| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 缩略词表 | 第7-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-18页 |
| 1 鹅细小病毒概述 | 第10-15页 |
| 1.1 鹅细小病毒的发现及归类 | 第10-11页 |
| 1.2 鹅细小病毒的特征 | 第11-12页 |
| 1.3 鹅细小病毒基因组及其编码的蛋白 | 第12-15页 |
| 2 禽类基因疫苗研究进展 | 第15-17页 |
| 2.1 禽类基因疫苗 | 第15-16页 |
| 2.2 佐剂的应用 | 第16-17页 |
| 3 本研究的目的与意义 | 第17-18页 |
| 第二章 鹅细小病毒衣壳蛋白VP1、VP2和VP3真核表达载体的构建及表达 | 第18-40页 |
| 1 实验材料 | 第18-20页 |
| 1.1 实验动物 | 第18页 |
| 1.2 毒株,菌种和质粒 | 第18页 |
| 1.3 实验仪器 | 第18-19页 |
| 1.4 实验试剂及相关溶液配制 | 第19-20页 |
| 2 实验方法 | 第20-30页 |
| 2.1 GPV VP1/VP2/VP3目的片段的扩增 | 第20-23页 |
| 2.2 重组表达质粒的构建 | 第23-26页 |
| 2.3 GPV的鼠多克隆抗体制备 | 第26-27页 |
| 2.4 pcDNA3.1-VP1,pcDNA3.1-VP2和pcDNA3.1-VP3在细胞中的表达及验证 | 第27-30页 |
| 3 实验结果 | 第30-37页 |
| 3.1 目的基因的扩增 | 第30-32页 |
| 3.2 重组表达质粒的构建 | 第32-34页 |
| 3.3 重组质粒在293T细胞中的表达 | 第34-35页 |
| 3.4 重组质粒在鹅胚成纤维细胞中的表达 | 第35-37页 |
| 4 讨论 | 第37-39页 |
| 4.1 重组质粒的构建策略 | 第37页 |
| 4.2 细胞的培养 | 第37-38页 |
| 4.3 细胞转染 | 第38-39页 |
| 5 小结 | 第39-40页 |
| 第三章 VPs在不同细胞模型中诱导的免疫应答比较 | 第40-50页 |
| 1 实验材料 | 第40-41页 |
| 1.1 实验动物 | 第40页 |
| 1.2 实验仪器 | 第40-41页 |
| 1.3 实验试剂 | 第41页 |
| 2 实验方法 | 第41-45页 |
| 2.1 pcDNA3.1-VP1、pcDNA3.1-VP2、pcDNA3.1-VP3和pcDNA3.1转染鹅胚成纤维细胞的免疫应答检测 | 第41-43页 |
| 2.2 VPs处理鹅外周血单核细胞的免疫应答检测 | 第43-44页 |
| 2.3 VP2病毒样颗粒的纯化与鉴定 | 第44-45页 |
| 3 结果 | 第45-48页 |
| 3.1 pcDNA3.1-VP1、pcDNA3.1-VP2、pcDNA3.1-VP3和pcDNA3.1转染鹅胚成纤维细胞的免疫应答检测 | 第45-46页 |
| 3.2 VPs处理鹅外周血单核细胞的免疫应答检测 | 第46-48页 |
| 3.3 VP2病毒样颗粒的电镜观察 | 第48页 |
| 4 讨论 | 第48-49页 |
| 5 小结 | 第49-50页 |
| 第四章 MPLA和ODN2006作为VP2基因疫苗佐剂诱导的免疫应答 | 第50-59页 |
| 1 实验材料 | 第50-51页 |
| 1.1 实验动物 | 第50-51页 |
| 1.2 实验仪器 | 第51页 |
| 1.3 实验试剂 | 第51页 |
| 2 试验方法 | 第51-54页 |
| 2.1 基因疫苗的大量制备 | 第51页 |
| 2.2 实验动物的分组及免疫 | 第51-52页 |
| 2.3 血样的采集和处理 | 第52页 |
| 2.4 鹅血液细胞因子变化量检测 | 第52-53页 |
| 2.5 特异性GPV血清IgY抗体的间接ELISA测定 | 第53-54页 |
| 3 结果 | 第54-57页 |
| 3.1 鹅血液细胞因子变化量检测 | 第54-56页 |
| 3.2 特异性GPV血清IgY抗体的变化 | 第56-57页 |
| 4 讨论 | 第57-58页 |
| 4.1 雏鹅免疫后血液细胞因子的转录水平变化 | 第57页 |
| 4.2 雏鹅免疫后血清IgY抗体的变化 | 第57-58页 |
| 5 小结 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 作者简介及论文发表情况 | 第65页 |
