| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 目录 | 第9-11页 |
| 第一部分 绪论 | 第11-24页 |
| ·多倍体水稻的研究概况 | 第11-13页 |
| ·水稻胚乳中淀粉的组成 | 第13页 |
| ·颗粒结合淀粉合成酶(GBSS) | 第13-14页 |
| ·Wx基因的研究进展 | 第14-20页 |
| ·Wx基因的简介 | 第14页 |
| ·稻米中的Wx基因的结构 | 第14-15页 |
| ·Wx基因的等位基因 | 第15-18页 |
| ·Wx基因的分子进化树 | 第18-20页 |
| ·实时荧光定量PCR(Real-time quantitative PCR)技术 | 第20-22页 |
| ·实时荧光定量PCR技术的原理 | 第20-21页 |
| ·非特异性的实时荧光定量PCR | 第21页 |
| ·以参照基因作为标准进行相对定量 | 第21-22页 |
| ·转基因技术及应用 | 第22-23页 |
| ·研究目的和意义 | 第23-24页 |
| 第二部分 材料与方法 | 第24-39页 |
| ·实验材料及试剂 | 第24-26页 |
| ·水稻材料 | 第24页 |
| ·菌株及载体 | 第24页 |
| ·主要实验试剂 | 第24-25页 |
| ·培养基 | 第25页 |
| ·SDS-PAGE胶的配制 | 第25-26页 |
| ·实验方法 | 第26-34页 |
| ·取材 | 第26页 |
| ·RNA的分离纯化 | 第26-27页 |
| ·cDNA第一条链的合成(TaKaRa PimeScriptTM RT-PCR Kit) | 第27-28页 |
| ·Real time-PCR | 第28-29页 |
| ·对Wx基因的研究 | 第29-34页 |
| ·预测Wx基因的RNA二级结构及蛋白质三维结构 | 第34页 |
| ·预测Wx基因的RNA二级结构 | 第34页 |
| ·查找Wx基因开放阅读框(ORF) | 第34页 |
| ·预测Wx蛋白 | 第34页 |
| ·Wx基因在大肠杆菌(E.coli BL21(DE3)plysS)中表达 | 第34-39页 |
| ·扩增带相应酶切位点的Wx基因 | 第34-35页 |
| ·pET-23a空载 | 第35-36页 |
| ·分别酶切纯化pMD18-T-Wx质粒和pET-23a质粒 | 第36页 |
| ·纯化后的带有酶切位点的Wx连接pET23a | 第36-37页 |
| ·pET-23a-PFx 转化大肠杆菌（E. coli BL21 (DE3)plysS )感受态细胞 | 第37-39页 |
| 第三部分 结果与分析 | 第39-54页 |
| ·水稻品种胚乳Wx基因在不同时期的表达差异 | 第39-41页 |
| ·HN2026品系与日本晴胚乳淀粉含量比较 | 第39页 |
| ·Real time-PCR | 第39-41页 |
| ·HN2026-T胚乳Wx基因的研究 | 第41-52页 |
| ·测定(CT)_n和第1内含子(GT) | 第41-43页 |
| ·克隆HN2026-T胚乳Wx基因 | 第43页 |
| ·测序结果 | 第43-47页 |
| ·HN2026-T和日本晴Wx基因的5’端mRNA二级结构比较 | 第47-48页 |
| ·HN2026-T的Wx蛋白三维立体结构预测 | 第48-50页 |
| ·HN2026-T的Wx基因在大肠杆菌(E.coli BL21(DE3)plysS)中表达 | 第50-52页 |
| ·Wx基因表达载体的遗传转化 | 第52-54页 |
| ·克隆日本晴-2X胚乳Wx基因 | 第52页 |
| ·pCambial305.1-Wx_日表达载体的构建 | 第52-54页 |
| 第四部分 讨论 | 第54-57页 |
| ·HN2026-T胚乳Wx基因的序列分析 | 第54页 |
| ·HN2026-T的Wx基因转录翻译分析 | 第54-55页 |
| ·HN2026品系 | 第55页 |
| ·工作展望 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-64页 |
| 致谢 | 第64页 |
