞内活性氧检测 | 第26-27页 |
| 2.2.10 荧光定量PCR检测细胞相应蛋白mRNA表达水平变化 | 第27-29页 |
| 2.2.11 蛋白印记法(Western blot)检测凋亡蛋白表达情况 | 第29-33页 |
| 2.2.12 统计分析 | 第33-34页 |
| 3 结果与讨论 | 第34-50页 |
| 3.1 MTT法检测亚硒酸化β-乳球蛋白对A549细胞增殖作用的影响 | 第34-36页 |
| 3.2 倒置相差显微镜观察细胞形态学变化 | 第36-37页 |
| 3.3 Hoechst 33342/PI双染检测亚硒酸化β-乳球蛋白对A549细胞的凋亡作用 | 第37-38页 |
| 3.4 Annexin V-FITC/PI双染检测亚硒酸化β-乳球蛋白对A549细胞的凋亡作用 | 第38-40页 |
| 3.5 流式细胞仪检测亚硒酸化β-乳球蛋白对A549细胞周期的影响 | 第40-42页 |
| 3.6 罗丹明-123检测A549细胞线粒体跨膜电位的变化 | 第42-43页 |
| 3.7 亚硒酸化β-乳球蛋白诱导A549细胞线粒体膜通道孔的开放 | 第43-44页 |
| 3.8 流式细胞仪检测细胞内活性氧含量的变化 | 第44-46页 |
| 3.9 Real-time PCR检测蛋白mRNA表达水平的变化 | 第46-48页 |
| 3.9.1 RNA定量与纯度分析 | 第46页 |
| 3.9.2 亚硒酸化β-乳球蛋白对A549细胞mRNA表达水平的变化 | 第46-48页 |
| 3.10 蛋白免疫印迹检测亚硒酸化β-乳球蛋白对A549细胞内凋亡蛋白的影响 | 第48-50页 |
| 4 结论 | 第50-52页 |
| 5 展望 | 第52-53页 |
| 6 参考文献 | 第53-61页 |
| 7 攻读学位论文期间发表论文情况 | 第61-62页 |
| 8 致谢 | 第62页 |
