中文摘要 | 第1-11页 |
Abstract | 第11-14页 |
1 前言 | 第14-23页 |
·植物油脂的合成途径 | 第14-16页 |
·甘油-3-磷酸酰基转移酶基因(GPAT)的研究进展 | 第16-17页 |
·溶血磷脂酸酰基转移酶基因(LPAAT)的研究进展 | 第17-19页 |
·二酰甘油酰基转移酶基因(DGAT)的研究进展 | 第19-20页 |
·花生栽培种的起源研究 | 第20-22页 |
·花生区组的来源和染色体特点 | 第20-21页 |
·花生栽培种与二倍体野生种间亲缘关系的研究进展 | 第21-22页 |
·本研究的目的意义 | 第22-23页 |
2 材料与方法 | 第23-37页 |
·花生 GPAT9 和 LPAAT 的克隆试验 | 第23-30页 |
·植物材料 | 第23-24页 |
·克隆 GPAT9 所用材料 | 第23页 |
·克隆 LPAAT 所用材料 | 第23-24页 |
·主要试剂 | 第24页 |
·试验方法 | 第24-30页 |
·引物设计 | 第24页 |
·取样方法 | 第24页 |
·籽仁 RNA 提取及 cDNA 合成 | 第24-25页 |
·总 RNA 及其逆转录产物的检测 | 第25-26页 |
·花生 GPAT9 和 LPAAT cDNA 序列的 PCR 扩增 | 第26-27页 |
·花生叶片基因组 DNA 的提取 | 第27页 |
·花生 GPAT9 和 LPAAT DNA 序列的 PCR 扩增 | 第27-28页 |
·PCR 产物的胶回收 | 第28-29页 |
·目的片段与 pEASY-T1 载体连接并转化大肠杆菌 | 第29页 |
·取阳性重组子测序 | 第29-30页 |
·序列生物信息学分析 | 第30页 |
·花生种子 AhGPAT9 的表达差异检测 | 第30-32页 |
·试验材料 | 第30-31页 |
·试验方法 | 第31-32页 |
·花生种子含油量的测定 | 第31页 |
·实时荧光定量 PCR(qRT-PCR)引物设计 | 第31-32页 |
·qRT-PCR 反应及数据处理 | 第32页 |
·GPAT9 表达载体的构建 | 第32-37页 |
·菌种和质粒 | 第32页 |
·酶和试剂 | 第32-33页 |
·试验方法 | 第33-37页 |
·PCR 引物 | 第33页 |
·质粒 DNA 的提取 | 第33页 |
·双酶切目的片段与 pGBVE 质粒大片段 | 第33-34页 |
·连接目的片段与质粒大片段 | 第34页 |
·连接体转化大肠杆菌感受态细胞 | 第34页 |
·重组质粒的筛选与鉴定 | 第34页 |
·感受态农杆菌 LBA4404 的制备 | 第34-35页 |
·重组质粒转入农杆菌感受态细胞并筛选鉴定 | 第35-37页 |
3 结果与分析 | 第37-52页 |
·花生种子含油量分析 | 第37页 |
·花生 GPAT9 的克隆及分析 | 第37-44页 |
·籽仁总 RNA 及 cDNA 的电泳检测 | 第37-38页 |
·AhGPAT9 的核苷酸序列分析 | 第38-39页 |
·AhGPAT9 推导的氨基酸序列分析 | 第39-42页 |
·不同花生品种籽仁 AhGPAT9 的表达差异分析 | 第42-44页 |
·AhGPAT9 植物超表达载体构建 | 第44页 |
·花生 LPAAT 的克隆及分析 | 第44-52页 |
·LPAAT 的核苷酸序列分析 | 第44-50页 |
·LPAAT 蛋白的生物信息学分析 | 第50-51页 |
·栽培种与野生种 LPAAT 核苷酸序列的系统进化分析 | 第51-52页 |
4 讨论 | 第52-56页 |
·不同花生栽培品种 AhGPAT9 的等位变异分析 | 第52页 |
·花生种子发育过程中 AhGPAT9 的相对表达量与品种含油量的相关性分析 | 第52页 |
·花生 LPAAT 的序列分析 | 第52-53页 |
·花生 GPAT 蛋白的跨膜结构 | 第53-54页 |
·关于本试验取样时期设计的问题 | 第54页 |
·植物表达载体的构建意义及注意事项 | 第54-56页 |
5 结论 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-64页 |
附录 | 第64-66页 |
致谢 | 第66-67页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第67页 |