| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 第一章 前言 | 第9-16页 |
| 1.1 动脉粥样硬化发病机理 | 第9-10页 |
| 1.2 LOX-1 在动脉粥样硬化的发病过程中的作用 | 第10-15页 |
| 1.2.1 LOX-1 的简介 | 第11-12页 |
| 1.2.2 LOX-1 与动脉粥样硬化早期 | 第12-13页 |
| 1.2.3 LOX-1 对巨噬细胞泡沫化的影响 | 第13-14页 |
| 1.2.4 LOX-1 与动脉血栓之间的关系 | 第14-15页 |
| 1.3 结语 | 第15-16页 |
| 第二章 实验材料与仪器 | 第16-19页 |
| 2.1 材料 | 第16-17页 |
| 2.1.1 细胞株 | 第16页 |
| 2.1.2 质粒 | 第16页 |
| 2.1.3 培养基 | 第16-17页 |
| 2.1.4 主要试剂和工具酶 | 第17页 |
| 2.2 主要仪器 | 第17-19页 |
| 第三章 实验方法 | 第19-37页 |
| 3.1 细胞复苏培养与冻存 | 第19-20页 |
| 3.1.1 J774a.1 细胞的培养 | 第19-20页 |
| 3.1.2 293T细胞的培养 | 第20页 |
| 3.2 psiCHECK~(TM)2-LOX-1 重组载体的构建 | 第20-27页 |
| 3.2.1 LOX-1 基因的调取 | 第20-23页 |
| 3.2.2 psiCHECK~（TM）2-LOX-1 重组载体的构建 | 第23-27页 |
| 3.3 LOX1shRNA—慢病毒载体构建 | 第27-29页 |
| 3.3.1 shRNA的合成 | 第27页 |
| 3.3.2 LOX1shRNA—慢病毒载体的构建 | 第27-28页 |
| 3.3.3 双荧光素酶报告基因筛选有效shRNA | 第28-29页 |
| 3.4 LOX-1 基因沉默慢病毒的包装 | 第29-31页 |
| 3.4.1 慢病毒的包装 | 第29-30页 |
| 3.4.2 LOX-1 基因沉默慢病毒的浓缩纯化 | 第30页 |
| 3.4.3 LOX-1 沉默慢病毒的滴度测定 | 第30-31页 |
| 3.5 J774a.1-LOX-1 基因稳定沉默细胞株的建立 | 第31-32页 |
| 3.5.1 测定puro抗性对J774a.1 细胞的有效致死浓度 | 第31页 |
| 3.5.2 基因沉默慢病毒对J774a.1 细胞的侵染及稳转细胞株的筛选 | 第31-32页 |
| 3.6 LOX-1 基因沉默效果的检测 | 第32-37页 |
| 3.6.1 沉默细胞中LOX-1 的mRNA表达量的检测 | 第32-34页 |
| 3.6.2 Western-blot检测基因沉默效果 | 第34-37页 |
| 第四章 结果与讨论 | 第37-44页 |
| 4.1 Total RNA纯度分析 | 第37页 |
| 4.2 LOX-1 基因片段的获得 | 第37-38页 |
| 4.3 菌落PCR及双酶切方法鉴定目的基因与T载体连接情况 | 第38-39页 |
| 4.4 psiCHECK2-LOX-1 的PCR及双酶切鉴定 | 第39-40页 |
| 4.5 LOX-1 的shRNA序列设计及筛选 | 第40-41页 |
| 4.5.1 LOX-1 的shRNA序列设计 | 第40页 |
| 4.5.2 LOX-1 的shRNA序列的筛选 | 第40-41页 |
| 4.6 LOX-1 沉默慢病毒包装的滴度测定 | 第41页 |
| 4.7 RT-PCR检测LOX-1 的沉默效果 | 第41-42页 |
| 4.8 Western blot检测LOX-1 蛋白表达量 | 第42-43页 |
| 4.9 结论 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-49页 |
| 作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第49-50页 |
| 致谢 | 第50页 |
