| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 目录 | 第9-12页 |
| 第一章 引言 | 第12-34页 |
| 第一节 乳腺的发育、结构和生理学 | 第12-16页 |
| ·正常乳腺的发生和发育 | 第12-13页 |
| ·乳腺的基本构造及生理变化 | 第13-16页 |
| 第二节 乳腺癌的发生和演进 | 第16-24页 |
| ·乳腺癌的发生 | 第16-20页 |
| ·乳腺癌的分级,分期和分类 | 第20-21页 |
| ·乳腺癌的临床诊断与治疗 | 第21-24页 |
| 第三节 雌激素及其受体信号通路(Estrogen-ER signaling pathway) | 第24-32页 |
| ·雌激素和雌激素受体信号通路概述 | 第24-26页 |
| ·雌激素在乳腺发育中的重要作用 | 第26-28页 |
| ·雌激素在乳腺癌发生过程中的重要作用 | 第28-32页 |
| 第四节 ERRF/C1orf64 的结构和功能预测 | 第32-34页 |
| ·ERRF/C1orf64 的基因定位和结构 | 第32页 |
| ·ERRF/C1orf64 的基因功能预测 | 第32-33页 |
| ·ERRF 在乳腺癌发生过程中的可能作用 | 第33-34页 |
| 第二章 研究目标与意义 | 第34-36页 |
| 第一节 研究目标 | 第34页 |
| 第二节 研究意义 | 第34-36页 |
| 第三章 材料与方法 | 第36-51页 |
| 第一节 实验材料 | 第36-39页 |
| ·组织样本 | 第36页 |
| ·细胞系 | 第36-37页 |
| ·菌株和质粒 | 第37页 |
| ·克隆所用限制性内切酶 | 第37页 |
| ·抗体 | 第37页 |
| ·PCR相关试剂 | 第37-38页 |
| ·干扰用小分子RNA (siRNA) | 第38-39页 |
| ·小鼠 | 第39页 |
| ·化合物 | 第39页 |
| 第二节 实验方法 | 第39-51页 |
| ·DNA提取 | 第39-40页 |
| ·RNA提取 | 第40页 |
| ·基因突变检测 | 第40-42页 |
| ·cDNA合成 | 第42页 |
| ·半定量PCR和实时定量PCR(Real‐time PCR) | 第42-43页 |
| ·琼脂糖细胞小球制备(Preparation of Agarose Cell Pellets For IHC) | 第43-44页 |
| ·免疫组织化学染色(Immunohistochemical staining, IHC) | 第44-45页 |
| ·细胞培养 | 第45-46页 |
| ·质粒转染 | 第46页 |
| ·SiRNA转染 | 第46页 |
| ·Western blotting | 第46-47页 |
| ·免疫共沉淀(Flag IP) | 第47-48页 |
| ·SRB检测细胞增殖 | 第48页 |
| ·流式细胞仪检测细胞周期 | 第48-49页 |
| ·流式细胞仪检测细胞凋亡 | 第49页 |
| ·裸鼠成瘤实验 | 第49-50页 |
| ·酵母双杂交技术 | 第50页 |
| ·统计分析 | 第50-51页 |
| 第四章 结果 | 第51-85页 |
| 第一节 基因ERRF编码区突变的检测 | 第52-55页 |
| ·基因ERRF在乳腺癌临床样本中的突变检测 | 第52-54页 |
| ·基因ERRF在乳腺癌细胞系中的突变检测 | 第54-55页 |
| 第二节 基因ERRF在乳腺癌中mRNA水平表达变化 | 第55-60页 |
| ·基因ERRF mRNA在乳腺癌细胞系中的表达 | 第55-57页 |
| ·基因ERRF mRNA在乳腺癌临床样本中的表达 | 第57-60页 |
| ·基因ERRF mRNA在已公开的芯片数据库中的表达 | 第60页 |
| 第三节 ERRF蛋白在乳腺癌组织中的表达 | 第60-71页 |
| ·ERRF抗体特异性的验证 | 第61-62页 |
| ·ERRF蛋白在乳腺癌样本中的表达 | 第62-63页 |
| ·ERRF蛋白的表达与乳腺癌患者临床病例特征间的关系 | 第63-67页 |
| ·ERRF蛋白的表达与乳腺癌患者预后的关系 | 第67-71页 |
| 第四节 ERRF对乳腺癌细胞系在体外和体内增殖的影响 | 第71-75页 |
| ·SiRNA敲减ERRF的表达抑制乳腺癌细胞在体外的增殖 | 第71-74页 |
| ·SiRNA敲减ERRF抑制乳腺癌细胞在裸鼠体内的增殖 | 第74-75页 |
| 第五节 ERRF在乳腺癌细胞中发挥重要作用的机制研究 | 第75-85页 |
| ·PI3K/Akt信号通路抑制剂对ERRF表达的影响 | 第76-77页 |
| ·雌激素及其受体E2‐ER信号通路变化对ERRF表达的影响 | 第77-79页 |
| ·ERRF的表达对雌激素及其受体E2‐ER信号通路的影响 | 第79-80页 |
| ·酵母双杂交筛选ERRF相互作用蛋白 | 第80-85页 |
| 第五章 讨论 | 第85-90页 |
| 第一节 ERRF表达与乳腺癌发生的关系 | 第85-89页 |
| 第二节 ERRF与PI3K/Akt及E2‐ER信号通路的关系 | 第89-90页 |
| 第六章 结论 | 第90-91页 |
| 参考文献 | 第91-100页 |
| 致谢 | 第100-102页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第102-104页 |