| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-12页 |
| 符号及缩略语 | 第12-14页 |
| 第一章 赭曲霉毒素A的研究进展 | 第14-24页 |
| 1 OTA的产生分布与污染现状 | 第14页 |
| 2 OTA的理化性质 | 第14-15页 |
| 3 OTA的毒理学研究 | 第15-18页 |
| ·OTA的毒性作用 | 第15-17页 |
| ·OTA毒性的作用机制 | 第17-18页 |
| 4 OTA的限量标准 | 第18-19页 |
| 5 OTA的检测技术 | 第19-21页 |
| ·薄层色谱法 | 第19页 |
| ·高效液相色谱法 | 第19页 |
| ·免疫学检测法 | 第19-21页 |
| 参考文献 | 第21-24页 |
| 第二章 单链抗体的研究进展 | 第24-34页 |
| 1 单链抗体的特点 | 第24页 |
| 2 单链抗体的构建 | 第24-25页 |
| ·单链抗体基因来源 | 第24-25页 |
| ·单链抗体的结构设计 | 第25页 |
| 3 单链抗体的制备技术 | 第25-27页 |
| ·噬菌体抗体库技术 | 第25-26页 |
| ·核糖体展示技术 | 第26-27页 |
| ·酵母表面展示技术 | 第27页 |
| 4 单链抗体的表达 | 第27-28页 |
| ·原核表达系统 | 第27-28页 |
| ·真核表达系统 | 第28页 |
| 5 单链抗体的应用及展望 | 第28-31页 |
| ·生物学及化学检测 | 第28-29页 |
| ·疾病治疗 | 第29页 |
| ·单链抗体的展望 | 第29-31页 |
| 参考文献 | 第31-34页 |
| 第三章 赭曲霉毒素A偶联抗原的制备 | 第34-44页 |
| 1 材料与方法 | 第34-38页 |
| ·材料 | 第34-35页 |
| ·方法 | 第35-38页 |
| 2 结果与分析 | 第38-41页 |
| ·考马斯亮蓝法测OTA偶联抗原浓度 | 第38页 |
| ·SDS-PAGE分析抗原偶联效果 | 第38-39页 |
| ·紫外扫描法鉴定抗原偶联效果及偶联比 | 第39页 |
| ·OTA-OVA偶联抗原反应原性的鉴定 | 第39-40页 |
| ·OTA-KLH偶联抗原免疫原性的鉴定 | 第40-41页 |
| 3 讨论 | 第41-42页 |
| ·免疫抗原与包被抗原的选择 | 第41页 |
| ·偶联方法的选择 | 第41-42页 |
| ·变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)对抗原偶联效果的鉴定 | 第42页 |
| 4 小结 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-44页 |
| 第四章 赭曲霉毒素A单链抗体的制备 | 第44-64页 |
| 1 材料与方法 | 第44-52页 |
| ·材料 | 第44-46页 |
| ·方法 | 第46-52页 |
| 2 结果与分析 | 第52-59页 |
| ·重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)基因的扩增 | 第52页 |
| ·三步法拼接单链抗体可变区基因片段(ScFv) | 第52-53页 |
| ·ScFv片段的亚克隆 | 第53-54页 |
| ·重组质粒pCANTAB5E-ScFv的鉴定、连接与转化 | 第54-55页 |
| ·核苷酸测序结果与分析 | 第55页 |
| ·噬菌体单链抗体库的富集筛选结果 | 第55-56页 |
| ·抗原阳性噬菌体单链抗体的筛选结果 | 第56-57页 |
| ·OTA单链抗体的表达 | 第57-58页 |
| ·OTA单链抗体的纯化 | 第58-59页 |
| 3 讨论 | 第59-61页 |
| ·采用pMD18-T Simple载体进行T-A克隆的优势 | 第59-60页 |
| ·表达载体与大肠杆菌的选择 | 第60页 |
| ·三步法拼接ScFv的优势 | 第60-61页 |
| ·表达体系的构建 | 第61页 |
| 4 小结 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-64页 |
| 第五章 赭曲霉毒素A单链抗体的初步应用 | 第64-76页 |
| 1 材料与方法 | 第64-68页 |
| ·材料 | 第64-65页 |
| ·方法 | 第65-68页 |
| 2 结果 | 第68-71页 |
| ·两种抗体亲和力比较试验 | 第68-69页 |
| ·OTA单链抗体检出限的测定 | 第69页 |
| ·检测方法的准确性分析 | 第69-70页 |
| ·OTA单链抗体的特异性检验 | 第70页 |
| ·加标回收率的测定 | 第70页 |
| ·饲料样品中OTA的检测 | 第70-71页 |
| 3 讨论 | 第71-72页 |
| ·单链抗体与单克隆抗体亲和常数的比较 | 第71-72页 |
| ·采用OTA单链抗体构建检测方法的评价 | 第72页 |
| 4 小结 | 第72-74页 |
| 参考文献 | 第74-76页 |
| 全文总结 | 第76-78页 |
| 致谢 | 第78页 |
