| 致谢 | 第7-8页 |
| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 缩略词 | 第11-15页 |
| 1 文献综述 | 第15-27页 |
| 1.1 卵巢癌概况 | 第15-16页 |
| 1.2 卵巢癌铂类药物耐药机制 | 第16-22页 |
| 1.2.1 铂类药物研究历史介绍 | 第16页 |
| 1.2.2 临床铂类耐药定义 | 第16-17页 |
| 1.2.3 顺铂作用靶点 | 第17页 |
| 1.2.4 降低细胞内活性铂分子浓度从而增加细胞耐药性 | 第17-18页 |
| 1.2.5 铂-DNA加合物的识别 | 第18页 |
| 1.2.6 损伤信号传导 | 第18-20页 |
| 1.2.7 损伤后修复 | 第20页 |
| 1.2.8 修复不充分也不诱导死亡 | 第20-21页 |
| 1.2.9 细胞周期阻滞,物质能量代谢,生长因子等 | 第21页 |
| 1.2.10 肿瘤微环境 | 第21-22页 |
| 1.3 原发肿瘤中存在抗性强的个体 | 第22-23页 |
| 1.4 原发和继发耐药机制 | 第23页 |
| 1.5 铂类耐药患者的治疗策略 | 第23-24页 |
| 1.6 基因间长非编码RNA | 第24-27页 |
| 1.6.1 长非编码分类介绍 | 第24页 |
| 1.6.2 基因间长非编码RNA功能 | 第24-25页 |
| 1.6.3 参与DNA损伤反应的基因间长非编码RNA | 第25页 |
| 1.6.4 卵巢癌铂耐药相关基因间长非编码RNA | 第25页 |
| 1.6.5 H19 | 第25-27页 |
| 2 卵巢癌顺铂耐药细胞株A2780-DR建立与评估 | 第27-35页 |
| 2.1 引言 | 第27-28页 |
| 2.2 材料与方法 | 第28-30页 |
| 2.2.1 主要仪器和试剂耗材 | 第28页 |
| 2.2.2 细胞系 | 第28页 |
| 2.2.3 培养基和培养条件 | 第28页 |
| 2.2.4 细胞复苏、传代培养和保存 | 第28页 |
| 2.2.5 单克隆细胞株筛选 | 第28-29页 |
| 2.2.6 耐药细胞株建立 | 第29页 |
| 2.2.7 克隆形成率实验 | 第29页 |
| 2.2.8 统计分析方法 | 第29-30页 |
| 2.3 结果与分析 | 第30-34页 |
| 2.3.1 A2780-DR耐药细胞株建立与评估 | 第30-33页 |
| 2.3.2 A2780-DR耐药能力的稳定性评估 | 第33-34页 |
| 2.4 讨论与小结 | 第34-35页 |
| 3 基于转录组测序筛选顺铂耐药相关lincRNAs | 第35-52页 |
| 3.1 引言 | 第35-36页 |
| 3.2 材料与方法 | 第36-40页 |
| 3.2.1 主要仪器和试剂耗材 | 第36页 |
| 3.2.2 细胞总RNA提取和高通量测序 | 第36-38页 |
| 3.2.3 转录组测序数据分析和基因间长非编码RNA筛选 | 第38页 |
| 3.2.4 患者和样本信息 | 第38页 |
| 3.2.5 总RNA提取,反转录和荧光定量PCR检测 | 第38-39页 |
| 3.2.6 统计分析方法 | 第39-40页 |
| 3.3 结果与分析 | 第40-51页 |
| 3.3.1 转录组测序与差异lincRNAs分析 | 第40-44页 |
| 3.3.2 差异lincRNAs基因组可视化工具分析 | 第44-47页 |
| 3.3.3 基于细胞样本的差异lincRNAs验证 | 第47-49页 |
| 3.3.4 基于组织样本的差异lincRNAs检测 | 第49-51页 |
| 3.4 讨论与小结 | 第51-52页 |
| 4 H19参与卵巢癌顺铂耐药机制研究 | 第52-78页 |
| 4.1 引言 | 第52-53页 |
| 4.2 材料与方法 | 第53-58页 |
| 4.2.1 主要仪器和试剂耗材 | 第53页 |
| 4.2.2 H19突变分析 | 第53-55页 |
| 4.2.3 顺铂处理不同时间下H19表达量检测 | 第55页 |
| 4.2.4 慢病毒介导H19沉默 | 第55-56页 |
| 4.2.5 裸鼠实验 | 第56页 |
| 4.2.6 蛋白处理及非标记蛋白质组检测 | 第56-57页 |
| 4.2.7 Western-blot验证 | 第57页 |
| 4.2.8 GSH检测 | 第57页 |
| 4.2.9 统计分析方法 | 第57-58页 |
| 4.3 结果与分析 | 第58-76页 |
| 4.3.1 H19过表达参与顺铂耐药机制 | 第58-62页 |
| 4.3.2 裸鼠实验 | 第62-64页 |
| 4.3.3 H19通过调节谷胱甘肽代谢途径参与顺铂耐药 | 第64-76页 |
| 4.4 讨论与小结 | 第76-78页 |
| 5 总结与展望 | 第78-80页 |
| 参考文献 | 第80-92页 |
| 附录 | 第92-122页 |
| 博士期间发表论文 | 第122页 |
