中文摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-9页 |
符号说明 | 第9-10页 |
文献综述 | 第10-22页 |
1、K88菌毛 | 第10-11页 |
2、溶血素 | 第11-14页 |
·溶血素的分类 | 第11页 |
·大肠杆菌溶血素的遗传性 | 第11页 |
·溶血素合成的调节与表达 | 第11-12页 |
·大肠杆菌溶血素的分泌系统 | 第12-13页 |
·溶血素的特性与功能 | 第13页 |
·溶血素与毒力 | 第13-14页 |
·溶血素与致病 | 第14页 |
3、λ噬菌体的Red同源重组系统 | 第14-17页 |
·Red重组系统的主要蛋白及重组机制 | 第15-16页 |
·Red同源重组系统的应用 | 第16-17页 |
参考文献 | 第17-22页 |
研究一、肠毒素大肠杆菌标准株K88ac、K88ad hlyA基因缺失突变株的构建及相关功能初步分析 | 第22-44页 |
摘要 | 第22页 |
Abstract | 第22-23页 |
1、材料 | 第23-25页 |
·菌株、质粒与抗体 | 第23-24页 |
·培养基和主要试剂及配制 | 第24页 |
·主要仪器 | 第24-25页 |
2、方法 | 第25-32页 |
·K88ac、K88ad溶血素毒素检测 | 第25-26页 |
·PCR引物的设计 | 第26页 |
·融合PCR产物的制备及纯化 | 第26-27页 |
·感受态的制备及转化 | 第27-28页 |
·质粒pKD46的消除 | 第28页 |
·第一次同源重组菌△hlyA::Cat的PCR鉴定 | 第28-29页 |
·FLP位点专一性重组 | 第29页 |
·第二次重组菌△hlyA的鉴定 | 第29-30页 |
·互补株的构建及验证 | 第30-32页 |
·不同血平板验证hlyA基因的缺失 | 第32页 |
·溶血活性的测定 | 第32页 |
3、结果 | 第32-41页 |
·K88ac、K88ad溶血素毒素检测 | 第32-33页 |
·融合PCR产物的制备 | 第33-34页 |
·第一次重组菌△hlyA::Cat的PCR鉴定 | 第34页 |
·第二次重组菌△hlyA的PCR鉴定 | 第34-35页 |
·鉴定引物扩增△hlyA菌株的序列分析 | 第35-36页 |
·互补株的构建及验证 | 第36-38页 |
·不同血平板验证hlyA基因的缺失 | 第38-40页 |
·溶血活性的测定 | 第40-41页 |
4、讨论 | 第41-43页 |
参考文献 | 第43-44页 |
研究二、肠毒素大肠杆菌K88ac、K88ad hlyA基因缺失突变株的相关功能性分析 | 第44-58页 |
摘要 | 第44页 |
Abstrat | 第44-45页 |
1、材料 | 第45-46页 |
·相关菌株和制品 | 第45页 |
·主要试剂及配制 | 第45-46页 |
·仪器设备 | 第46页 |
·实验动物 | 第46页 |
2、方法 | 第46-48页 |
·细菌的生化鉴定 | 第46页 |
·生长试验 | 第46页 |
·小鼠毒力实验 | 第46-48页 |
3、结果 | 第48-55页 |
·细菌生化实验 | 第48-49页 |
·突变株的生长曲线测定 | 第49-50页 |
·小鼠毒力实验结果 | 第50-55页 |
4、讨论 | 第55-57页 |
参考文献 | 第57-58页 |
全文小结 | 第58-59页 |
致谢 | 第59-60页 |