| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5页 |
| 1 前言 | 第8-14页 |
| 1.1 兽疫链球菌 | 第8页 |
| 1.2 兽疫链球菌发酵生产透明质酸 | 第8-10页 |
| 1.2.1 透明质酸的性质 | 第8-9页 |
| 1.2.2 透明质酸的用途 | 第9-10页 |
| 1.3 透明质酸的生产方法 | 第10页 |
| 1.3.1 动物组织提取法 | 第10页 |
| 1.3.2 微生物发酵法 | 第10页 |
| 1.4 兽疫链球菌发酵产透明质酸 | 第10-12页 |
| 1.4.1 兽疫链球菌中HA的合成途径 | 第10-11页 |
| 1.4.2 微生物发醇生产HA的现状 | 第11页 |
| 1.4.3 发酵模式 | 第11页 |
| 1.4.4 透明质酸裂解酶 | 第11-12页 |
| 1.4.5 蔗糖诱导表达系统 | 第12页 |
| 1.4.6 信号肽序列 | 第12页 |
| 1.5 论文研究的内容、意义 | 第12-14页 |
| 1.5.1 论文研究的内容 | 第12-13页 |
| 1.5.2 论文研究的意义 | 第13-14页 |
| 2 材料与方法 | 第14-43页 |
| 2.1 实验材料 | 第14-19页 |
| 2.1.1 菌种及质粒 | 第14页 |
| 2.1.2 工具酶、抗生素和相关试剂 | 第14-16页 |
| 2.1.3 主要仪器和设备 | 第16-17页 |
| 2.1.4 培养基和主要溶液 | 第17-19页 |
| 2.2 实验方法 | 第19-43页 |
| 2.2.1 载体pLH243的介绍 | 第19页 |
| 2.2.2 诱导表达载体的构建 | 第19-35页 |
| 2.2.3 诱导表达菌株的筛选 | 第35-37页 |
| 2.2.4 透明质酸裂解酶的诱导表达、纯化 | 第37-38页 |
| 2.2.5 兽疫链球菌发酵过程分析 | 第38-43页 |
| 3 结果与讨论 | 第43-64页 |
| 3.1 构建兽疫链球菌内稳定复制的质粒pLH256 | 第43-45页 |
| 3.2 诱导表达质粒的构建 | 第45-52页 |
| 3.2.1 质粒pLH268(pLH256::S_(amyA)::hylA)的构建 | 第45-48页 |
| 3.2.2 质粒pLH278(pLH256::S_(amyA)::hylB)的构建 | 第48-50页 |
| 3.2.3 质粒pLH279(pLH256::S_(hylB)::hylB)的构建 | 第50-52页 |
| 3.3 诱导表达菌株的构建流程 | 第52-54页 |
| 3.3.1 菌株S218的构建 | 第52-53页 |
| 3.3.2 菌株S239的构建 | 第53页 |
| 3.3.3 菌株S240的构建 | 第53-54页 |
| 3.4 兽疫链球菌诱导表达系统分析 | 第54-64页 |
| 3.4.1 透明质酸裂解酶的表达分泌分析 | 第54-55页 |
| 3.4.2 可控两步法发酵代谢产物分析 | 第55-59页 |
| 3.4.3 发酵优化 | 第59-64页 |
| 4 结论 | 第64-65页 |
| 5 展望 | 第65-66页 |
| 6 参考文献 | 第66-72页 |
| 7 攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第72-73页 |
| 8 致谢 | 第73页 |
