| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 第一章 绪论 | 第7-14页 |
| 1.1 糖生物学概况 | 第7-10页 |
| 1.1.1 糖生物学 | 第7页 |
| 1.1.2 糖蛋白 | 第7-8页 |
| 1.1.3 蛋白的N-糖基化修饰 | 第8-10页 |
| 1.2 糖蛋白的内切糖苷酶 | 第10-12页 |
| 1.2.1 糖苷酶 | 第10页 |
| 1.2.2 Endo酶及应用 | 第10-12页 |
| 1.3 立题依据以及研究内容 | 第12-14页 |
| 第二章 材料与方法 | 第14-23页 |
| 2.1 材料 | 第14-17页 |
| 2.1.1 菌株，质粒和引物 | 第14页 |
| 2.1.2 培养基与抗生素 | 第14-15页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第15-16页 |
| 2.1.4 酶及化学试剂 | 第16-17页 |
| 2.1.5 主要仪器及设备 | 第17页 |
| 2.2 方法 | 第17-23页 |
| 2.2.1 引物设计 | 第17-18页 |
| 2.2.2 基因克隆 | 第18页 |
| 2.2.3 链霉菌总DNA基因提取 | 第18-19页 |
| 2.2.4 质粒提取 | 第19页 |
| 2.2.5 酶切 | 第19页 |
| 2.2.6 酶切产物纯化 | 第19页 |
| 2.2.7 JM109感受态细胞的制备 | 第19页 |
| 2.2.8 转化 | 第19-20页 |
| 2.2.9 重组质粒快速检测（Cracking） | 第20页 |
| 2.2.10 蛋白纯化 | 第20页 |
| 2.2.11 SDS-PAGE电泳 | 第20页 |
| 2.2.12 考马斯亮蓝染色及脱色 | 第20页 |
| 2.2.13 EndoH分析核糖核酸酶B（RNase B）的糖基化修饰 | 第20-21页 |
| 2.2.14 酶学性质分析 | 第21页 |
| 2.2.15 细胞复苏和培养 | 第21页 |
| 2.2.16 蛋白提取 | 第21-22页 |
| 2.2.17 糖蛋白N-糖链的释放、除盐及质谱分析 | 第22-23页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第23-39页 |
| 3.1 内切 β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶H（EndoH）的异源表达 | 第23-26页 |
| 3.1.1 重组表达质粒pMA0911.1-endoH的构建 | 第23页 |
| 3.1.2 重组表达质粒pMA0911.1-endoH验证 | 第23-24页 |
| 3.1.3 EndoH在枯草芽孢杆菌WB600中表达 | 第24-25页 |
| 3.1.4 重组EndoH的纯化 | 第25-26页 |
| 3.1.5 实验小结 | 第26页 |
| 3.2 阿维链霉菌来源EndoH酶学性质分析 | 第26-32页 |
| 3.2.1 重组EndoH酶活的分析 | 第26-27页 |
| 3.2.2 重组EndoH酶学性质分析 | 第27-32页 |
| 3.2.3 实验小结 | 第32页 |
| 3.3 阿维链霉菌来源的EndoH在糖组学中的应用 | 第32-37页 |
| 3.3.1 重组EndoH在对鸡卵清蛋白（OVA）糖链分析中的应用 | 第32-34页 |
| 3.3.2 重组EndoH在对人乳腺癌血清蛋白中糖链结构分析的组学研究 | 第34-36页 |
| 3.3.3 重组EndoH对人表面癌细胞A431蛋白糖链结构的研究应用 | 第36-37页 |
| 3.4 实验小结 | 第37-39页 |
| 主要结论与展望 | 第39-41页 |
| 主要结论 | 第39页 |
| 展望 | 第39-41页 |
| 致谢 | 第41-43页 |
| 参考文献 | 第43-47页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第47页 |
