| 摘要 | 第1-11页 |
| ABSTRACT | 第11-14页 |
| 引言 | 第14-16页 |
| 上篇 文献综述 | 第16-57页 |
| 第一章 植物与卵菌互作的细胞生物学与分子机制研究 | 第17-35页 |
| 1 卵菌的无性阶段以及与植物互作过程 | 第17-24页 |
| ·卵菌特异性状 | 第17-18页 |
| ·植物病原卵菌无性阶段 | 第18-20页 |
| ·侵染循环 | 第20-24页 |
| 2 卵菌生长发育以及侵染过程的分子机制 | 第24-29页 |
| ·卵菌基因组学、转录组学研究为了解疫霉菌的生长发育和致病机理提供了极大支持 | 第24-26页 |
| ·卵菌阶段特异性表达基因 | 第26-27页 |
| ·生长发育以及致病性相关基因的功能验证 | 第27-29页 |
| 参考文献 | 第29-35页 |
| 第二章 MAP kinase调控机制研究进展 | 第35-57页 |
| 1 概述 | 第35-41页 |
| ·MAP激酶成员以及进化 | 第37页 |
| ·MAP激酶调控机制 | 第37-40页 |
| ·MAPK在植物病原菌中的研究进展 | 第40-41页 |
| 2 转录因子概述 | 第41-50页 |
| ·转录因子激活机制 | 第42-47页 |
| ·真核生物中转录因子研究进展 | 第47-50页 |
| 参考文献 | 第50-57页 |
| 下篇 研究内容 | 第57-128页 |
| 第一章 大豆疫霉菌MAP kinase PsSAK1沉默突变体转录组DGE表达谱分析 | 第58-72页 |
| 摘要 | 第58页 |
| ABSTRACT | 第58-61页 |
| 1 材料与方法 | 第61-63页 |
| ·供试菌株、植物材料 | 第61页 |
| ·DGE转录组样品的准备 | 第61-62页 |
| ·RNA的提取及送测 | 第62页 |
| ·实时定量PCR分析 | 第62-63页 |
| 2 结果与分析 | 第63-67页 |
| ·大豆疫霉各个样品的质量检测 | 第63页 |
| ·大豆疫霉PsSAK1突变体DGE表达谱数据分析 | 第63-67页 |
| 3 讨论 | 第67-69页 |
| 参考文献 | 第69-72页 |
| 第二章 受PsSAK1调控的PsMYB1参与调控大豆疫霉生长发育和致病性 | 第72-96页 |
| 摘要 | 第72页 |
| ABSTRACT | 第72-74页 |
| 1 材料与方法 | 第74-79页 |
| ·供试菌株及植物材料 | 第74页 |
| ·提取RNA以及qRT-PCR | 第74-75页 |
| ·数据库信息、同源检索 | 第75页 |
| ·基因克隆、载体构建及大豆疫霉遗产转化 | 第75-77页 |
| ·PsMYB1沉默转化子的筛选 | 第77页 |
| ·PsMYB1沉默突变体的表现型分析 | 第77-78页 |
| ·外源添加糖类物质刺激P6497大量孢子囊直接萌发 | 第78页 |
| ·致病性测定 | 第78页 |
| ·酵母双杂交验证PsSAK1与PsMYB1是否互作 | 第78-79页 |
| 2 结果与分析 | 第79-91页 |
| ·大豆疫霉PsMYB1在PsSAK1沉默突变体DGE表达谱中下调表达 | 第79页 |
| ·PsMYB1编码一个R2R3型MYB转录因子 | 第79-82页 |
| ·PsMYB1在形成游动孢子阶段、接种1.5h时上调表达 | 第82页 |
| ·大豆疫霉PsMYB1沉默转化子的获得 | 第82-83页 |
| ·PsMYB1沉默转化子的表型分析 | 第83-91页 |
| ·用酵母互作的方法验证PsMYB1与PsSAK1之间的关系 | 第91页 |
| 3 讨论 | 第91-94页 |
| 参考文献 | 第94-96页 |
| 第三章 大豆疫霉MYB转录因子家族成员功能域及转录模式分析 | 第96-114页 |
| 摘要 | 第96页 |
| ABSTRACT | 第96-98页 |
| 1 材料与方法 | 第98-99页 |
| ·寻找Myb转录因子基因以及基因model的分析 | 第98页 |
| ·蛋白功能域分析 | 第98-99页 |
| ·聚类分析 | 第99页 |
| ·大豆疫霉5个无性发育阶段以及5个侵染阶段RNA的获得 | 第99页 |
| ·Myb基因表达量分析 | 第99页 |
| 2 结果与分析 | 第99-110页 |
| ·大豆疫霉编码多型Myb转录因子 | 第99-104页 |
| ·大豆疫霉Myb转录因子候选编码基因在生长发育及致病过程中的特异性表达分析 | 第104-106页 |
| ·qRT-PCR验证大豆疫霉Myb转录因子在5个无性发育阶段以及5个侵染阶段的转录模式 | 第106-107页 |
| ·大豆疫霉Myb家族在PsSAK1、PsMPK1沉默突变体DGE转录谱中的表达水平分析 | 第107-110页 |
| 3 讨论 | 第110-112页 |
| 参考文献 | 第112-114页 |
| 第四章 大豆疫霉MYB家族成员候选基因的功能验证 | 第114-128页 |
| 摘要 | 第114页 |
| ABSTRACT | 第114-116页 |
| 1 材料与方法 | 第116-120页 |
| ·供试菌株及植物材料 | 第116页 |
| ·目的基因的扩增以及dsRNA合成 | 第116-118页 |
| ·大豆疫霉瞬时转化 | 第118-119页 |
| ·qRT-PCR分析沉默突变体目的基因表达水平--沉默转化子的筛选 | 第119页 |
| ·沉默突变体各个阶段表现型分析 | 第119-120页 |
| 2 结果与分析 | 第120-125页 |
| ·大豆疫霉Myb蛋白编码基因家族4个候选成员的选择 | 第120-121页 |
| ·大豆疫霉Myb蛋白PsMYB-like 1-39(Ps141522)dsRNA介导靶基因沉默 | 第121-124页 |
| ·PsMYB-like 1-7、PsMYB-like 3-6、PsMYB-like 2-2基因的克隆以及功能验证 | 第124-125页 |
| 3 讨论 | 第125-127页 |
| 参考文献 | 第127-128页 |
| 附录一 | 第128-130页 |
| 附录二 大豆疫霉菌MAP kinase PsMPKl沉默突变体转录组DGE表达谱分析 | 第130-142页 |
| 参考文献 | 第140-142页 |
| 本论文创新点 | 第142-144页 |
| 攻读博士学位期间发表的研究论文 | 第144-146页 |
| 致谢 | 第146页 |
