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新的雌激素受体(ER)相关核分子ERRF对ER阳性乳腺癌细胞生长的调节作用及其分子机制研究

摘要第1-7页
Abstract第7-9页
目录第9-12页
第一章 引言第12-34页
 第一节 乳腺的发育、结构和生理学第12-16页
     ·正常乳腺的发生和发育第12-13页
     ·乳腺的基本构造及生理变化第13-16页
 第二节 乳腺癌的发生和演进第16-24页
     ·乳腺癌的发生第16-20页
     ·乳腺癌的分级,分期和分类第20-21页
     ·乳腺癌的临床诊断与治疗第21-24页
 第三节 雌激素及其受体信号通路(Estrogen-ER signaling pathway)第24-32页
     ·雌激素和雌激素受体信号通路概述第24-26页
     ·雌激素在乳腺发育中的重要作用第26-28页
     ·雌激素在乳腺癌发生过程中的重要作用第28-32页
 第四节 ERRF/C1orf64 的结构和功能预测第32-34页
     ·ERRF/C1orf64 的基因定位和结构第32页
     ·ERRF/C1orf64 的基因功能预测第32-33页
     ·ERRF 在乳腺癌发生过程中的可能作用第33-34页
第二章 研究目标与意义第34-36页
 第一节 研究目标第34页
 第二节 研究意义第34-36页
第三章 材料与方法第36-51页
 第一节 实验材料第36-39页
     ·组织样本第36页
     ·细胞系第36-37页
     ·菌株和质粒第37页
     ·克隆所用限制性内切酶第37页
     ·抗体第37页
     ·PCR相关试剂第37-38页
     ·干扰用小分子RNA (siRNA)第38-39页
     ·小鼠第39页
     ·化合物第39页
 第二节 实验方法第39-51页
     ·DNA提取第39-40页
     ·RNA提取第40页
     ·基因突变检测第40-42页
     ·cDNA合成第42页
     ·半定量PCR和实时定量PCR(Real‐time PCR)第42-43页
     ·琼脂糖细胞小球制备(Preparation of Agarose Cell Pellets For IHC)第43-44页
     ·免疫组织化学染色(Immunohistochemical staining, IHC)第44-45页
     ·细胞培养第45-46页
     ·质粒转染第46页
     ·SiRNA转染第46页
     ·Western blotting第46-47页
     ·免疫共沉淀(Flag IP)第47-48页
     ·SRB检测细胞增殖第48页
     ·流式细胞仪检测细胞周期第48-49页
     ·流式细胞仪检测细胞凋亡第49页
     ·裸鼠成瘤实验第49-50页
     ·酵母双杂交技术第50页
     ·统计分析第50-51页
第四章 结果第51-85页
 第一节 基因ERRF编码区突变的检测第52-55页
     ·基因ERRF在乳腺癌临床样本中的突变检测第52-54页
     ·基因ERRF在乳腺癌细胞系中的突变检测第54-55页
 第二节 基因ERRF在乳腺癌中mRNA水平表达变化第55-60页
     ·基因ERRF mRNA在乳腺癌细胞系中的表达第55-57页
     ·基因ERRF mRNA在乳腺癌临床样本中的表达第57-60页
     ·基因ERRF mRNA在已公开的芯片数据库中的表达第60页
 第三节 ERRF蛋白在乳腺癌组织中的表达第60-71页
     ·ERRF抗体特异性的验证第61-62页
     ·ERRF蛋白在乳腺癌样本中的表达第62-63页
     ·ERRF蛋白的表达与乳腺癌患者临床病例特征间的关系第63-67页
     ·ERRF蛋白的表达与乳腺癌患者预后的关系第67-71页
 第四节 ERRF对乳腺癌细胞系在体外和体内增殖的影响第71-75页
     ·SiRNA敲减ERRF的表达抑制乳腺癌细胞在体外的增殖第71-74页
     ·SiRNA敲减ERRF抑制乳腺癌细胞在裸鼠体内的增殖第74-75页
 第五节 ERRF在乳腺癌细胞中发挥重要作用的机制研究第75-85页
     ·PI3K/Akt信号通路抑制剂对ERRF表达的影响第76-77页
     ·雌激素及其受体E2‐ER信号通路变化对ERRF表达的影响第77-79页
     ·ERRF的表达对雌激素及其受体E2‐ER信号通路的影响第79-80页
     ·酵母双杂交筛选ERRF相互作用蛋白第80-85页
第五章 讨论第85-90页
 第一节 ERRF表达与乳腺癌发生的关系第85-89页
 第二节 ERRF与PI3K/Akt及E2‐ER信号通路的关系第89-90页
第六章 结论第90-91页
参考文献第91-100页
致谢第100-102页
个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果第102-104页

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