| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-14页 |
| 主要缩略语表 | 第14-16页 |
| 第一章 引言 | 第16-35页 |
| 第一节 转移性乳腺癌及其动物模型 | 第16-19页 |
| ·转移性乳腺癌 | 第16-17页 |
| ·转移性乳腺癌动物模型 | 第17-19页 |
| 第二节 人胚胎干细胞向内皮细胞的分化 | 第19-21页 |
| 第三节 内皮前体细胞在肿瘤血管新生中发挥的作用 | 第21-23页 |
| 第四节 内皮前体细胞在肿瘤基因治疗中作为细胞载体的应用 | 第23-27页 |
| ·内皮前体细胞的来源 | 第23-25页 |
| ·外源性内皮前体细胞的肿瘤靶向性 | 第25-26页 |
| ·以内皮前体细胞作为肿瘤靶向治疗载体的策略 | 第26-27页 |
| 第五节 自杀基因治疗系统的原理和方法 | 第27-31页 |
| ·用于自杀基因治疗系统的酶类和前药 | 第28-29页 |
| ·旁观者效应和好施者效应 | 第29-30页 |
| ·如何增强旁观者效应 | 第30页 |
| ·在自杀基因治疗系统中发挥作用的免疫反应 | 第30-31页 |
| 第六节 胚胎干细胞对肿瘤细胞的抑制作用 | 第31-33页 |
| ·肿瘤和胚胎发育信号通路的交汇 | 第31-32页 |
| ·胚胎干细胞微环境对肿瘤细胞的影响 | 第32-33页 |
| 第七节 本课题的目的、意义及科研假设 | 第33-35页 |
| 第二章 材料与方法 | 第35-62页 |
| 第一节 实验材料 | 第35-38页 |
| ·细胞 | 第35页 |
| ·菌株 | 第35页 |
| ·质粒 | 第35页 |
| ·主要实验试剂 | 第35-37页 |
| ·主要实验仪器 | 第37-38页 |
| ·实验动物 | 第38页 |
| ·其它实验材料 | 第38页 |
| 第二节 实验方法 | 第38-62页 |
| ·人胚胎干细胞来源内皮细胞的获得 | 第38-39页 |
| ·细胞培养 | 第39-41页 |
| ·质粒的构建 | 第41-44页 |
| ·质粒的提取与浓度的测定 | 第44-45页 |
| ·慢病毒的包装 | 第45-46页 |
| ·稳定细胞系的建立 | 第46-47页 |
| ·细胞条件培养基的收集 | 第47-48页 |
| ·细胞增殖实验 | 第48页 |
| ·流式细胞技术测定细胞周期 | 第48-49页 |
| ·流式细胞技术测定细胞凋亡情况 | 第49页 |
| ·Transwell 小室模型测定 MDA-MB-231 细胞的迁移能力 | 第49-50页 |
| ·划痕实验 | 第50-51页 |
| ·细胞荧光实验 | 第51页 |
| ·蛋白免疫印迹实验（Western blots） | 第51-54页 |
| ·WST-1 实验 | 第54页 |
| ·“旁观者效应”的测定 | 第54-55页 |
| ·Transwell 小室模型测定肿瘤细胞上清吸引 hESC-ECs 的能力 | 第55页 |
| ·乳腺癌肺转移小鼠模型的建立 | 第55-56页 |
| ·可见光成像 | 第56-57页 |
| ·细胞肿瘤靶向性的测定 | 第57页 |
| ·对乳腺癌肺转移小鼠模型的治疗方法 | 第57-58页 |
| ·动物标本的取材和冰冻切片的制作 | 第58页 |
| ·HE 染色（冰冻切片） | 第58-59页 |
| ·免疫荧光染色（冰冻切片） | 第59-60页 |
| ·免疫组织化学染色（冰冻切片） | 第60-61页 |
| ·荧光法 TUNEL 凋亡检测（冰冻切片） | 第61页 |
| ·统计方法 | 第61-62页 |
| 第三章 实验结果与分析 | 第62-87页 |
| 第一节 人胚胎干细胞来源内皮细胞表面标志物的表达和功能检测 | 第62-65页 |
| ·体外人胚胎干细胞向内皮细胞的分化 | 第62-63页 |
| ·人胚胎干细胞来源内皮细胞表面标志物的表达 | 第63-64页 |
| ·人胚胎干细胞来源内皮细胞的功能检测 | 第64-65页 |
| 第二节 人胚胎干细胞来源内皮细胞对乳腺癌细胞生长的影响 | 第65-68页 |
| ·hESC-ECs 通过旁分泌作用减慢 MDA-MB-231 细胞的生长速度 | 第65页 |
| ·hESC-EC 条件培养基导致 MDA-MB-231 细胞周期分布改变 | 第65-66页 |
| ·hESC-EC 条件培养基增加低血清培养条件下 MDA-MB-231 细胞的凋亡比例 | 第66-67页 |
| ·hESC-EC 条件培养基对 MDA-MB-231 细胞增殖和凋亡相关蛋白表达水平的影响 | 第67-68页 |
| 第三节 人胚胎干细胞来源内皮细胞对乳腺癌细胞迁移能力的影响 | 第68-72页 |
| ·hESC-ECs 通过旁分泌作用减弱 MDA-MB-231 细胞的迁移能力 | 第68-70页 |
| ·hESC-ECs 通过旁分泌作用抑制 MDA-MB-231 细胞的上皮-间充质转化 | 第70-72页 |
| 第四节 人胚胎干细胞来源内皮细胞对乳腺癌细胞 Wnt 信号通路的影响 | 第72-73页 |
| 第五节 人胚胎干细胞来源内皮细胞的肿瘤靶向性研究 | 第73-78页 |
| ·体外 hESC-ECs 的肿瘤靶向性 | 第73-74页 |
| ·体内 hESC-ECs 的肿瘤靶向性 | 第74-76页 |
| ·经静脉注射的 hESC-ECs 能够引起周围肿瘤细胞的凋亡 | 第76-78页 |
| 第六节 表达自杀基因的人胚胎干细胞来源内皮细胞的建立 | 第78-82页 |
| ·表达自杀基因的人胚胎干细胞来源内皮细胞的建立 | 第78-79页 |
| ·更西洛韦对 EC-TF 细胞的杀伤作用 | 第79-81页 |
| ·在给予更西洛韦条件下 EC-TF 细胞对共培养的 MDA-MB-231 细胞的“旁观者效应” | 第81-82页 |
| 第七节 人胚胎干细胞来源内皮细胞作为基因靶向治疗载体对转移性乳腺癌小鼠模型的治疗 | 第82-87页 |
| 第四章 讨论 | 第87-91页 |
| 第五章 研究结论及展望 | 第91-93页 |
| 第一节 主要研究结论 | 第91页 |
| 第二节 主要创新点 | 第91-92页 |
| 第三节 研究展望 | 第92-93页 |
| 参考文献 | 第93-100页 |
| 致谢 | 第100-101页 |
| 综述 | 第101-109页 |
| References | 第106-109页 |
| 个人简历 | 第109-110页 |
