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猪OAS1启动子SNP对日本乙型脑炎病毒感染的影响

摘要第1-9页
ABSTRACT第9-12页
本文部分缩写中英文对照第12-13页
第一篇 文献综述第13-35页
 第一章 日本乙型脑炎病毒的研究进展第13-23页
  1 日本乙型脑炎病毒流行病学特征 #I第13-14页
   ·流行特征第13页
   ·传播媒介和宿主第13-14页
   ·临床症状和病理变化第14页
  2 日本乙型脑炎病毒的分子生物学特征第14-16页
   ·基因组的结构特征第14页
   ·结构蛋白第14-15页
   ·非结构蛋白第15-16页
  3 日本乙型脑炎病毒的基因分型第16页
   ·日本乙型脑炎病毒的基因分型第16页
   ·我国日本乙型脑炎病毒基因型状况第16页
  4 日本乙型脑炎病毒的毒力和致病机理第16-17页
  5 日本乙型脑炎病毒的诊断方法第17-19页
   ·临床诊断第17页
   ·病原学诊断第17页
   ·血清学检测第17-18页
   ·分子生物学检测技术第18-19页
  6 日本乙型脑炎病毒疫苗的研究概况第19-23页
   ·灭活疫苗第20页
   ·减毒活疫苗第20页
   ·DNA疫苗第20页
   ·嵌合病毒减毒活疫苗第20-21页
   ·亚单位疫苗第21-23页
 第二章 2’,5’-寡腺苷酸合成酶的研究进展第23-35页
  1 2’,5’-寡腺苷酸合成酶生物学特征第23-25页
   ·2’,5’-寡腺苷酸合成酶家族基因结构第23-24页
   ·2’,5’-寡腺苷酸合成酶蛋白质结构第24-25页
   ·2’,5’-寡腺苷酸合成酶的催化机制第25页
  2 2’,5’-寡腺苷酸合成酶家族的起源第25-26页
  3 病毒激活2’,5’-寡腺苷酸合成酶的机制第26页
  4 2’,5’寡腺苷酸合成酶的抗病毒途径第26-29页
   ·OAS/RNaseL途径抗病毒作用第27页
   ·OAS不依赖RNaseL的抗病毒作用第27-29页
  参考文献第29-35页
第二篇 实验部分第35-95页
 第一章 猪源OAS1启动子的定位与功能测试第35-53页
  摘要第35页
  Abstract第35-36页
  1 实验材料第36-39页
   ·细胞株第36页
   ·细菌菌株第36页
   ·质粒载体第36-37页
   ·引物设计与合成第37页
   ·主要试剂第37-39页
   ·主要溶液的配制第39页
  2 实验方法第39-45页
   ·猪源OAS1启动子区的扩增及荧光素酶报告载体的构建第39-42页
   ·猪源OAS1核心启动子活性的测定第42-43页
   ·细胞中猪源OAS1表达量的测定第43-45页
   ·猪源OAS1启动子区干扰素调控位点的鉴定第45页
   ·统计方法第45页
  3 实验结果第45-51页
   ·猪源OAS1启动子区的扩增及荧光素酶报告载体的构建第45-47页
   ·猪源OAS1核心启动子区的定位第47-48页
   ·猪源OAS1对干扰素的应答第48-50页
   ·猪源OAS1启动子区干扰素调控位点的鉴定第50-51页
  4 讨论第51-52页
  参考文献第52-53页
 第二章 猪源OAS1核心启动子区SNP特征第53-67页
  摘要第53页
  Abstract第53-54页
  1 实验材料第54-57页
   ·试验动物第54页
   ·细胞株和菌株第54页
   ·质粒载体第54-55页
   ·引物设计与合成第55页
   ·病毒第55页
   ·主要试剂第55页
   ·主要仪器第55-56页
   ·溶液的配制第56-57页
  2 实验方法第57-60页
   ·猪源OAS1启动子区的扩增及荧光素酶报告载体的构建第57-59页
   ·乙型脑炎发病猪OAS1启动子活性的测定第59-60页
  3 实验结果第60-64页
   ·不同品系以及乙型脑炎发病猪OAS1启动子区的SNP特征第60-63页
   ·乙型脑炎发病猪OAS1启动子对干扰素的应答第63-64页
  4 讨论第64-66页
  参考文献第66-67页
 第三章 猪源OAS1在抗JEV感染中作用的初步探究第67-95页
  摘要第67页
  Abstract第67-69页
  1 实验材料第69-71页
   ·细胞株和菌株第69页
   ·质粒载体第69页
   ·引物设计与合成第69-70页
   ·病毒第70页
   ·主要试剂第70页
   ·主要仪器第70-71页
  2 实验方法第71-76页
   ·病毒半数细胞感染量(TCID_(50))的测定第71页
   ·PK15细胞总RNA的提取与反转第71-72页
   ·PK15细胞中OAS1基因表达的测定第72-73页
   ·PK15细胞中JEV滴度分析第73页
   ·乙型脑炎发病猪OAS1启动子活性的测定第73-74页
   ·猪OAS1启动子区的获得第74-75页
   ·pcDNA-pOAS1真核表达载体的构建第75-76页
   ·EGFP基因的扩增及真核表达载体的构建第76页
   ·重组真核表达质粒的体外表达与鉴定第76页
  3 实验结果第76-89页
   ·猪干扰素抑制JEV的复制第76-77页
   ·猪干扰素诱导猪源OAS1的表达第77-78页
   ·JEV强毒株与弱毒疫苗株刺激PK细胞OAS1表达量变化特征第78-79页
   ·乙型脑炎发病猪OAS1对JEV强毒株刺激的应答特征第79-81页
   ·乙型脑炎发病猪OAS1对JEV弱毒疫苗株刺激的应答特征第81-82页
   ·猪干扰素与JEV共同作用诱导OAS1的表达第82-83页
   ·重组pcDNA-pOAS1和pCDNA-pOAS1-EGFP真核表达载体的构建第83-85页
   ·重组pOAS1-EGFP表达的鉴定第85页
   ·猪源OAS1蛋白对JEV的抑制作用第85-89页
  4 讨论第89-92页
  参考文献第92-95页
全文总结第95-97页
致谢第97页

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