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冷胁迫下铁皮石斛转录组及Ty1-copia类反转录转座子表达分析

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-10页
引言第10-11页
第一章 文献综述第11-22页
   ·植物抗寒性研究进展第11-15页
     ·冷胁迫信号传导第11-12页
     ·植物抗寒转录调节第12-15页
       ·ICE1-CBF 转录级联反应第12-13页
       ·CBF 调控因子的负调控第13-14页
       ·非 CBF 依赖型调控因子第14-15页
     ·植物抗寒性转录后调节第15页
       ·mRNA 的修饰第15页
       ·小 RNAs 在植物胁迫反应中的潜在功能第15页
   ·高通量测序技术及其在药用植物转录组学中的应用第15-17页
     ·高通量测序技术的特点第15-17页
     ·RNA‐Seq 技术在药用植物研究中的应用第17页
   ·反转录转座子第17-20页
     ·反转录转座子的概念及类型第17-18页
     ·反转录转座子的特性第18-19页
       ·反转录转座子在基因组中广泛分布第18页
       ·反转录转座子的高拷贝性第18页
       ·反转录转座子的高度异质性第18-19页
       ·反转录转座子的纵向传递和横向传递第19页
     ·反转录转座子在基因组中的作用第19页
     ·反转录转座子的转录活性第19-20页
   ·铁皮石斛抗寒性研究现状第20-21页
   ·论文研究内容及意义第21-22页
第二章 冷诱导后铁皮石斛转录组特征分析第22-35页
   ·材料和方法第22-24页
     ·试验材料第22页
     ·材料处理及 RNA 提取第22页
     ·cDNA 的合成与转录组测序第22-23页
     ·序列过滤及组装第23页
     ·Unigene 功能注释和 GO 分类第23-24页
     ·转录组序列 SSR 分析第24页
     ·转录组序列 SNP 分析第24页
     ·对冷胁迫条件下转录组转座子(TEs)丰度的评估第24页
   ·结果与分析第24-33页
     ·RNA 提取与质量检测第24-25页
     ·转录组测序(mRNA‐seq)产量及序列组装第25-28页
     ·转录组 unigege 的功能注释第28-32页
       ·转录组的功能注释第29-30页
       ·转录组的功能分类第30-31页
       ·转录组代谢途径分析第31-32页
     ·转录组数据中 SSR 的分布特征第32-33页
     ·转录组数据 SNP 分析第33页
     ·转录组中转座子评估第33页
   ·讨论第33-35页
第三章 铁皮石斛冷胁迫下差异表达基因的分析第35-52页
   ·材料和方法第35-37页
     ·试验材料第35页
     ·材料处理及 RNA 提取第35页
     ·cDNA 合成、文库制备及测序第35页
     ·原始数据处理第35-36页
     ·读段定位第36页
     ·差异表达基因第36-37页
     ·基因表达模式聚类分析及 GO 分类第37页
     ·差异表达基因的代谢途径分析第37页
   ·结果与分析第37-50页
     ·RNA 提取与质量检测第37页
     ·数字表达谱测序质量评估第37-41页
     ·测序读段与转录组基因的比对分析第41-42页
     ·不同样品间差异表达基因的数目统计第42-46页
     ·铁皮石斛表达谱 GO 分类第46-48页
     ·表达谱 Pathway 注释第48页
     ·不同样品中转座子的表达情况第48-50页
   ·讨论第50-52页
第四章 铁皮石斛 Ty1-copia 类反转录转座子反转录酶(RT)序列的克隆与分析第52-60页
   ·材料与方法第52-53页
     ·试验材料及试剂第52-53页
     ·方法第53页
       ·铁皮石斛 DNA 的提取第53页
       ·反转录酶序列的 PCR 扩增第53页
       ·PCR 产物回收、克隆及测序第53页
       ·反转录酶序列分析第53页
   ·结果与分析第53-59页
     ·反转录酶(RT)序列 PCR 扩增及测序第53-54页
     ·Ty1‐copia 类反转录酶的异质性及序列分析第54-58页
       ·Ty1-copia 类反转录酶的核苷酸序列比较第54-56页
       ·Ty1-copia 类反转录转座子的 RT 氨基酸序列比较第56-58页
     ·铁皮石斛 Ty1 组反转录转座子 RT 序列的系统发育进化树分析第58-59页
   ·结论与讨论第59-60页
第五章 脱落酸对铁皮石斛 Ty1-copia 类反转录转座子转录活性的影响第60-69页
   ·材料与方法第60-62页
     ·试验材料及试剂第60-61页
     ·方法第61-62页
       ·材料处理第61页
       ·铁皮石斛 RNA 的提取第61页
       ·反转录及 RT-PCR 反应第61页
       ·PCR 产物回收、克隆及测序第61-62页
       ·反转录酶序列分析第62页
   ·结果与分析第62-67页
     ·ABA 处理 LTR 反转录转座子的 RT‐PCR 扩增结果第62页
     ·ABA 诱导后具有转录活性的铁皮石斛 Ty1‐copia 类反转录转座子序列分析第62-65页
       ·铁皮石斛中具有转录活性的 Ty1-copia 类 RT 核苷酸序列比较第62-63页
       ·铁皮石斛中具有转录活性的 Ty1-copia 类 RT 氨基酸序列比较第63-65页
     ·铁皮石斛 Ty1 组反转录转座子 RT 序列的系统发育进化树分析第65-67页
       ·铁皮石斛中发生转录的 Ty1 组反转录转座子 RT 序列的系统发育进化树分析第65-66页
       ·铁皮石斛中 cDNA Ty1-copia RT 序列和基因组 DNA Ty1-copia RT 序列的系统进化树分析第66-67页
   ·结论与讨论第67-69页
第六章 胁迫条件下铁皮石斛 Ty1-copia 类反转录转座子转录活性分析第69-77页
   ·材料和方法第69-70页
     ·试验材料第69页
     ·材料处理及 RNA 提取第69页
     ·半定量 RT‐ PCR 反应第69-70页
     ·PCR 产物回收、克隆及测序第70页
     ·反转录酶序列分析第70页
   ·结果与分析第70-73页
     ·胁迫处理下具有转录活性的 Ty1‐copia 类反转录转座子的分离第70-71页
     ·胁迫条件下铁皮石斛 RT 序列特点第71-72页
     ·铁皮石斛中具有转录活性的 Ty1‐copia 类 RT 氨基酸序列比较第72-73页
     ·铁皮石斛中胁迫条件下 cDNA Ty1‐copia RT 序列和基因组 DNA Ty1‐copia RT 序列的系统进化树分析第73页
   ·讨论第73-77页
第七章 结论第77-78页
参考文献第78-89页
附录第89-91页
 一、主要试剂及配法第89页
 二、主要仪器第89页
 三、常用名词缩写表第89-91页
个人简介第91页
论文发表情况第91页
学术交流第91-92页
致谢第92页

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