致谢 | 第6-7页 |
摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
主要缩略词 | 第13-17页 |
第一章 绪论 | 第17-31页 |
1.1 茶与癌症 | 第17-25页 |
1.1.1 流行病学调查 | 第17-20页 |
1.1.2 茶多酚(EGCG)抗癌作用的体内外研究 | 第20-24页 |
1.1.3 茶多酚(EGCG)抗癌机理研究 | 第24-25页 |
1.2 MDSCs与肿瘤免疫逃逸 | 第25-28页 |
1.2.1 MDSCs与免疫抑制 | 第25-26页 |
1.2.2 MDSCs在肿瘤免疫治疗中的应用 | 第26-28页 |
1.3 茶多酚(EGCG)与MDSCs | 第28-29页 |
1.4 本论文研究内容与技术路线 | 第29-31页 |
1.4.1 研究内容 | 第29-30页 |
1.4.2 技术路线 | 第30-31页 |
第二章 EGCG对小鼠4T1乳腺癌细胞的体外抑制作用 | 第31-44页 |
2.1 引言 | 第31页 |
2.2 实验材料与仪器 | 第31-32页 |
2.2.1 实验试剂与配制 | 第31页 |
2.2.2 实验仪器 | 第31-32页 |
2.3 实验方法 | 第32-34页 |
2.3.1 EGCG纯度分析 | 第32页 |
2.3.2 小鼠4T1乳腺癌细胞培养 | 第32-34页 |
2.3.3 数据处理 | 第34页 |
2.4 结果与分析 | 第34-43页 |
2.4.1 EGCG纯度分析 | 第34-36页 |
2.4.2 EGCG处理后4T1细胞的形态学观察 | 第36-38页 |
2.4.3 EGCG对4T1细胞增殖的影响 | 第38-39页 |
2.4.4 EGCG对4T1细胞侵袭能力的影响 | 第39-40页 |
2.4.5 EGCG对4T1细胞迁徙能力的影响 | 第40-42页 |
2.4.6 EGCG对4T1细胞凋亡的影响 | 第42-43页 |
2.5 本章小结 | 第43-44页 |
第三章 EGCG对乳腺癌小鼠体内免疫抑制状态的影响 | 第44-62页 |
3.1 引言 | 第44页 |
3.2 实验材料与仪器 | 第44-45页 |
3.2.1 实验动物 | 第44页 |
3.2.2 实验试剂 | 第44-45页 |
3.2.3 实验仪器与耗材 | 第45页 |
3.3 实验方法 | 第45-49页 |
3.3.1 细胞复苏 | 第45页 |
3.3.2 细胞培养及传代 | 第45页 |
3.3.3 细胞冻存 | 第45-46页 |
3.3.4 EGCG处理 | 第46页 |
3.3.5 4T1小鼠肿瘤模型建立 | 第46页 |
3.3.6 小鼠肿瘤、外周血、脾脏细胞悬液制备 | 第46-47页 |
3.3.7 流式细胞术 | 第47页 |
3.3.8 免疫荧光 | 第47页 |
3.3.9 RNA提取 | 第47-48页 |
3.3.10 RNA反转录 | 第48页 |
3.3.11 荧光定量PCR | 第48-49页 |
3.3.12 数据分析 | 第49页 |
3.4 结果与分析 | 第49-60页 |
3.4.1 EGCG处理对乳腺癌小鼠肿瘤和脾脏影响 | 第49-50页 |
3.4.2 EGCG处理对乳腺癌小鼠体内MDSCs的影响 | 第50-55页 |
3.4.3 EGCG处理对小鼠体内CD4~+T和CD8~+T细胞的影响 | 第55-58页 |
3.4.4 EGCG对小鼠脾脏Treg、Arg-1和NOS的影响 | 第58-59页 |
3.4.5 肿瘤组织免疫荧光分析 | 第59-60页 |
3.5 本章小结 | 第60-62页 |
第四章 EGCG对乳腺癌诱导的MDSCs关键效应因子的影响 | 第62-75页 |
4.1 引言 | 第62页 |
4.2 实验材料与仪器 | 第62-63页 |
4.2.1 实验试剂 | 第62页 |
4.2.2 实验仪器与耗材 | 第62-63页 |
4.3 实验方法 | 第63-66页 |
4.3.1 4T1小鼠肿瘤模型建立 | 第63页 |
4.3.2 脾脏MDSC分选 | 第63页 |
4.3.3 细胞周期检测 | 第63页 |
4.3.4 Annexin V-FITC/PI检测细胞凋亡 | 第63-64页 |
4.3.5 RNA提取 | 第64页 |
4.3.6 RNA反转录 | 第64页 |
4.3.7 荧光定量PCR | 第64-66页 |
4.3.8 精氨酸酶酶活检测 | 第66页 |
4.3.9 统计学分析 | 第66页 |
4.4 结果与分析 | 第66-74页 |
4.4.1 EGCG对MDSCs的诱导凋亡能力 | 第66-68页 |
4.4.2 EGCG对MDSCs细胞周期的影响 | 第68-69页 |
4.4.3 EGCG对Arg-1和iNOS活性的抑制作用 | 第69-70页 |
4.4.4 EGCG对MDSCs免疫抑制关键效应分子的影响 | 第70-74页 |
4.5 本章小结 | 第74-75页 |
第五章 讨论与总结 | 第75-78页 |
参考文献 | 第78-87页 |