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采用TAPa-LP系统筛选拟南芥G蛋白α亚基互作因子

符号说明第1-7页
目录第7-10页
中文摘要第10-13页
Abstract第13-17页
1 前言第17-42页
   ·异三聚体G蛋白的种类和结构第18-20页
     ·异三聚体G蛋白的种类第18页
     ·异三聚体G蛋白结构第18-20页
   ·异三聚体G蛋白的信号转导途径第20-22页
   ·转导途径的构成第22-26页
     ·G蛋白偶联受体(GPCR)第22-23页
     ·G蛋白信号调节蛋白(RGS)第23-24页
     ·G蛋白下游效应器第24-26页
   ·植物异三聚体G蛋白第26-31页
     ·植物异三聚体G蛋白α亚基第26-27页
     ·植物异三聚体G蛋白β亚基第27页
     ·植物异三聚体G蛋白γ亚基第27-28页
     ·植物G蛋白的空间结构第28页
     ·G蛋白相互作用的蛋白因子第28-29页
     ·G-蛋白在植物发育中的作用第29-30页
     ·植物激素信号转导第30-31页
   ·蛋白质的研究技术第31-40页
     ·蛋白质空间结构的研究技术第31-32页
     ·生物大分子相互作用的研究技术第32-39页
     ·蛋白质的结构研究现状第39-40页
     ·展望第40-42页
2 材料与方法第42-60页
   ·实验材料第42-45页
     ·植物材料第42页
     ·菌株和质粒第42页
     ·基因第42-43页
     ·酶和生化试剂第43页
     ·蛋白质结构测定所用仪器与试剂第43-44页
     ·实验引物第44-45页
   ·实验方法第45-60页
     ·SWISS-MODEL对Gα-TAPa或Gα-linker-TAPa蛋白质结构预测第45页
     ·C-TAPa基因的改造第45-47页
     ·5种重组体的构建第47-48页
     ·5种表达载体的构建第48-50页
     ·拟南芥的培养,转化与筛选第50-51页
     ·转基因拟南芥筛选与鉴定第51-55页
     ·拟南芥总蛋白的提取第55页
     ·第一次TAPa串联亲和层析第55-56页
     ·第二次TAPa串联亲和层析第56-57页
     ·N-TAPa的5种表达载体的构建第57页
     ·N-TAPa纯化系统的构建第57-58页
     ·磁化方法第58-60页
3 结果与分析第60-85页
   ·五种表达载体的结构第60-63页
   ·拟南芥总RNA的提取第63-64页
   ·转基因拟南芥的鉴定第64-65页
   ·几种转基因拟南芥G蛋白的组成第65-66页
   ·G蛋白影响了植物的生长和发育第66-73页
     ·在T_2代植物中G蛋白能强烈影响主根的发育第66-67页
     ·在植物的发育过程中G蛋白影响了果实的大小或形态第67-69页
     ·在植物的发育过程中G蛋白影响了花的发育第69页
     ·G蛋白影响了叶的发育第69-71页
     ·在植物的发育过程中G蛋白影响了种子色素的合成第71-73页
     ·在植物的发育过程中G蛋白影响了植株的生长第73页
   ·蛋白质的纯化结果第73-76页
     ·总拟南芥的电泳图第73-74页
     ·蛋白纯化后的检测结果第74-76页
   ·朗伯-比尔定律的实验结果第76-85页
     ·磁铁的距离对吸光度的影响第76-77页
     ·蛋白浓度与磁化时间对吸光度的影响第77-78页
     ·BSA与溶菌酶在6个方向所侧的吸光度的结果第78-79页
     ·朗伯-比尔定律的推导第79-81页
     ·数学模型的公式推导第81-82页
     ·MATLAB7.0.1的绘制数学模型的过程第82-85页
4 讨论第85-96页
   ·主根的发育过程中GDP-Gα是正调控因子而GTP-Gα是负调控因子第85-86页
   ·G蛋白对叶的形态发育的影响第86-87页
   ·G蛋白对花的发育影响第87页
   ·激活性GTP-Gα抑制种子花青素的合成第87-88页
   ·在果荚的发育过程中G蛋白起着正调控的作用第88页
   ·在拟南芥中Gα能促进植株的生长发育第88-89页
   ·在拟南芥发育的不同阶段G蛋白起着极其复杂的作用第89-90页
   ·Gα调控区域的功能定位第90-92页
   ·G蛋白互作因子的鉴定第92页
   ·朗伯-比尔定律预测蛋白质的空间结构第92-96页
     ·磁场导致蛋白质的定向排列第92-93页
     ·定向排列是导致蛋白质吸光度在不同角度变化的原因第93-96页
5 结论第96-97页
参考文献第97-105页
致谢第105-106页
攻读学位期间论文发表情况第106页

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