| 中文摘要 | 第1-12页 |
| Abstract | 第12-14页 |
| 1 前言 | 第14-23页 |
| ·MAPK 级联信号途径 | 第14-15页 |
| ·植物中 MAPK 的结构特点和分类 | 第15-17页 |
| ·植物中 MAPK 级联信号途径的作用 | 第17-22页 |
| ·植物中 MAPK 级联信号途径与非生物胁迫 | 第18-19页 |
| ·植物中 MAPK 级联信号途径与生物胁迫 | 第19-21页 |
| ·植物中 MAPK 级联信号途径与生长发育 | 第21-22页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第22-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-37页 |
| ·实验材料 | 第23-25页 |
| ·植物材料 | 第23页 |
| ·菌株与质粒 | 第23页 |
| ·酶与各种生化试剂 | 第23页 |
| ·序列测定 | 第23页 |
| ·引物 | 第23-25页 |
| ·实验方法 | 第25-37页 |
| ·棉花幼苗的培养与处理 | 第25-26页 |
| ·植物总 RNA 的提取 | 第26-27页 |
| ·利用 Trizol Kit 提取总 RNA | 第26页 |
| ·利用 CTAB 法提取总 RNA | 第26-27页 |
| ·cDNA 第一链的合成 | 第27页 |
| ·cDNA 纯化（用于 5' RACE） | 第27页 |
| ·cDNA 的末端加尾反应（用于 5' RACE） | 第27-28页 |
| ·PCR 扩增片段的回收 | 第28页 |
| ·目的片段与克隆载体的连接 | 第28-29页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第29页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第29页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的转化 | 第29页 |
| ·试剂盒法质粒微量提取方案 | 第29-30页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第30页 |
| ·cDNA 全长序列的获得 | 第30-31页 |
| ·利用简并引物进行 PCR 扩增以获得中间片段 | 第30-31页 |
| ·5' RACE 和 3' RACE | 第31页 |
| ·cDNA 全长序列的获得 | 第31页 |
| ·植物基因组 DNA 的提取 | 第31-32页 |
| ·CTAB 法提取基因组 DNA | 第31-32页 |
| ·植物基因组 DNA 的纯化 | 第32页 |
| ·小量法提取基因组 DNA | 第32页 |
| ·全长基因组序列的获得 | 第32-33页 |
| ·基因枪瞬时转化 | 第33-34页 |
| ·目的基因融合 GFP 表达载体制备 | 第33页 |
| ·基因枪微弹的准备 | 第33页 |
| ·基因枪转化 | 第33-34页 |
| ·植物表达载体的构建与转化 | 第34-36页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备 | 第34-35页 |
| ·植物表达载体的构建及农杆菌感受态细胞的转化 | 第35页 |
| ·农杆菌介导转化烟草 | 第35-36页 |
| ·转基因植物 GUS 组织化学染色分析 | 第36页 |
| ·酵母双杂交和双分子荧光互补实验 | 第36-37页 |
| 3 结果与分析 | 第37-70页 |
| ·棉花 GhMPK6a 基因的分离及序列分析 | 第37-42页 |
| ·GhMPK6a 中间片段的分离 | 第37页 |
| ·GhMPK6a 5'片段及 3'片段的分离 | 第37-38页 |
| ·GhMPK6a 全长 cDNA 及 DNA 序列的分离 | 第38-39页 |
| ·GhMPK6a 启动子序列的分离 | 第39-40页 |
| ·GhMPK6a cDNA 及 DNA 序列分析 | 第40页 |
| ·GhMPK6a 编码蛋白序列分析 | 第40-42页 |
| ·棉花 GhMPK6a 基因的相关生物学功能分析 | 第42-57页 |
| ·GhMPK6a 的亚细胞定位分析 | 第42-43页 |
| ·GhMPK6a 的表达模式分析 | 第43-44页 |
| ·GhMPK6a 基因超表达转基因本生烟的获取 | 第44-46页 |
| ·GhMPK6a 基因正义表达载体的构建 | 第45页 |
| ·超表达 GhMPK6a 本生烟的获得 | 第45-46页 |
| ·GhMPK6a 转基因本生烟的生物学功能分析 | 第46-57页 |
| ·GhMPK6a 转基因本生烟对甘露醇引起的渗透胁迫的敏感性 | 第46-47页 |
| ·GhMPK6a 转基因本生烟幼苗对干旱胁迫的敏感性 | 第47-48页 |
| ·GhMPK6a 转基因植株在干旱胁迫后与氧化系统的关系 | 第48-50页 |
| ·GhMPK6a 转基因植株对高盐胁迫的敏感性 | 第50-51页 |
| ·GhMPK6a 转基因植株系对 ABA 的敏感性 | 第51-52页 |
| ·GhMPK6a 转基因植株系对青枯细菌侵染的敏感性 | 第52-53页 |
| ·GhMPK6a 启动子分析 | 第53-55页 |
| ·GhMPK6a 与 GhMKK4、GhMKK5 互作关系 | 第55-57页 |
| ·棉花 GhMPK20 基因的分离及序列分析 | 第57-61页 |
| ·GhMPK20 全长 cDNA 序列的分离 | 第57-58页 |
| ·GhMPK20 基因组及启动子序列的分离 | 第58-59页 |
| ·GhMPK20 编码氨基酸序列分析 | 第59-61页 |
| ·棉花 GhMPK20 基因的相关生物学功能分析 | 第61-70页 |
| ·GhMPK20 的表达模式分析 | 第61-62页 |
| ·GhMPK20 的亚细胞定位分析 | 第62-63页 |
| ·GhMPK20 基因超表达转基因本生烟的获取 | 第63页 |
| ·GhMPK20 转基因本生烟的生物学功能分析 | 第63-70页 |
| ·GhMPK20 转基因本生烟对干旱的敏感性 | 第63-64页 |
| ·GhMPK20 转基因本生烟在干旱胁迫后与氧化系统的关系 | 第64-66页 |
| ·GhMPK20 转基因本生烟对高盐胁迫的敏感性 | 第66-67页 |
| ·GhMPK20 转基因本生烟萌发后对甘露醇、NaCl 及 ABA 信号分子的敏感性 | 第67页 |
| ·GhMPK20 启动子分析 | 第67-69页 |
| ·GhMPK20 与 GhMKK4、GhMKK5 互作关系 | 第69-70页 |
| 4 讨论 | 第70-75页 |
| 5 结论 | 第75-76页 |
| 参考文献 | 第76-81页 |
| 致谢 | 第81-82页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第82页 |
