摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-12页 |
本文部分缩写中英文对照 | 第12-13页 |
第一篇 文献综述 | 第13-35页 |
第一章 日本乙型脑炎病毒的研究进展 | 第13-23页 |
1 日本乙型脑炎病毒流行病学特征 #I | 第13-14页 |
·流行特征 | 第13页 |
·传播媒介和宿主 | 第13-14页 |
·临床症状和病理变化 | 第14页 |
2 日本乙型脑炎病毒的分子生物学特征 | 第14-16页 |
·基因组的结构特征 | 第14页 |
·结构蛋白 | 第14-15页 |
·非结构蛋白 | 第15-16页 |
3 日本乙型脑炎病毒的基因分型 | 第16页 |
·日本乙型脑炎病毒的基因分型 | 第16页 |
·我国日本乙型脑炎病毒基因型状况 | 第16页 |
4 日本乙型脑炎病毒的毒力和致病机理 | 第16-17页 |
5 日本乙型脑炎病毒的诊断方法 | 第17-19页 |
·临床诊断 | 第17页 |
·病原学诊断 | 第17页 |
·血清学检测 | 第17-18页 |
·分子生物学检测技术 | 第18-19页 |
6 日本乙型脑炎病毒疫苗的研究概况 | 第19-23页 |
·灭活疫苗 | 第20页 |
·减毒活疫苗 | 第20页 |
·DNA疫苗 | 第20页 |
·嵌合病毒减毒活疫苗 | 第20-21页 |
·亚单位疫苗 | 第21-23页 |
第二章 2’,5’-寡腺苷酸合成酶的研究进展 | 第23-35页 |
1 2’,5’-寡腺苷酸合成酶生物学特征 | 第23-25页 |
·2’,5’-寡腺苷酸合成酶家族基因结构 | 第23-24页 |
·2’,5’-寡腺苷酸合成酶蛋白质结构 | 第24-25页 |
·2’,5’-寡腺苷酸合成酶的催化机制 | 第25页 |
2 2’,5’-寡腺苷酸合成酶家族的起源 | 第25-26页 |
3 病毒激活2’,5’-寡腺苷酸合成酶的机制 | 第26页 |
4 2’,5’寡腺苷酸合成酶的抗病毒途径 | 第26-29页 |
·OAS/RNaseL途径抗病毒作用 | 第27页 |
·OAS不依赖RNaseL的抗病毒作用 | 第27-29页 |
参考文献 | 第29-35页 |
第二篇 实验部分 | 第35-95页 |
第一章 猪源OAS1启动子的定位与功能测试 | 第35-53页 |
摘要 | 第35页 |
Abstract | 第35-36页 |
1 实验材料 | 第36-39页 |
·细胞株 | 第36页 |
·细菌菌株 | 第36页 |
·质粒载体 | 第36-37页 |
·引物设计与合成 | 第37页 |
·主要试剂 | 第37-39页 |
·主要溶液的配制 | 第39页 |
2 实验方法 | 第39-45页 |
·猪源OAS1启动子区的扩增及荧光素酶报告载体的构建 | 第39-42页 |
·猪源OAS1核心启动子活性的测定 | 第42-43页 |
·细胞中猪源OAS1表达量的测定 | 第43-45页 |
·猪源OAS1启动子区干扰素调控位点的鉴定 | 第45页 |
·统计方法 | 第45页 |
3 实验结果 | 第45-51页 |
·猪源OAS1启动子区的扩增及荧光素酶报告载体的构建 | 第45-47页 |
·猪源OAS1核心启动子区的定位 | 第47-48页 |
·猪源OAS1对干扰素的应答 | 第48-50页 |
·猪源OAS1启动子区干扰素调控位点的鉴定 | 第50-51页 |
4 讨论 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-53页 |
第二章 猪源OAS1核心启动子区SNP特征 | 第53-67页 |
摘要 | 第53页 |
Abstract | 第53-54页 |
1 实验材料 | 第54-57页 |
·试验动物 | 第54页 |
·细胞株和菌株 | 第54页 |
·质粒载体 | 第54-55页 |
·引物设计与合成 | 第55页 |
·病毒 | 第55页 |
·主要试剂 | 第55页 |
·主要仪器 | 第55-56页 |
·溶液的配制 | 第56-57页 |
2 实验方法 | 第57-60页 |
·猪源OAS1启动子区的扩增及荧光素酶报告载体的构建 | 第57-59页 |
·乙型脑炎发病猪OAS1启动子活性的测定 | 第59-60页 |
3 实验结果 | 第60-64页 |
·不同品系以及乙型脑炎发病猪OAS1启动子区的SNP特征 | 第60-63页 |
·乙型脑炎发病猪OAS1启动子对干扰素的应答 | 第63-64页 |
4 讨论 | 第64-66页 |
参考文献 | 第66-67页 |
第三章 猪源OAS1在抗JEV感染中作用的初步探究 | 第67-95页 |
摘要 | 第67页 |
Abstract | 第67-69页 |
1 实验材料 | 第69-71页 |
·细胞株和菌株 | 第69页 |
·质粒载体 | 第69页 |
·引物设计与合成 | 第69-70页 |
·病毒 | 第70页 |
·主要试剂 | 第70页 |
·主要仪器 | 第70-71页 |
2 实验方法 | 第71-76页 |
·病毒半数细胞感染量(TCID_(50))的测定 | 第71页 |
·PK15细胞总RNA的提取与反转 | 第71-72页 |
·PK15细胞中OAS1基因表达的测定 | 第72-73页 |
·PK15细胞中JEV滴度分析 | 第73页 |
·乙型脑炎发病猪OAS1启动子活性的测定 | 第73-74页 |
·猪OAS1启动子区的获得 | 第74-75页 |
·pcDNA-pOAS1真核表达载体的构建 | 第75-76页 |
·EGFP基因的扩增及真核表达载体的构建 | 第76页 |
·重组真核表达质粒的体外表达与鉴定 | 第76页 |
3 实验结果 | 第76-89页 |
·猪干扰素抑制JEV的复制 | 第76-77页 |
·猪干扰素诱导猪源OAS1的表达 | 第77-78页 |
·JEV强毒株与弱毒疫苗株刺激PK细胞OAS1表达量变化特征 | 第78-79页 |
·乙型脑炎发病猪OAS1对JEV强毒株刺激的应答特征 | 第79-81页 |
·乙型脑炎发病猪OAS1对JEV弱毒疫苗株刺激的应答特征 | 第81-82页 |
·猪干扰素与JEV共同作用诱导OAS1的表达 | 第82-83页 |
·重组pcDNA-pOAS1和pCDNA-pOAS1-EGFP真核表达载体的构建 | 第83-85页 |
·重组pOAS1-EGFP表达的鉴定 | 第85页 |
·猪源OAS1蛋白对JEV的抑制作用 | 第85-89页 |
4 讨论 | 第89-92页 |
参考文献 | 第92-95页 |
全文总结 | 第95-97页 |
致谢 | 第97页 |