| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-13页 |
| 英文缩略表 | 第13-14页 |
| 第一章 引言 | 第14-20页 |
| ·PRRSV的分类地位及形态结构 | 第14页 |
| ·PRRSV的理化特征 | 第14-15页 |
| ·PRRSV的生物学特性 | 第15页 |
| ·PRRSV生物学结构 | 第15-18页 |
| ·PRRSV基因组结构 | 第15-17页 |
| ·PRRSV基因组遗传变异 | 第17-18页 |
| ·国内PRRSV流行情况和防控 | 第18-19页 |
| ·本研究目的和意义 | 第19-20页 |
| 第二章 高致病性PRRSV SHXX13/2013株的分离鉴定及遗传演化分析 | 第20-37页 |
| 摘要 | 第20页 |
| ·材料和方法 | 第20-25页 |
| ·病毒、细胞与样品来源 | 第20页 |
| ·主要试剂 | 第20页 |
| ·临床样品处理 | 第20-22页 |
| ·病毒的分离 | 第22页 |
| ·分离病毒的鉴定 | 第22-23页 |
| ·病毒全基因组分段扩增 | 第23页 |
| ·克隆片段的回收 | 第23-24页 |
| ·连接载体 | 第24页 |
| ·连接产物转化 | 第24页 |
| ·重组质粒的提取 | 第24页 |
| ·重组质粒的PCR鉴定 | 第24页 |
| ·目的片段的序列测定及片段拼接 | 第24-25页 |
| ·结果 | 第25-35页 |
| ·样品检测结果 | 第25页 |
| ·病毒分离 | 第25-26页 |
| ·分离病毒的特异性鉴定 | 第26-27页 |
| ·病毒生长特性鉴定 | 第27-28页 |
| ·病毒全长基因扩增 | 第28页 |
| ·目的片段阳性质粒的鉴定 | 第28页 |
| ·SHxx13/2013 3’UTR和5’UTR序列分析 | 第28-29页 |
| ·SHxx13/2013非结构蛋白Nsp2序列分析 | 第29-31页 |
| ·SHxx13/2013主要结构蛋白ORF5的序列分析 | 第31-33页 |
| ·SHxx13/2013全长基因的序列分析 | 第33-35页 |
| ·讨论 | 第35-37页 |
| 第三章 SHXX13/2013分离毒株致病性分析 | 第37-46页 |
| 摘要 | 第37页 |
| ·材料和方法 | 第37-39页 |
| ·病毒、细胞 | 第37页 |
| ·试验猪 | 第37页 |
| ·主要试剂 | 第37页 |
| ·TCID_(50)测定 | 第37页 |
| ·仔猪感染试验 | 第37-38页 |
| ·血样、鼻拭子、剖检组织的处理 | 第38页 |
| ·样品RNA提取 | 第38页 |
| ·病毒RNA反转录 | 第38页 |
| ·实时荧光定量PCR检测PRRSV病毒含量 | 第38页 |
| ·PRRSV抗体检测 | 第38-39页 |
| ·剖检及组织病理学观察 | 第39页 |
| ·PCR方法检测其他病原 | 第39页 |
| ·病死猪PRRSV SHxx13/2013毒株的分离、鉴定 | 第39页 |
| ·结果 | 第39-45页 |
| ·临床症状 | 第39-40页 |
| ·实时荧光定量PCR(Q-PCR)检测PRRSV病毒含量 | 第40-41页 |
| ·ELISA特异性抗体检测 | 第41-42页 |
| ·剖检病变 | 第42-44页 |
| ·组织病理学观察 | 第44-45页 |
| ·PCR方法检测其他病原 | 第45页 |
| ·病死猪组织分离PRRSV病毒测序 | 第45页 |
| ·讨论 | 第45-46页 |
| 第四章 高致病性猪繁殖与呼吸综合征弱毒HUN4-F112嵌合强毒NSP1-2、NSP3-8、ORF2-4和ORF5-6编码区嵌合病毒的构建及其生物学特性的分析 | 第46-53页 |
| 摘要 | 第46页 |
| ·材料和方法 | 第46-49页 |
| ·病毒和细胞 | 第46页 |
| ·嵌合病毒全长基因组cDNA克隆的构建 | 第46-48页 |
| ·嵌合病毒基因组的体外转录 | 第48页 |
| ·重组病毒RNA的纯化 | 第48页 |
| ·病毒拯救 | 第48页 |
| ·测序 | 第48页 |
| ·间接免疫荧光试验 | 第48-49页 |
| ·拯救病毒生长曲线的绘制 | 第49页 |
| ·病毒蚀斑形态观察 | 第49页 |
| ·结果 | 第49-51页 |
| ·测序 | 第49页 |
| ·间接免疫荧光试验 | 第49-50页 |
| ·拯救病毒生长曲线的绘制 | 第50页 |
| ·病毒蚀斑形态观察 | 第50-51页 |
| ·讨论 | 第51-53页 |
| 第五章 全文总结 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 作者简历 | 第63页 |
