| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 第一章 绪论 | 第7-15页 |
| 1.1 果聚糖概述 | 第7-9页 |
| 1.1.1 果聚糖简介 | 第7页 |
| 1.1.2 Levan果聚糖概述 | 第7页 |
| 1.1.3 Levan果聚糖功能与应用 | 第7-9页 |
| 1.1.4 Levan果聚糖的来源 | 第9页 |
| 1.2 果聚糖蔗糖酶概述 | 第9-11页 |
| 1.2.1 果聚糖蔗糖酶简介 | 第9-10页 |
| 1.2.2 果聚糖蔗糖酶催化原理 | 第10-11页 |
| 1.2.3 果聚糖蔗糖酶的微生物来源 | 第11页 |
| 1.3 果聚糖蔗糖酶催化合成levan果聚糖 | 第11-13页 |
| 1.3.1 温度对合成levan的影响 | 第11-12页 |
| 1.3.2 蔗糖浓度对合成levan的影响 | 第12页 |
| 1.3.3 离子强度对合成levan的影响 | 第12-13页 |
| 1.4 论文的立题意义及主要研究内容 | 第13-15页 |
| 1.4.1 论文立题意义 | 第13-14页 |
| 1.4.2 研究内容 | 第14-15页 |
| 第二章 材料与方法 | 第15-23页 |
| 2.1 实验材料 | 第15-16页 |
| 2.1.1 菌株与质粒 | 第15页 |
| 2.1.2 培养基和溶液 | 第15-16页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第16页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第16页 |
| 2.2 实验方法 | 第16-23页 |
| 2.2.1 大肠杆菌感受态细胞制备 | 第16-17页 |
| 2.2.2 质粒转化 | 第17页 |
| 2.2.3 Bacillus amyloliquefaciens H47基因组DNA的提取 | 第17页 |
| 2.2.4 目的基因lsase的克隆与重组载体的构建 | 第17-19页 |
| 2.2.5 重组菌的诱导表达 | 第19页 |
| 2.2.6 重组蛋白LSase的纯化 | 第19页 |
| 2.2.7 蛋白质含量的测定 | 第19-20页 |
| 2.2.8 果聚糖蔗糖酶酶活测定 | 第20-21页 |
| 2.2.9 重组LSase酶学性质的研究 | 第21页 |
| 2.2.10 多糖的纯化 | 第21页 |
| 2.2.11 单糖分析 | 第21-22页 |
| 2.2.12 傅里叶红外光谱分析 | 第22页 |
| 2.2.13 GPC分析levan分子量 | 第22页 |
| 2.2.14 不同条件对合成levan的影响 | 第22-23页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第23-39页 |
| 3.1 果聚糖蔗糖酶基因的克隆与表达 | 第23-27页 |
| 3.1.1 lsase基因序列和氨基酸序列分析 | 第23页 |
| 3.1.2 lsase基因的克隆 | 第23页 |
| 3.1.3 重组载体p ET28a-lsase的构建 | 第23-24页 |
| 3.1.4 LSase的氨基酸序列分析 | 第24-25页 |
| 3.1.5 重组菌的诱导表达 | 第25-26页 |
| 3.1.6 LSase表达条件的优化 | 第26-27页 |
| 3.2 重组酶LSase的纯化及酶学性质研究 | 第27-32页 |
| 3.2.1 重组蛋白LSase的纯化 | 第27-28页 |
| 3.2.2 温度对重组LSase酶活的影响 | 第28-30页 |
| 3.2.3 pH对重组酶LSase酶活的影响 | 第30-31页 |
| 3.2.4 金属离子对LSase酶活的影响 | 第31-32页 |
| 3.2.5 LSase的动力学参数 | 第32页 |
| 3.3 重组LSase合成levan的分析 | 第32-35页 |
| 3.3.1 傅里叶红外光谱分析 | 第32-33页 |
| 3.3.2 单糖组成分析 | 第33-34页 |
| 3.3.3 levan分子量的分析 | 第34-35页 |
| 3.4 反应条件对levan的影响 | 第35-39页 |
| 3.4.1 底物浓度对合成levan的影响 | 第35-36页 |
| 3.4.2 pH对合成levan的影响 | 第36-37页 |
| 3.4.3 温度对合成levan的影响 | 第37页 |
| 3.4.4 加酶量对合成levan的影响 | 第37-39页 |
| 主要结论与展望 | 第39-40页 |
| 主要结论 | 第39页 |
| 展望 | 第39-40页 |
| 致谢 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-45页 |
| 附录1：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第45-46页 |
| 附录2：基因序列 | 第46页 |
