| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 第一章 绪论 | 第8-15页 |
| ·二羟基丙酮 | 第8页 |
| ·二羟基丙酮基本性质 | 第8页 |
| ·二羟基丙酮应用 | 第8页 |
| ·二羟基丙酮生产方法 | 第8-10页 |
| ·二羟基丙酮化学生产法 | 第8-9页 |
| ·二羟基丙酮生物转化法 | 第9-10页 |
| ·氧化葡萄糖酸杆菌 | 第10-13页 |
| ·氧化葡萄糖酸杆菌的基本特征 | 第10-11页 |
| ·氧化葡萄糖酸杆菌代谢特征 | 第11页 |
| ·氧化葡萄糖酸杆菌甘油代谢途径[8] | 第11-12页 |
| ·氧化葡萄糖酸杆菌甘油脱氢酶 | 第12-13页 |
| ·二羟基丙酮发酵生产研究概况 | 第13-14页 |
| ·本课题的立题依据和主要研究内容 | 第14-15页 |
| 第二章 材料与方法 | 第15-27页 |
| ·材料 | 第15-19页 |
| ·菌株与质粒 | 第15页 |
| ·引物序列 | 第15-16页 |
| ·培养基与溶液 | 第16-17页 |
| ·主要试剂 | 第17-18页 |
| ·主要仪器与设备 | 第18-19页 |
| ·菌株培养与保藏 | 第19页 |
| ·G. oxydans WD | 第19页 |
| ·E. coli | 第19页 |
| ·细菌基因组提取方法 | 第19页 |
| ·细菌质粒提取方法 | 第19-20页 |
| ·PCR 和酶切连接转化方法 | 第20-22页 |
| ·用于 TA 克隆的 PCR | 第20页 |
| ·PrimeSTAR DNA polymerase PCR | 第20-21页 |
| ·融合 PCR | 第21页 |
| ·酶切方法 | 第21页 |
| ·连接方法 | 第21-22页 |
| ·转化方法 | 第22页 |
| ·形态观察及生理生化试验 | 第22页 |
| ·菌落形态观察 | 第22页 |
| ·菌体形态特征观察 | 第22页 |
| ·生理生化试验 | 第22页 |
| ·发酵培养方法 | 第22-23页 |
| ·摇瓶种子培养 | 第22页 |
| ·摇瓶发酵培养 | 第22页 |
| ·发酵罐种子培养 | 第22页 |
| ·发酵罐发酵培养 | 第22-23页 |
| ·基因 TA 克隆与序列分析方法 | 第23页 |
| ·山梨醇脱氢酶的克隆表达方法 | 第23-24页 |
| ·分析检测方法 | 第24-27页 |
| ·菌体生长测定 | 第24页 |
| ·DHA 含量测定 | 第24-25页 |
| ·甘油含量的测定 | 第25页 |
| ·SDS-PAGE 分析 | 第25页 |
| ·Western blot 分析 | 第25-26页 |
| ·流式细胞仪分析 | 第26页 |
| ·荧光分光光度计检测 | 第26页 |
| ·荧光显微镜观察 | 第26-27页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第27-45页 |
| ·WD 菌株产 DHA 能力验证 | 第27页 |
| ·G. oxydans WD 菌株鉴定 | 第27-31页 |
| ·菌落形态特征 | 第27-28页 |
| ·菌体形态特征 | 第28页 |
| ·G. oxydans WD 生理生化特征 | 第28页 |
| ·16S rDNA 鉴定 | 第28-31页 |
| ·鉴定结论 | 第31页 |
| ·G. oxydans WD 种子培养条件优化 | 第31-33页 |
| ·碳源组成对 G. oxydans WD 生长的影响 | 第31-32页 |
| ·酵母粉浓度对 G. oxydans WD 生长的影响 | 第32页 |
| ·接种量对 G. oxydans WD 生长的影响 | 第32页 |
| ·装液量对 G. oxydans WD 生长的影响 | 第32-33页 |
| ·G. oxydans WD 摇瓶发酵条件优化 | 第33-36页 |
| ·酵母粉浓度对甘油转化合成 DHA 的影响 | 第33页 |
| ·甘油浓度对甘油转化合成 DHA 的影响 | 第33-34页 |
| ·接种量对甘油转化合成 DHA 的影响 | 第34-35页 |
| ·CaCO_3浓度对甘油转化合成 DHA 的影响 | 第35页 |
| ·正交实验 | 第35-36页 |
| ·G. oxydans WD 发酵罐研究 | 第36-38页 |
| ·甘油转化合成 DHA 的分批发酵 | 第36-37页 |
| ·甘油转化合成 DHA 的补料分批发酵 | 第37-38页 |
| ·G. oxydans WD 山梨醇脱氢酶基因研究 | 第38-45页 |
| ·山梨醇脱氢酶基因 PCR 扩增 | 第38-39页 |
| ·山梨醇脱氢酶基因 TA 克隆与序列分析 | 第39页 |
| ·山梨醇脱氢酶基因在大肠杆菌中的表达验证 | 第39-41页 |
| ·sldA SD 序列的初步分析 | 第41-45页 |
| 主要结论与展望 | 第45-46页 |
| 主要结论 | 第45页 |
| 展望 | 第45-46页 |
| 致谢 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-51页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第51-56页 |
