淀粉蔗糖酶基因定点突变及其酶学性质表征
| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 1 前言 | 第8-15页 |
| ·选题来源 | 第8页 |
| ·淀粉蔗糖酶 | 第8-11页 |
| ·淀粉蔗糖酶的来源 | 第8-9页 |
| ·淀粉蔗糖酶的结构 | 第9-10页 |
| ·淀粉蔗糖酶的作用机制 | 第10-11页 |
| ·淀粉蔗糖酶的应用 | 第11-12页 |
| ·国内外研究进展 | 第12-13页 |
| ·国外研究进展 | 第12-13页 |
| ·国内的研究进展 | 第13页 |
| ·创新点 | 第13页 |
| ·研究的基本内容 | 第13-15页 |
| 2 材料与方法 | 第15-26页 |
| ·材料 | 第15-18页 |
| ·菌株和载体 | 第15页 |
| ·试剂 | 第15-16页 |
| ·主要培养基的配制 | 第16页 |
| ·主要试剂的配制 | 第16-18页 |
| ·试验仪器 | 第18页 |
| ·试验方法 | 第18-26页 |
| ·突变点的选择 | 第18页 |
| ·AS 质粒的提取 | 第18-19页 |
| ·突变质粒的构建 | 第19-20页 |
| ·BL21 感受态细胞的制备 | 第20页 |
| ·突变质粒转化 | 第20页 |
| ·AS 基因的鉴定 | 第20-21页 |
| ·AS 的诱导表达 | 第21页 |
| ·目的蛋白的纯化 | 第21页 |
| ·SDS-PAGE 的检测 | 第21-22页 |
| ·Weston blot 分析 | 第22-23页 |
| ·酶活力的测定 | 第23-25页 |
| ·酶学性质表征 | 第25-26页 |
| 3 结果与分析 | 第26-47页 |
| ·AS 基因序列及氨基酸序列 | 第26-27页 |
| ·突变点的确定 | 第27-29页 |
| ·AS 基因定点突变 | 第29页 |
| ·突变体 PCR 验证及测序 | 第29-31页 |
| ·AS 基因诱导表达及分析 | 第31页 |
| ·AS 基因的分离纯化 | 第31页 |
| ·SDS-PAGE 和 Western blot | 第31-32页 |
| ·标准曲线的绘制 | 第32-33页 |
| ·酶学性质表征检测 | 第33-35页 |
| ·最适 pH 和最适温度的研究 | 第35-40页 |
| ·热稳定性的研究 | 第40-42页 |
| ·金属离子及有机溶剂对酶活力影响的研究 | 第42-47页 |
| 4 讨论 | 第47-48页 |
| 5 结论 | 第48-50页 |
| ·突变位点的确定及定点突变 | 第48页 |
| ·野生型及突变株的酶学性质表征 | 第48-50页 |
| 参考文献 | 第50-54页 |
| 作者简介 | 第54-55页 |
| 致谢 | 第55页 |